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AULA-PRÁTICA: Contagem Total do Número de Microorganismos Viáveis . O procedimento foi realizado conforme roteiro e vídeo da aula prática disponibilizado no AVA. Duas amostras foram escolhidas, uma de Shampoo Infantil (A), e outra de Sabonete Líquido (B). As amostras foram inoculadas pelo método direto (spread plate) em placas contendo o meio LB para crescimento bacteriano, e o meio YPD para crescimento de fungos. Para o produto A, foram realizadas duas diluições em Tween 80 a 1%, 1:10 e 1:100. Já para o produto B, foram realizadas 5 diluições seriadas em 1:10, 1:100, 1:1000, 1:10000 e 1:100000. Segue uma tabela contendo os resultados da aula prática de Contagem Total do Número de Microorganismos Viáveis. Produto A – Shampoo infantil: Diluições LB YPD 1:10 Sem crescimento Sem crescimento 1:100 Sem crescimento Sem crescimento Produto B – Sabonete líquido: Diluições LB YPD 1:10 Crescimento incontável Crescimento incontável 1:100 Crescimento incontável Crescimento incontável 1:1000 90 UFC Crescimento incontável 1:10000 21 UFC 16 UFC 1:100000 4 UFC 5 UFC De posse dos resultados, poderemos realizar os cálculos a fim de conhecer o total de microoganismos presentes nas amostras. As equações utilizadas seguiram o modelo abaixo: Cálculo TAMC = número de bactérias / g ou mL = (A) Cálculo TYMC = número de fungos / g ou mL = (B) (A) + (B) = número total de microorganismos por g ou mL de produto Produto A – Shampoo Infantil Como não houve crescimento na menor diluição (1:10) em ambos os meios, podemos considerar que o resultado de bactérias e fungos é <1 UFC/mL. Como os limites microbianos para produtos dessa classe (Tipo I: Produtos para uso infantil; Produtos para área dos olhos; Produtos que entram em contato com mucosa) é de 10² UFC/g ou mL, temos que este produto está dentro dos limites microbianos aceitáveis na legislação para uso. Produto B – Sabonete Líquido A diluição escolhida para calcular ambos os produtos foi a de 1:10000. UFC/g ou mL = nº de microoganismos / diluição · Para contagem bacteriana (meio LB) X = 21 / 10-4 X = 21 x 105 UFC/mL Cálculo TAMC = 2,1 x 105 UFC/mL · Para contagem de fungos (meio YPD) · X = 16 / 10-4 · X = 1,6 x 105 UFC/mL · Cálculo TYMC = 1,6 x 105 UFC/mL · Total de Microorganismos Viáveis 2,1 x 105 UFC/Ml + 1,6 x 105 UFC/mL = 3,7 x 105 UFC/mL Como os limites microbianos para produtos dessa classe (Tipo II: Demais produtos cosméticos susceptíveis a contaminação microbiológica) é de 103 UFC/g ou mL, temos que este produto está com valores acima dos limites microbianos aceitáveis na legislação para uso. Portanto, não é seguro para comercialização nem para utilização.
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