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HISTOLOGIA Histología: Estudio de tejidos Tejido: Conjunto de células que tienen una función específica. Existen cuatro tipos principales de tejidos en el cuerpo humano: tejido epitelial, tejido conectivo, tejido muscular y tejido nervioso. TECNICA HISTOLOGICA Para poder preservar los tejidos usamos técnicas histológicas para luego observarlos en el microscopio. Estas técnicas preparan los tejido de modo que sean lo mas parecido posible a su estado natural de vida. Objetivos de una buena T.H 1. Producir cortes suficientemente delgados con la mejor preservación morfológica posible, a fin de que logren ser observados con la Resolución de los microscopios. 2. Conservar las características biológicas y químicas de las células y tejidos para que sean estudiados utilizando métodos especializados. 3. Permitir que se estudien en un solo corte la mayor parte de las estructuras celulares y tisulares. La T.H tiene 6 pasos Obtención del material El material puede ser obtenido de diferentes maneras: • Biopsia (toma de muestra, punción pinchando con aguja, cortando con bisturí, sacar pedacitos con pinzas/endoscopia) (Pacientes vivos con fin diagnostico) • biopsia incisional (saco solo un pedacito o biopsia excisional saque todo. • Resección (se saca órgano entero) puede ser transplante • Frotis (se saca liquido, hisopo) mucho mas fácil de procesar • Autopsia (cuando alguien se muere en condiciones raras) La fijación • Proceso de fijación estructural, cuyo objetivo es mantener la muestra en su estado mas natural posible. • (El FORMOL: medio de fijación que se usa para fijar muestras, si no las células se mueren) Evita la muerte celular [autolisis]. 10 partes de formol, 1 de tejido Inclusion • Se deshidrata con diferentes alcoholes para sacar el agua. (Una serie de baños en alcoholes) • Se decolora/aclara (el tejido se vuelve transparente) con xileno. [2 baños de una hora cada uno] • Se incluye en parafina (sust que a temp ambiente es solida) para hacer la muestra solida y poder cortarla finita Corte o sección • El corte se hace con la ayuda de un micrótomo (maquina que tiene una cuchilla) • El grosor del corte tiene que ser de 5 a 10 µm (micrones) • Cuando ya esta el corte, se pone la lamina en un baño de flotación de 35 a 45 grados Coloración • Es necesario teñirlos para facilitar la distinción de las estructuras. • Colorantes habituales de histología: - Hematoxilina: una base que tiñe de violeta los componentes ácidos de las células. [ADN Y ARN que se encuentran en Núcleos y ribosomas]. Basofilos = violeta - Eosina: Acido que tiñe a los componentes básicos de la célula de un color rosado. [Componentes del citoplasma tienen mucho básico se tiñe de rosa]. Eosinofilos = rosa La hematoxilina y eosina no permite ver componentes estructurales como: - Elastina - Fibras reticulares - Membranas basales - Lípidos Se debe utilizar otros métodos de tinción: ej orceina, y fuscina-resorcina. Tincion de lípidos: no se tiñen por el método habitual; para su conservación se realiza un corte por congelación y luego se tiñe con colorantes de sudan. Con la técnica histológica habitual SE PIERDEN. Metacromasia Colorantes básicos que reaccionan con componentes tisulares que cambian su color —> azul —> Rojo/violeta Cambio de absorbencia; metacromasia, con un mecanismo subyacente necesario que es la presencia de polianiones en el tejido. Los tejidos se tiñen con una solución colorante básica como el azul de toluidina: las moléculas se polimerizan y el azul cambia a violeta o rojo. PAS: Capacidad de la fuscina básica decolorada o reactivo de schiff. Para reaccionar con grupos aldehídos que causa un color rojo distintivo y es la base de reacciones PAS. Reacción PAS —> tiñe hidratos de carbono y macromoléculas; muestra el glucógeno y moco en diversas células y epitelios del tejido conectivo. Pas —> Se ve color magenta marca hidratos de carbono y microvellosidades; Celula caliciforme —> posee forma de caliz —> caliz- i - forme —> lleno de hidratos de carbono —> sin pas se ve palidamente eosinófilo o basofilo PAS - glucógeno Tricromicos La técnica de tinción tricrómica se usa para diferenciar tejidos musculares, conectivos y elásticos, y para detectar colágeno. Fibras del tejido conectivo: Azul. Colágeno: Verde. Células musculares: Rojo. Tricrómico de Mallory (azul de anilina + naranja G + fuscina ácida; todos ácidos; se desconoce el fundamento) Histoquimica enzimática: Técnicas histoquimicas que se utilizan para identificar y localizar enzimas en células y tejidos. Inmunohistoquímica —> Método ideal para identificar y localizar una proteína específica dentro de las células o de la matriz extracelular. La mas usual —> fijación aldehídica. Es la localización de enzimas en cortes histológicas; que es complicada por la preservación de las enzimas en la fijación. Se suele utilizar —> reactivo de captura —> colorante o metal pesado; que atrape o fije el producto de la reacción de la enzima mediante la precipitación en el sitio de acción. Montaje • Los cortes obtenidos se montan en porta objetos de vidrio • Se pone bálsamo de Canadá para pegar los 2 vidrios y así proteger el producto Microscopio Son usados para: diagnostico o tratamiento. Es posible encontrarlos en muchos lugares del hospital. Aumentan el poder de resolución de lo que se busca ver. Algo que no puede verse a simple vista. TIPOS DE MICROSCOPIOS: - Electrónico - Óptico Poder de resolución: capacidad de un instrumento de poder distinguir dos objetos que están muy cerca como dos imágenes separadas. Resolución: depende del sistema óptico, de la longitud de la onda de luz, del espesor de la muestra, calidad de la fijación e intensidad de la tincion. Resolver: capacidad de separar. Separar discernir dos objetos cercanos entre si. Limites de resolución Del ojo humano —> 0,2 mm - Puedo verlos separados. Del microscopio optico —> 0,2 µm Del microscopio electrónico —> 0,2 nm Limite distancia entre dos objetos para que puedan ser visualizados como separados Poder de resolución poder del microscopio de resolver dos objetos cercanos como puntos separados Dificultades: - Objetivo/objeto de la investigación a cerebro o hígado, como accedo a ese objeto - Tamaño de la muestra; como hago para poner un cerebro en dos vidrios. - Transparencia: La luz tiene que atravesar el preparado histológico para que se pueda ver con el microscopio. Tiene que ser muy finito. [3,5,10 µm] TEJIDO EPITELIAL • La region apical es la que da a la superficie libre • La región lateral esta en contacto con las otras células, en esta región hay uniones intercelulares • La region basal esta pegada a la membrana basal • Membrana basal “alfombra” sobre la cual se organizan las células del tejido epitelial. Abajo de esta, está el tejido conectivo. La compone la lamina basal; lamina rara, lamina densa y lamina reticular Función del epitelio: - Recubrir las superficies externas del cuerpo [órgano externo como la piel, cornea] - Revestir las cavidades internas cerradas y los conductos corporales que comunican con el exterior (tubo digestivo, vías respiratoria y vías genitourinarias) - Puede formar glándulas [la porción secretora (parénquima)] - Desarrollan receptores sensoriales [Vista, olfato, gusto y oido] El epitelio es un tejido avascular (se nutren por difusión simple desde el tejido conectivo que si esta vascularizado). Suelen estar adheridas mediante uniones intercelulares especializadas; creando una barrera entre el tejido conectivo y la superficie libre. Hay dos tipo: De revestimiento (reviste luces) y el glandular (secreta sustancias). Tiene polaridad de membrana. Poca matriz extracelular. Todos los epitelios se apoyan en una estructura llamada membrana basal. Clasificación Forma de las células No. de capas/estrato celular Epitelios estratificadospueden ser queratinizados en el exterior del cuerpo o no queratinizados en la luz de los órganos. Urotelio/epitelio de transición: Epitelio que reviste las vías urinarias inferiores; es estratificado con características que le permiten distenderse, células paraguas. Se ubica en las vías urinarias; SOLO EN VIAS URINARIAS. Es estratificado. En principio se parece al plano estratificado; pero acá son MUY GRANDES las de arriba, tienen forma abombada; células en paraguas o raqueta. Tiene funciones de distensión, impermeabilidad y distensión Epitelio pseudoestratificado: parece estratificado pero no todas las células alcanzan la superficie libre; todas se apoyan sobre la membrana basal; en teoría es un epitelio simple. Es cilíndrico simple. Todas se apoyan en la MB pero no todas llegan a la luz. Las células laminares deben tener una especificidad de la membrana apical. Ej —> ciliado con células caliciformes. Planas Cúbicas Cilíndricas Simple Estratificado Funciones del epitelio - Secreción (moco) - Absorción (nutrientes) - Transporte (nutrientes) - Protección mecánica (bacterias) - Funcionalistas receptora En ciertos lugares los epitelios tiene nombres específicos: • Endotelio: recubre los vasos sanguíneos y linfáticos. Tiene células planas simples muy especializadas que regulan y supervisan el transporte celular, tono del músculo, respuestas inmunitarias, síntesis y secreción de hormonas y metabolitos activos. Adentro NO HAY NADA; si hay es otra cosa. Epitelio plano simple de los vasos sanguíneos. • Endocardio: reviste los ventrículos y aurículas cardiacas • Mesotelio: Reviste las paredes y el contenido de las cavidades cerradas del cuerpo. Cavidades cerosas que son virtuales hasta que no lo abra nadie. Tienen liquido adentro. Cavidades cerosas —> revestidas por mesotelio plano simple. Endotelio endocardio y mesotelio son planos simples; células con forma poligonal y orientadas paralelas al eje del vaso. Identificación: Si tiene la región apical mas claro será un epitelio simple cilíndrico musiparo. Si se ven dos círculos q no parece el núcleo; es tejido conectivo q va subiendo por el tejido epitelial. Especializaciones en la región apical. Diferenciaciones de membrana: • Microvellosidades —> Evaginaciones con núcleo de filamentos de actina. • Estereocilios/estereovellosidades —> Microvellosidades largas. • Cilios —> Evaginaciones con haces de microtubulos. Ej: intestino Microvellosidades - Evaginaciones de aspecto variado - Función: Aumentar la ABSORCION. - Centro formado por filamentos de actina, estos filamentos están conectados mediante enlaces de proteína. - Velo terminal: Es una estructura de anclaje que sostiene y estabiliza las microvellosidades para que no se caigan o se desarmen. - Cumplen la función de absorber gracias a que aumentan su área de contacto con los nutrientes o sustancias que tiene que absorber. (Son como dedos que se abren). - Células intestinales: 1500 microvellosidades agrupadas se llaman: chapa estriada. En las células de los tubulos renales se conoce como —> borde/ribete en cepillo - Vilina: es una proteína formadora de fascículos de actina que se ubica en la punta de la microvellosidad. Estereocilios/estereovellosidades - Centro formado por filamentos de actina. - No tienen vilina. - Son muy largos (se rompen muy fácil) - Tienen la capacidad de deshacerse y volverse a construir - Distribución limitada. [Ap. Reproductor masculino y oido interno] - Tienen movimiento pasivo (se mueve con el flujo de los líquidos) - Puentes cruzados: le dan mas soporte y rigidez. Cilios - Presentes en casi todas las células del organismo. - Formados por microtubulos. - Axonema: Se extiende desde el cuerpo basal. - Cuerpo basal: Es un centriolo (9x3) - Hay 3 tipos: Móviles, primarios y nodales. Cilios móviles: Se encargan del movimiento de sustancias y partículas. Lo podemos encontrar en la traquea, bronquios, trompas uterinas, etc. Están formados por 9x2 + 2 microtubulos. Hay proteínas motoras que los ayudan a generar el movimiento. El movimiento que hace es hacia adelante (golpe efectivo) y hacia atrás (golpe de recuperación). Cilios primarios: Cilios que actúan como receptores (reciben señales). Sin movimiento (mov pasivo), un solo cilio por célula. Ej: quimioreceptores. Esta formado por 9x2 microtubulos. - Cilios nodales: Tienen un movimiento rotatorio. Están implicados en el desarrollo embrionario, se concentran en la región que rodea el nódulo primitivo. Esta formado por 9x2 microtubulos Cuando las células se agrupan muy estrechas se llama tejido epiteloide. Especializaciones de la región lateral Uniones intercelulares Puntos de contacto entre las membranas celulares que permiten la adhesión y la comunicación entre las células. Célula-Célula Hay 3 tipos de uniones -Ocluyentes [barrera] -Adherentes [adhesion] -Comunicantes [comunican] Uniones Ocluyentes - Sellan el espacio intercelular (barrera de difusión entre dos cél epiteliales) - Separan fisico-quimicamente los compartimientos tisulares. - Son la union mas apical del epitelio (la primera desde la superficie). - Rodean a la cél como un cinturón (zónula). Las proteínas que tiene son: Claudinas, ocludinas y JAM. Todas unidas a proteinas de andamiaje (ZO-1, ZO-2, ZO-3), que se conectan al citoesqueleto de actina. Funciones: • Sellan el espacio intercelular, impidiendo el paso paracelular. • Mantienen la polaridad celular, impidiendo que proteínas de membrana y lípidos migren entre membrana apical y basolateral. • Participan en señalización celular. Uniones Adherentes (zonal adherens y desmosomas) A) Zonula adherens: Union de adhesion que une el citoesqueleto de actina entre células vecinas. Sus proteínas principales son: Cadherinas-E. Vinculadas a filamentos de actina a través de cateninas. Su función es: - Mantener cohesión entre células. - Estabilizar y dar forma al epitelio - Reconocimiento cél-cél. B) Desmosomas: union mecánica fuerte con forma de remache. Anclan filamentos intermedios. Sus proteínas principales son: cadherina y desmogleina. Placas de anclaje: desmoplaquina, placoglobina. Su función es: - Dar resistencia mecánica al tejido (epidermis, epitelio esofágico, etc.). - Son mas fuertes que la zonal adherens. Uniones Comunicantes - Canales intercelulares que permiten paso directo de moléculas pequeñas entre citoplasmas. - Están presentes en casi todas las células, no solo epiteliales. Sus proteínas son: conexinas —> forman un conexón. Sus funciones son: - comunicación eléctrica y metabolica. - Paso de iones, nucleotidos, aminoácidos. - Coordinación de la actividad celular (ej: ms cardiaco, ms liso, epitelios). - No se unen al citoesqueleto, solo se comunican. Especializaciones en la región basal Membrana basal - Adhesión del epitelio con el tejido conectivo. - Compartimentalizacion. - Filtración. - Armazón tisular. - Regulación y señalización. - También se encuentra en tejidos no epiteliales, pero se llama lamina externa. Compuesta por 50 proteínas que se clasifican en 4 grupos; colágenos tipo 4, lamininas, glucoproteínas y proteoglucanos. La lamina externa sintetiza y secreta estas proteínas. Entre la Lamina basal y la célula hay un ESPACIO CLARO —> lamina lucida. Union célula-membrana basal 2 estructuras que pertenecen a las uniones adherentes, pero estas están en la parte basal. Hemidesmosomas al igual que los desmosomas, conectan filamentos intermedios. Adhesiones focales el equivalente a la zónula adherente, también conecta filamentos de actina. Ambos tienen las integrinas, están unidos por esas. Union membrana basal-tejido conectivo: - Fibrillas de anclaje: Están dadas por colágeno tipo 7. Salen de la membrana basal y atrapan las fibras de colágeno del tejido conectivo. - Microfibrillas defibrilina: Ayudan a fijar las fibras elásticas a la membrana basal. GLANDULAS - Elabora y secreta sustancias en el cuerpo, como moco, jugos digestivos y otros líquidos. - Conjunto de células epiteliales capaces de sintetizar y secretar un compuesto. Es una forma especializada de tejido conectivo. Hay 2 tipos de glándulas - Glándulas exocrinas - Glándulas endocrinas Exocrinas: Tienen salida. Secretan sus productos en una superficie directa o por conductos. Se componen por una porción secretora (encargada de secretar sustancias) y una porción conductora (conduce la sustancia al destino). Secretan sustancias. Endocrinas: No tienen salida. Secretan los productos en el tejido conectivo y entran al torrente sanguíneo para alcanzar células dianas. Secretan hormonas. En las glándulas exocrinas hay diferentes maneras de secretar. • Secreción merocrina: La moléculas que va a secretar están limitadas por membrana dentro de la célula y cuando van a salir esa membrana se fusiona con la membrana plasmática y termina liberando solo la partícula. • Secreción apocrina: La molécula se libera con parte de la célula, con citoplasma y membrana plasmática. Ej: glándula mamaria lactante. • Secreción holocrina: El producto de secreción se acumula adentro de la célula, que a su vez experimenta muerte celular programada (apoptosis). Todo se elimina a la luz de la glándula. Ej: glándula sebácea. Se clasifican por el número de células: Unicelulares o Multicelulares Unicelulares • Son mas simples. • La unidad secretora son células individuales distribuidas. • Ej: célula caliciforme; secretora de moco. • Células caliciformes: se ve lo basal pero hacia apical se ve transparente. • Tiene hdc, se ve con PAS Multicelulares • Mas de una célula con diversos grados de complejidad. • Se subclasifican dependiendo de la disposición de la secretoras y presencia o ausencia de ramificación de conductos secretores. Las exocrinas multicelulares se dividen según la forma del adenómero. • Tubular (tubo) • Alveolar (redondead) • Acinar (redondeada con tubo) • Tubuloalveolar • Tubuloacinar ACINOS Mucosa: tiene una luz mas grande, es una glucoproteina y se ve pálido y los núcleos achatados en los extremos. Serosa: Luz mas chica, color basofilo y los núcleos mas esféricos y centrados. Ramificación del conducto Pueden ser: Simples/no ramificado —> El conducto y el adenómero son solo uno. Compuestas/ramificado —> El conducto se ramifica En las glándulas endocrinas las hormonas se difunden a través del tejido de al rededor y terminan llegando a los vasos sanguíneos, distribuyendose por todo el organismo. • Señalización paracrina: secretan sustancias que afectan células cercanas. • Señalización autocrina: las moléculas de señalización realizan vías de retroalimentación para modular su propia secreción. Conductos: - Conductos intercalados: están revestidos de epitelio cúbico simple que sirven para conducir la secreción. - Conductos estriados: revestidos por epitelio cúbico simple que se convierte en cilíndrico mientras se aproxima al conducto excretor. Los pliegues de la membrana plasmática se ven como estrías. Encerradas en ellas hay mitocondrias gigantes. - Conductos excretores: principales conductos de las glándulas más grandes y desembocan en la cavidad bucal. Tienen epitelio cúbico simple, cambia gradualmente a cilíndrico pseudoestratificado, mientras va aumentando el diámetro del conducto se observa un epitelio cilíndrico estratificado, llegando a la cavidad bucal puede haber un epitelio plano estratificado. Las células que integran los epitelios poseen tres características principales: - Están dispuestas muy cerca unas de otras y se adhieren entre sí mediante moléculas que forman uniones intercelulares especializadas - Tienen polaridad funcional y morfológica, se relacionan con tres regiones: una región apical, una región lateral y una región basal. Las propiedades de cada región dependen de lípidos específicos y proteínas integrales. - Su superficie basal se apoya en una membrana basal, una capa no celular, rica en proteínas y polisacáridos, detectable con microscopio óptico. A- Epitelio plano simple B- Epitelio cilindrico simple C- Epitelio cubico simle D- Epitelio plano estratificado la metaplasia intestinal es una lesión precursora del cáncer gástrico. condición médica en la que el revestimiento del estómago, normalmente compuesto por células gástricas, se transforma en un tejido similar al del intestino. TEJIDO CONECTIVO Tejido que tiene células y un componente no celular. Desempeña un papel clave en el metabolismo, la defensa inmunológica y la reparación tisular. (Respiración tisular: intercambio de gases que se produce entre la sangre y las células del cuerpo) Sus funciones dependerán de su composición pero en sus generalidades: • Relleno • Sostén • Resistencia • Difusión La matriz extracelular esta compuesta por dos cosas - Sustancia fundamental: Sustancia que rellena el espacio que no son células ni fibras. - Fibras: hebras o filamentos que atraviesan todo el tejido, formando como mayas. Le dan estructura y resistencia. Componentes del Tejido Conectivo Células y matriz extracelular. Clasificación • Laxo: Pocas fibras, muchas células y matriz extracelular. [relacionado con T epitelial] • Denso: Muchas fibras, pocas células y matriz extracelular. - Irregular: Fibras desordenadas. - Regular: Fibras ordenadas. [Tendones, ligamentos y aponeurosis] Tejido conectivo embrionario Es diferente al que encontramos en un adulto. Mesénquima. Es el mas importante. - Esta en mayor proporción en el embrion. - Precursor de la mayoría de los tejidos conectivos de los adultos. - Tienen células “fusiformes”. (Forma de pan miñon). - Escasas fibras. Las que tiene son muy delgadas. Tejido conectivo mucoso -Sustancia fundamental es “gelatina de Wharton”. (Esta en alta cantidad) -Solo se encuentra en el cordón umbilical. -Células desordenadas. Entonces el tejido conectivo esta compuesto por células y matriz extracelular. A su vez esta matriz extracelular esta compuesta por sustancia fundamental y fibras. FIBRAS Hay 3 tipos de fibras. Producidas por el fibroblasto. Colágeno —> Se caracterizan por su función de sostén y su alta resistencia. Reticulares —> Su función es la estructura. Forma una red o maya. Elásticas —> Ejerce fuerza contraria al estiramiento y distensión. Colágeno Reticulares Elásticas Fibras de colágeno - Son las mas abundantes. - Tienen una alta resistencia. [1 fibra de 1mm puede sostener 10kg]. - Es una triple hélice. [3 cadenas polipeptidicas se enrollan]. - Es una glucoproteina. - Cuando la molécula de colágeno se polimerizan con mas moléculas de colágeno, forman fibrillas de colágeno. - La resistencia de la fibrilla es consecuencia de los enlaces covalentes entre moléculas de colágeno de hileras y contigua. - Cuando se unen muchas fibrillas de colágeno forman las fibras de colágeno. - El colágeno mas abundante en el cuerpo es el tipo I. - Hay alrededor 42 tipos de colágeno y reciben su número en base a cuando fueron descubiertos. • Colágeno tipo I se encuentra en: piel, tendones y huesos • Colágeno tipo II exclusivo del cartílago • Colágeno tipo III forma redes [Tejido conectivo reticular] forma parte del estroma de algunos órganos especiales. Hígado, medula ósea, ganglio linfático y el vaso • Colágeno tipo IV lamina densa de laminas basales Síntesis del colágeno. Las fibras del colágeno se sintetizan, una parte dentro de la célula y otra extracelular. Esto porque es muy grande. • Los fibroblastos de los tejidos conectivos sintetizan el colágeno. • En el núcleo del fibroblasto, están los genes de las cadenas alfa del colágeno. • Estos genes van a ser transcriptos para formar ARNm y luego ser traducidos. • Esta traducción decomo resultado un péptido denominado pre-pro-cadena. • La pre-pro-cadena tiene en un extremo una péptido señal, que le va a permitir dirigirse al RER. Llega al RER y la péptido señal se degrada. Dentro del RER ocurren 3 modificaciones postaduccionales. A la pro-cadena a se le agregan grupos OH, pero específicamente en los residuos de lisina y prolina. La vitamina C y el hierro son cruciales para que se lleve a cabo este procedimiento. Si no están o hay deficiencia vamos a tener problemas cuando ensamblemos el colágeno. Se van a agregar azucares como la glucosa y la galactosa a la pro-cadena a. Se agregan en los lugares hidroxilados anteriormente (en donde encuentren grupos OH se agregan estos azucares). Cuando 3 pro-cadena a se encuentran se va a formar la procolágeno. Esta procolágeno va a pasar al aparato de Golgi. En el Golgi la procolágeno se va a empaquetar en vesículas. Vesículas de cargamento. Esto va a permitir que la procolágeno vaya al espacio extracelular por medio del proceso exocitosis Una vez fuera, los extremos del procolágeno que están sobresalientes, van a ser cortados por la enzima peptidasa. Cuando ya no tiene los extremos sobresalientes se forma la tropocolágeno. Varias tropocolágeno con la ayuda de la lisil oxidasa, se van a unir mediante enlaces covalentes. Este proceso se llama Cross-linking. Este proceso permite que se formen fibrillas de colágeno. Con un tamaño aprox de 1µm. Muchas fibrillas de colágeno van a formar una fibra de colágeno. Degradación del colágeno. Las proteínas del cuerpo se degradan y resintetizan constantemente haciendo que los tejidos proliferen y se remodelen. La enzima que degrada al colágeno es: Colagenasa • En el caso de las fibras de colágeno primero tiene que haber un desgaste mecánico y químico. • Una vez que las fibras del colágeno ya están desgastadas, la degradación queda a cargo de las enzimas metaloproteinasas. • Los fragmentos del colágeno son fagocitados y degradados por lisosomas. Degradación proteolitica/proteólisis Se genera fuera de las células por medio de unas enzimas llamadas metaloproteinasas de la matriz. Degradación fagocitica Ocurre intercelular. Comprende la actividad de los macrofagos para eliminar componentes de la MEC. Fibroblastos también pueden fagocitar y degradar fibrillas de colágeno en sus lisosomas. Fibras reticulares - Forman mayas o redes - Compuestas por fibras de colágeno tipo III - Función: curación de heridas y formación de tejido cicatricial. - Localización: Adipocitos, nervios, tejido hematopoyético, linfático, cicatriz, etc. - Su función es estructural. - NO se ve con HyE - se ve con PAS —> por los sacaridos que componen el colágeno. - En microscopio óptico con técnicas de tinción especiales tienen —> aspecto filiforme. - Se ven con la técnica de plata o argento. - Esta en el hígado y en el estroma de los organos linfoides. - Luego son remplazadas por fibras del colágeno I que son mas fuertes. Fibras elásticas - Delgadas y ramificadas. - Compuestas por Elastina (proteína) - Limitan la distensibilidad. (Limitan que alguna estructura anatómica se estire de mas y se desgarre). - Localización: Arterias, ligamentos y laringe. - No se pueden distinguir de las fibras elásticas, porque son muy delgadas y no se tiñen bien con HyE. - No es una sola fibra son redes de fibras (una sola no se ve). - Se encuentran en casi todos los tejidos conectivos pero es especialmente importante su existencia en la piel. - Fibrilina 1 —> al polimerizarse forman —> microfibrillas de fibrilina. Esta microfibrillas funcionan como esqueleto en le elastogénesis. - Microfibrillas de fibrilina que generan un espacio hueco y tiene un centro de elastina y un perímetro que tiene microfibrillas de fibrilina Sustancia fundamental Permite sostén mecánico y estructural pero regulan funciones e intercambio de sustancias por este liquido. Sustancia viscosa y transparente, resbalosa y con alto contenido de agua. Se ve como una forma amorfa en los cortes histológicos. Con HyE se pierde; y se ve como un fondo vacío Esta conformada por tres moléculas importantes • Glucosaminoglucanos (GAG). - Son polisacáridos, es decir son azucares. - Forman estructuras lineales. - Se caracterizan por su carga negativa. - Esta carga negativa le permite atraer agua. - La mayoría de GAGS se unen de forma covalente a proteínas centrales para formar proteoglucanos —> forman una estructura tipo cerdas de cepillo. - Ej: Hiaulurano (acido hialuronico), condoitrin, heparán sulfato, etc. • Proteoglucanos - Tiene glucosaminoglucanos (GAG). - Están unidos a proteínas centrales. - Capacidad de retención de agua. - Facilitan la locomoción celular. - Difusión de sustancias. - Se asocian a laminas basales y funcionan como filtros moleculares que filtran y retardan selectivamente las macromoléculas - Son como el cepillo limpia pipas. - Ej: Agrecano, decorina, versicano, sindecano. • Glucoproteínas multiadhesivas - Unen las células con las fibras para que haya una comunicación de las fibras con las células y puedan comunicarse. - Hace que la unión sea mas fuerte por medio de las proteínas. - Unen células a la matriz. - Relevantes para la estabilización de la matriz extra celular y la vinculación con la superficie celular. - Poseen múltiples sitios de unión para variedad de proteínas. - Ej: fibronectina, laminina, tenascina, osteopontina, etc. Células del T conectivo Pueden ser Residentes/fijas (están siempre) - Fibroblastos y Miofibroblastos. - Macrófagos. - Mastocitos. - Adipocitos. - Células madre. Errantes/transitorias (están de paso) - Linfocitos y c. plasmáticas. - Neutrófilos. - Eosinófilos. - Basófilos. - Monocitos. FIBROBLASTOS •La fibra por excelencia del tejido conectivo. •Produce TODOS los elementos de la MEC [Sust fundamental, componentes de la sust fundamental y todas las fibras]. •Su núcleo tiene forma de disco redondeado/alargado, con un nucleolo visible. No esta muy teñido. MIOFIBROBLASTO •Posee propiedades de los fibroblastos y de las células musculares lisas. [Es un fibroblasto con la característica que se puede contraer]. •Célula alargada y fusiforme que no se suele identificar con HyE. •Posee fascículos de filamentos de actina con proteínas motoras como la miosina. MACRÓFAGO • Los monocitos cuando llegan al tejido conectivo maduran y se convierten macrófagos. • Son migrantes, pero en algunos órganos como en el pulmón y el hígado se encuentran fijos • Son fagocitos. (Fibras, bacterias, residuos, etc.) como actividad de defensa u operación de limpieza. • Alta cantidad de lisosomas. • Presentan antígenos. • Tiene un núcleo arriñonado. • Se tiñen eosinofilos. • Se pueden dividir en dos tipos - Clásicos (M1). Se encargan de la inflamación, de destruir, de fagocitar y también incitar la apoptosis. - Alternativa (M2). Disminuyen la inflamación, antiinflamatorio, favorece la proliferación y la reparación de tejidos. MASTOCITOS • Gránulos basofilos. Ovoides y de gran tamaño, núcleo esferoidal y citoplasma lleno de gránulos muy basófilos de gran tamaño. • Tienen una particularidad de tinción —> metacromasia (ocurre por los componentes de los gránulos) • Es anfofilo por que se puede teñir acidófilo o basofilo • Estos gránulos contienen: histamina (provoca la vasodilatación) o heparina (anticoagulante). • Provienen de la medula ósea (interior de los huesos). • Después de migrar terminan en el tejido conectivo y son células residentes ahí. • Cuentan con receptores FC de anticuerpos. • Secretan mediadores de la inflamación. Estos mediadores pueden ser preformados o neosintetizados. - Las preformados ya tienen sus gránulos con sustancias adentro de ellos. - Las neosintetizadas son las que a partir de que se activan se empiezan a sintetizar.Si hay una desgranulacion masiva de los mastocitos se pone roja la piel Metracromasia: fenómeno en histología donde ciertos colorantes, al interactuar con componentes específicos de los tejidos, cambian su color original (ortocromasia) a uno diferente. ADIPOCITOS • Almacenan lípidos neutros y producen variadas hormonas. • Acumulan lípidos de forma gradual en su citoplasma. • Si se acumulan grandes grupos se conoce como tejido adiposo. • Forma: anillo de sello, la gota del lípido corre el núcleo hacia lateral y queda aplastado. • Blanco unilocular puede ser blanco o amarillo y es una única gota lipídica. • Su función no es guardar energía sino que genera calor o energía calórica —> termogenina. CELULAS MADRES ADULTAS • En los adultos muchos tejidos contienen depósitos de células madres —> células madres adultas • Se ubican en nichos y las células que residen dentro de los nichos son —> células madre tisulares —> células progenitoras adultas multipotentes. —> células dele stroma de la medula ósea. —> células madre mesenquimatosas – formas estrellada. PERICITOS/células adventicias o células perivasculares • Se localizan al rededor de vasos sanguíneos. • Posee un núcleo como las células endoteliales, aplanado pero curvo para adaptarse a la forma tubular del vaso. LINFOCITOS • Participan en respuestas inmunitarias, son las células libres mas pequeñas. • Forma: Poseen un delgado reborde de citoplasma que rodea un núcleo heterocromáticos de tinción intensa. • Su citoplasma no suele ser visible. • Aumenta su cantidad en sitios de inflamación. • Los linfocitos forman una población heterogénea que comprende 3 tipos celulares • funcionales. - Linfocitos T - inmunidad mediada por células. - Linfocitos B - inmunidad mediada por atc. - Linfocitos NK - citolíticos naturales – Natural killer. • Proteínas de cumulo de diferenciación – CD. • Algunas proteínas cd están solo en algunos tipos de linfocitos, se consideran marcadores específicos. CEL. PLASMATICAS • Son un gran componente destacado del tejido conjuntivo laxo, por el cual los antígenos se introducen en el organismo. • Son un componente normal de las glándulas salivares, ganglios linfáticos y tejido hematopoyético. • Deriva de su linfocito B precursor y tiene una capacidad migratoria limitada y una vida entre 10 a 30 días. • Producen un solo tipo de proteína, un anticuerpo especifico. PLASMOCITOS •Versión activa del linfocito b productora de anticuerpos. •Glucoproteínas que reparte por el tejido. •Tiene un aparato de Golgi muy desarrollado al lado del núcleo pálido y el citoplasma se tiñe por que tiene un RER con ribosomas que se tiñe con hematoxilina. •Forma: ovoide con núcleo excéntrico con sectores densos y laxos en forma de rueda de carro. MONOCITOS • Glóbulos blancos que derivan de la medula ósea, forman parte de la respuesta inmunitaria innata y regula la homeostasis celular. • Forma: núcleos bilobulados con cromatina madura en forma de riñón, citoplasma moderado a abundantes convierte en macrófago EOSINOFILOS • Son leucocitos que se encuentran en la sangre. • Tienen funciones de defensa contra parasitos, respuestas alérgicas, inflamación de tejidos e inmunidad. • Nucleo bilobulado o en anteojo con citoplasma con gránulos eosinófilos. • Es antiparasitario. • Los gránulos se tiñen eosinófilos por los gránulos de eosina. • El núcleo esta en la periferia. BASOFILOS • Granulocitos que circulan en el torrente sanguíneo. • Es precursora del mastocito en la medla ósea. • Tienen gránulos de secreción basofilos. • Neutrófilo —> es antibacteriano. • Nucelo esférico sin citoplasma —> linfocito. • Son polimorfonucleados. NEUTROFILO •Es antibacteriano. •Nucleo esférico sin citoplasma —> linfocito. •Son polimorfonucleados. Células Función Forma Fibroblasto Síntesis de fibras de colágeno elásticos y reticulares y los hdc de las sustancias fundamentales. Alargada fusiforme Bordes estrellados. Nucleo abusado Escaso citoplasma Mastocitos Ponen en marcha funciones antiinflamatorias. Ovoide, nucelo esferoide. Citoplasma con gránulos. Macrofagos Fagocitar como función defensiva y reacciones de respuesta inmunitaria o de limpieza. Nucleo arriñonado, citoplasma con gránulos. Adipocito Almacenamiento de lípidos y producen hormonas. Anillo de sello. Nucleo desplazado y achatado. Linfocitos Respuesta inmune/ producción de ATC (anticuerpos). Muy pequeño núcleo esférico, poco citoplasma. Plasmocito Generan anticuerpos/inmunoglobulina. Son proteinas. Núcleo excéntrico, cromatina rueda de carro. Ovoide grande, falta de tincion en el Golgi. Basofilo Receptores de ATC y otros mediadores de inflamación. Nucleo bilobulados arriñonados. Eosinofilo Defensa contra parasitos, alergia e inflamaciones. Nucleo en anteojo eosinofilo. Pericito Función contráctil. Nucleo tubular aplanado. Células madres Neutrofilos Fagocitan bacterias y deshechos. Nucleo trilocular. HISTOLOGIA TECNICA HISTOLOGICA TEJIDO EPITELIAL Especializaciones en la región apical. Especializaciones de la región lateral Especializaciones en la región basal GLANDULAS Conductos: Fibras de colágeno Síntesis del colágeno. Degradación del colágeno. Fibras reticulares Fibras elásticas Sustancia fundamental Células del T conectivo