Você foi contratado por uma indústria farmacêutica para desenvolver uma vacina contra o HPV 16.

HPV_L1_F – ATGTCTCTTTGGCTGCCTAGTGAGGCC (Tm – 63.52)

HPV_L1_R – TACGTTTTTTGCGTTTAGCAGTTGTAGAGGTAGA (Tm – 63.15)

Para poder fazer a clonagem, adiciono sítios de restrição NdeI e HindIII:

HPV_L1_F – CATATGTCTCTTTGGCTGCCTAGTGAGGCC (Tm – 63.52)

HPV_L1_R – AAGCTTACGTTTTTTGCGTTTAGCAGTTGTAGAGGTAGA (Tm – 63.15)

Pode ser utilizado o sistema de expressão em Escherichia coli, pois é o mais simples e barato. Além disso, essa proteína será utilizada para a imunização de animais (testes pré-clínicos), então a preocupação em relação às modificações pós-transcricionais são menores.

Ainda, por esse método ser o mais rápido, o troubleshooting também acaba sendo mais eficaz, pois podemos corrigir erros em menor tempo e buscar alternativas de expressão, por ser o mais comumente utilizado.