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[Laboratório Virtual - Hibridização] Segundo o roteiro de hibridização, o sucesso dessa prática depende da capacidade do DNA de se anelar às sequên...

[Laboratório Virtual - Hibridização] Segundo o roteiro de hibridização, o sucesso dessa prática depende da capacidade do DNA de se anelar às sequências complementares após a desnaturação (período em que a fita de DNA é simples). Dessa forma, o ponto de fusão do DNA, ou seja, o momento em que ocorre a ruptura das pontes de hidrogênio e a abertura da dupla fita de DNA, varia de um organismo para outro. O ponto de fusão do DNA também depende da quantidade de pares de base G-C e A-T, sendo que, quanto mais pares G-C, maior o ponto de fusão do genoma. Isso ocorre porque o par G-C é mais estável, apresentando três pontes de hidrogênio, enquanto o par A-T conta apenas com duas. Após o anelamento da sonda com sua sequência-alvo complementar, o padrão de hibridização é visto em microscópio de fluorescência. Além do ponto de fusão, outros fatores podem interferir na hibridização da sonda de DNA. Sobre esses fatores, analise as opções a seguir: I- Temperatura de fusão. II- pH alto para produzir condições de hibridização. III- Concentração de cátions monovalentes. IV- Presença de solventes orgânicos.Assinale a alternativa CORRETA: A) Somente a opção III está correta. B) As opções I, II, III e IV estão corretas. C) Somente a opção II está correta. D) Somente a opção I está correta.

💡 1 Resposta

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A alternativa correta é a letra B) As opções I, II, III e IV estão corretas. Explicação: I - Temperatura de fusão: A temperatura de fusão é um fator importante para a hibridização, pois é necessário que a temperatura seja elevada o suficiente para que as pontes de hidrogênio sejam quebradas e as fitas de DNA sejam desnaturadas, permitindo que a sonda se ligue à sequência complementar. II - pH alto para produzir condições de hibridização: O pH também é um fator importante para a hibridização, pois a sonda de DNA é carregada negativamente e a sequência complementar é carregada positivamente. Um pH alto ajuda a neutralizar as cargas e a promover a hibridização. III - Concentração de cátions monovalentes: A concentração de cátions monovalentes, como o sódio, é importante para a hibridização, pois ajuda a neutralizar as cargas negativas do DNA e a promover a hibridização. IV - Presença de solventes orgânicos: A presença de solventes orgânicos, como o formamida, pode ajudar a reduzir a temperatura de fusão do DNA, permitindo que a sonda se ligue à sequência complementar em temperaturas mais baixas.
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