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Você tem uma amostra de células infectadas por vírus para analisar, com o objetivo de responder várias perguntas. Como ferramentas, você dispõe de ...

Você tem uma amostra de células infectadas por vírus para analisar, com o objetivo de responder várias perguntas. Como ferramentas, você dispõe de uma amostra de células do mesmo tipo, porém não infectadas, além de anticorpos contra os vírus produzidos em coelho. Explique como você faria para responder as seguintes perguntas, indicando os principais reagentes necessários e que equipamentos usaria para mostrar o resultado. (6 pontos) a) Os vírus se localizam no citoplasma ou dentro de algum compartimento celular envolvido por membrana? b) A célula infectada tem alguma alteração na superfície? c) As células normais formam uma monocamada aderida ao fundo da garrafinha de cultura. As células infectadas continuam formando monocamada? d) Todas as células daquela cultura estão infectadas ou só algumas apresentam o vírus? e) Quantas são e qual o peso molecular das proteínas virais reconhecidas pelo anticorpo?

O texto apresenta uma situação hipotética em que o objetivo é analisar uma amostra de células infectadas por vírus.
O texto apresenta as ferramentas disponíveis para a análise, que incluem uma amostra de células do mesmo tipo, porém não infectadas, além de anticorpos contra os vírus produzidos em coelho.
O texto apresenta cinco perguntas a serem respondidas, cada uma com uma explicação detalhada de como seria possível respondê-las.
As respostas para as perguntas envolvem técnicas como microscopia eletrônica de transmissão, imunofluorescência, fracionamento celular, microscopia óptica, citometria de fluxo, eletroforese e western blot.
O texto não apresenta informações sobre os resultados obtidos com as técnicas descritas, apenas explica como seria possível respondê-las.

Essa pergunta também está no material:

GABARITO-AD1-BIOCEL I-2004-2
2 pág.

Biologia Celular Universidade Federal FluminenseUniversidade Federal Fluminense

Respostas

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Para responder às perguntas propostas, utilizando as ferramentas disponíveis, você pode seguir os seguintes passos: a) Para determinar se os vírus se localizam no citoplasma ou dentro de algum compartimento celular envolvido por membrana, você pode realizar uma análise de microscopia eletrônica de transmissão. Nessa técnica, você prepara as células infectadas e as células não infectadas para visualização em um microscópio eletrônico de transmissão. Através dessa análise, é possível observar a localização dos vírus nas células. b) Para verificar se a célula infectada apresenta alguma alteração na superfície, você pode utilizar a técnica de imunofluorescência. Nessa técnica, você marca as células infectadas e as células não infectadas com anticorpos específicos para a superfície celular. Em seguida, você utiliza um microscópio de fluorescência para observar se há diferenças na marcação entre as células infectadas e não infectadas. c) Para determinar se as células infectadas continuam formando uma monocamada, você pode realizar uma análise de microscopia óptica. Nessa técnica, você observa as células infectadas e não infectadas em uma placa de cultura para verificar se há diferenças na formação da monocamada. d) Para identificar se todas as células da cultura estão infectadas ou apenas algumas apresentam o vírus, você pode utilizar a técnica de citometria de fluxo. Nessa técnica, você marca as células infectadas e não infectadas com um marcador fluorescente específico para o vírus. Em seguida, você utiliza um citômetro de fluxo para analisar e quantificar a presença do marcador nas células. e) Para determinar o número e o peso molecular das proteínas virais reconhecidas pelo anticorpo, você pode utilizar técnicas como eletroforese e western blot. Nessa técnica, você separa as proteínas presentes nas células infectadas utilizando a eletroforese em gel. Em seguida, você transfere as proteínas para uma membrana e as marca com o anticorpo específico para as proteínas virais. Por fim, você utiliza um substrato quimioluminescente para revelar as proteínas marcadas e determinar o seu peso molecular. Lembre-se de que essas são apenas sugestões de técnicas que podem ser utilizadas para responder às perguntas propostas. A escolha das técnicas específicas e dos reagentes necessários pode variar de acordo com a disponibilidade e os objetivos do estudo.

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