[Laboratório Virtual – Coloração de Gram] Um paciente é internado com febre e calafrios e uma amostra de sangue é coletada para análise laboratoria...

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A técnica de Coloração de Gram é uma das mais utilizadas em microbiologia para identificação de bactérias e outras células microbianas. Vejamos mais sobre essa técnica, bem como as suas etapas, a seguir.

Técnica da Coloração de Gram

Vejamos, abaixo, quais são os passos para a preparação da lâmina do esfregaço:

1. com uma alça bacteriológica, pegar a amostra e depositá-la em uma lâmina de vidro limpa e seca
2. espalhar a amostra por toda a lâmina com a alça bacteriológica, formando uma camada uniforme
3. deixar a amostra secar ao ar por alguns minutos

Para a realização da técnica de Coloração de Gram, são necessários os seguintes reagentes:

1. Cristal violeta (corante primário)
2. Lugol ou solução de iodeto de potássio (fixador)
3. Álcool etílico (descolorante)
4. Fucsina ou safranina (corante de contra-coloração)

As etapas da técnica de Coloração de Gram são:

1. Cobrir a lâmina com cristal violeta e deixá-lo agir por cerca de 1 minuto
2. Lavar a lâmina com água destilada
3. Cobrir a lâmina com lugol ou solução de iodeto de potássio e deixá-lo agir por cerca de 1 minuto
4. Lavar a lâmina com água destilada
5. Adicionar álcool etílico à lâmina e deixar agir por alguns segundos (tempo varia de acordo com a espécie bacteriana)
6. Lavar a lâmina com água destilada
7. Cobrir a lâmina com fucsina ou safranina e deixá-lo agir por cerca de 1 minuto
8. Lavar a lâmina com água destilada e secar

Ao final, as bactérias Gram-positivas aparecem roxas ou azuis, enquanto as Gram-negativas aparecem vermelhas ou rosas