Analisando os passos da técnica indireta do ELISA, temos: I- Adição do substrato: Correto. Nesse passo, é adicionado um substrato que reage com a enzima presente no conjugado, gerando um produto detectável. II- Adição de conjugado, incubação e lavagem: Correto. Nesse passo, é adicionado um conjugado que contém um anticorpo ligado a uma enzima. Após a incubação, é realizada uma lavagem para remover o excesso de conjugado não ligado. III- Sensibilização e lavagem da placa: Incorreto. A sensibilização da placa ocorre antes da adição da amostra, e não faz parte da técnica indireta do ELISA. IV- Adição da amostra, incubação e lavagem: Correto. Nesse passo, a amostra contendo o antígeno é adicionada à placa sensibilizada, ocorre a incubação para permitir a ligação antígeno-anticorpo e, em seguida, é realizada uma lavagem para remover o excesso de antígeno não ligado. V- Bloqueio e lavagem da placa: Correto. Após a adição da amostra e a lavagem, é realizado o bloqueio para evitar a ligação não específica de anticorpos na placa e, em seguida, é feita uma nova lavagem. Portanto, as sentenças corretas são: I, II, IV e V.
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