19. Sobre a extração de DNA de sangue periférico, responda: a. Por que se deve realizar a lise de hemácias? b. Qual é a constituição do tampão de l...

a. A lise de hemácias é realizada na extração de DNA de sangue periférico para liberar o conteúdo celular, incluindo os núcleos das células brancas do sangue, onde o DNA está presente. As hemácias não possuem núcleo, portanto, é necessário rompê-las para obter acesso ao DNA. b. O tampão de lise de hemácias é composto por uma solução salina tamponada, geralmente contendo cloreto de amônio, bicarbonato de sódio e EDTA (etilenodiaminotetracetato). O cloreto de amônio ajuda a romper as hemácias, o bicarbonato de sódio mantém o pH adequado para a ação das enzimas e o EDTA atua como um agente quelante, inibindo a atividade de nucleases que podem degradar o DNA. c. As etapas da extração de DNA de sangue periférico geralmente incluem: 1. Lise de hemácias: como mencionado anteriormente, as hemácias são rompidas para liberar o conteúdo celular. 2. Precipitação de proteínas: é adicionado um reagente que precipita as proteínas presentes na amostra, separando-as do DNA. 3. Extração de DNA: o DNA é separado das outras moléculas presentes na amostra, geralmente por meio de centrifugação ou filtração. 4. Lavagem: o DNA é lavado para remover resíduos de proteínas e outros contaminantes. 5. Eluição: o DNA é eluído em uma solução adequada para armazenamento ou análise posterior. Essas são as etapas básicas, mas podem variar dependendo do protocolo utilizado.