5) A extração de DNA pode ser realizada por meio de diferentes métodos, com kits comerciais ou protocolos in house. Diferentes fatores influenciam ...

5) A extração de DNA pode ser realizada por meio de diferentes métodos, com kits comerciais ou protocolos in house. Diferentes fatores influenciam a qualidade da extração do DNA, como a qualidade da amostra biológica, a coleta e o armazenamento da amostra, o protocolo de extração e os reagentes utilizados, entre outros. A espectrofotometria permite avaliar se o procedimento de extração apresentou resultado satisfatório e se a amostra tem qualidade para ser utilizada em outras análises. Após realizar a extração de DNA utilizando protocolo com fenol e guanidina, um laboratorista quantificou sua amostra em um espectrofotômetro, a partir da medida da absorbância nos comprimentos de onda de 230nm, 260nm e 280nm. A respeito dessa técnica, marque a alternativa correta: a) se o DNA extraído apresentar concentração abaixo de 20ng/uL, razão A260/280 = 1,8 e A260/230 = 2,0, não deve ser utilizado em análises subsequentes de biologia molecular; b) a espectrofotometria é o método mais utilizado para quantificação de amostras de DNA. Além de permitir a medição da concentração de DNA, permite verificar a pureza da amostra a partir do cálculo das razões A260/A280 e A260/A230; c) se o DNA extraído apresentar razão A260/A280 entre 1,7 e 2,0, a amostra pode ser considerada “pura”, sem a necessidade de avaliações adicionais.