coloração de gram na lamina

A coloração de Gram é uma técnica utilizada em microbiologia para diferenciar bactérias com base em suas características de parede celular. Ela é amplamente utilizada para identificar e classificar bactérias em Gram-positivas e Gram-negativas. Para realizar a coloração de Gram em uma lâmina, siga os seguintes passos: 1. Prepare uma lâmina limpa e seca, onde será feito o esfregaço bacteriano. 2. Com uma alça de platina esterilizada, coloque uma pequena quantidade da cultura bacteriana na lâmina. 3. Espalhe a cultura bacteriana uniformemente na lâmina, fazendo movimentos circulares ou em zigue-zague. 4. Deixe a lâmina secar ao ar livre. 5. Fixe a amostra na lâmina passando-a rapidamente sobre a chama de um bico de Bunsen ou de um isqueiro. Isso ajudará a fixar as bactérias na lâmina. 6. Aplique o corante cristal violeta na lâmina, cobrindo toda a área onde está a amostra bacteriana. Deixe agir por cerca de 1 minuto. 7. Lave a lâmina suavemente com água corrente para remover o excesso de corante. 8. Aplique o lugol (iodo) na lâmina, cobrindo toda a área onde está a amostra bacteriana. Deixe agir por cerca de 1 minuto. 9. Lave novamente a lâmina suavemente com água corrente. 10. Decolore a lâmina com álcool-acetona, deixando-o escorrer sobre a lâmina até que não saia mais corante. 11. Lave novamente a lâmina suavemente com água corrente. 12. Aplique o corante de contraste, como a safranina, na lâmina, cobrindo toda a área onde está a amostra bacteriana. Deixe agir por cerca de 1 minuto. 13. Lave a lâmina suavemente com água corrente e seque-a cuidadosamente. 14. Observe a lâmina ao microscópio óptico com objetivo de imersão (100x) e analise as características das bactérias presentes. Após a coloração de Gram, as bactérias Gram-positivas aparecerão na cor violeta ou azul escuro, enquanto as bactérias Gram-negativas aparecerão na cor vermelha ou rosa. Essa diferenciação é devido às diferenças na composição da parede celular das bactérias.