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O que é Nested-PCR? PCR convencional pode não conseguir amplificar determinada sequência que esteja presente em pouquíssima quantidade. A sensibil...

O que é Nested-PCR?

PCR convencional pode não conseguir amplificar determinada sequência que esteja presente em pouquíssima quantidade.
A sensibilidade da PCR reflete a capacidade de detecção do sinal do DNA-alvo, em amostras que possuem o DNA-alvo na realidade.
Em alguns casos, a sensibilidade da PCR convencional pode não ser suficiente, pois existe uma saturação da reação por volta do 35º ciclo.
Ter mais de 40 ciclos em uma PCR não oferecerá nenhum benefício, porém, pode aumentar as chances de produtos inespecíficos que atrapalharão a interpretação.

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Farmácia

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Nested-PCR é uma técnica de amplificação de DNA que consiste em duas rodadas de amplificação em vez de uma. Na primeira rodada, os iniciadores externos são usados para amplificar a sequência de interesse. Na segunda rodada, os iniciadores internos são usados para amplificar um fragmento menor dentro do produto da primeira rodada. Essa técnica é usada quando a sensibilidade da PCR convencional não é suficiente para detectar a sequência de interesse em amostras que possuem o DNA-alvo em pouquíssima quantidade. A Nested-PCR aumenta a sensibilidade da técnica e reduz a chance de produtos inespecíficos que podem atrapalhar a interpretação.

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