Como projeto de verão, um estudante de microbiologia isola independentemente duas mutações na E. coli que são auxotróficas para glicina (gly−). Ele...

Como projeto de verão, um estudante de microbiologia isola independentemente duas mutações na E. coli que são auxotróficas para glicina (gly−). Ele queria saber se essas duas mutações estão na mesma unidade funcional. Demonstre um procedimento que o estudante poderia usar para determinar se essas duas mutações gly− ocorrem na mesma unidade funcional.

Realizar um teste de complementação, cruzando as duas cepas mutantes e verificando se há restauração do fenótipo selvagem (gly+). Se houver, as mutações estão em genes diferentes; se não houver, as mutações estão no mesmo gene.
Realizar um teste de mutação reversa, expondo as cepas mutantes a um mutagênico e selecionando as colônias que recuperaram o fenótipo selvagem (gly+). Se as duas cepas mutantes recuperarem o fenótipo selvagem, as mutações estão em genes diferentes; se apenas uma das cepas recuperar o fenótipo selvagem, as mutações estão no mesmo gene.
Realizar um teste de supressão, introduzindo um plasmídeo contendo o gene selvagem (gly+) em uma das cepas mutantes e verificando se há supressão do fenótipo mutante. Se houver, as mutações estão em genes diferentes; se não houver, as mutações estão no mesmo gene.