A extração de ácidos nucleicos é o ponto de partida em qualquer estudo da biologia molecular e, portanto, é considerado como um processo crucial. A...

A extração de ácidos nucleicos é o ponto de partida em qualquer estudo da biologia molecular e, portanto, é considerado como um processo crucial. A primeira extração bruta de DNA (ácido desoxirribonucleico) foi realizada pelo médico suíço Friedrich Miescher em 1869. Desde então, os cientistas fizeram progressos extraordinários na concepção de métodos de extração que são mais confiáveis, mais fáceis e rápidos de executar, mais econômicos e que produzem um rendimento maior. Neste contexto é INCORRETO afirmar que:
Atualmente não existe um único procedimento aplicável a todos os contextos de extração de DNA devido às suas restrições em produzir rendimentos com pureza ideal. Sendo assim, melhorias dos métodos existentes e o desenvolvimento de novas técnicas serão a força motriz para direcionar futuro das tecnologias de extração de DNA.
Em geral, os métodos de extração de DNA consistem em três etapas: (1) rompimento das membranas citoplasmáticas e nucleares; (2) separação e purificação do DNA de outros componentes do lisado celular tal como lipídeos, proteínas e outros ácidos nucleicos; e (3) concentração e purificação de DNA.
Ao escolher um método adequado para extração de DNA, é crucial garantir a qualidade e a quantidade do DNA isolado para realizar as aplicações posteriores.
Alguns fatores que devem ser considerados para otimização do método de extração de DNA e incluem tempo, custo, toxicidade potencial, rendimento, disponibilidade de equipamentos laboratoriais e mão de obra especializada, bem como a quantidade de amostra necessária para o protocolo.
Os métodos clássicos de extração de DNA baseados em solventes envolvem o uso de reagentes orgânicos e inorgânicos, como no caso do método de fenol-clorofórmio. As principais limitações desse método incluem o uso de reagentes tóxicos, seu protocolo demorado e laborioso bem como a limitação de amostras que podem ser extraídas com esta técnica.