O método de sequenciamento de Sanger foi desenvolvido por Fred Sanger e seus colaboradores em 1977 e foi uma técnica pioneira responsável por uma revolução genômica na área. A respeito do princípio do sequenciamento por Sanger escolha a alternativa correta.
Escolha uma opção:
A. O método de Sanger oferece a mesma capacidade de processamento de genomas que o NGS, sendo uma metodologia em menor escala e mais cara para poucas amostras.
B. O método de Sanger é baseado na passagem de uma fita simples de DNA por um nanoporo protéico incorporado em uma membrana e sob ação de um campo elétrico. Cada nucleotídeo causa uma alteração padrão na corrente iônica, que pode ser utilizada para o sequenciamento da molécula.
C. O método de Sanger é baseado na utilização de nucleotídeos modificados com fluoróforos – dideoxinucleotídeos marcados (dDNTP) – que interrompem a síntese de fragmentos de DNA, resultando na produção de cópias com diferentes tamanhos e permitindo a identificação do último nucleotídeo adicionado em cada fragmento.
D. O método de Sanger é baseado na síntese de uma fita complementar ao DNA alvo, por meio de uma amplificação em ponte, utilizando nucleotídeos que emitem fluorescência após a incorporação por complementaridade, permitindo a identificação da sequência de interesse.
E. O método de Sanger é baseado na utilização de chips semicondutores capazes de detectar alterações no pH provocadas pela liberação de íons hidrogênio (H+) durante a polimerização do DNA, determinando a sequência da molécula.
A alternativa correta é a letra C: "O método de Sanger é baseado na utilização de nucleotídeos modificados com fluoróforos – dideoxinucleotídeos marcados (dDNTP) – que interrompem a síntese de fragmentos de DNA, resultando na produção de cópias com diferentes tamanhos e permitindo a identificação do último nucleotídeo adicionado em cada fragmento." O método de Sanger é uma técnica de sequenciamento de DNA que utiliza a síntese de cadeia de DNA em conjunto com a terminação da cadeia, permitindo a identificação da sequência de nucleotídeos.
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