Ed
ano passado
Vamos analisar cada uma das afirmações sobre as técnicas utilizadas para identificar os locais de interação entre proteínas e DNA: ( ) A MNase (nuclease microcócica), uma nuclease específica, capaz de clivar o DNA em pequenos fragmentos, é modificada com a adição de uma proteína, a proteína A (pA) no sequenciamento CUT & RUN. É verdadeira (V). A MNase é utilizada no método CUT & RUN para clivar o DNA em regiões específicas onde a proteína de interesse está ligada. ( ) A MNase modificada com a pA forma regiões de interação entre a proteína e o DNA que podem ser imunoprecipitadas, formando uma amostra rica de precipitados de regiões de interação da proteína de interesse com o DNA. É verdadeira (V). A MNase modificada permite a captura das regiões de interação, que podem ser isoladas por imunoprecipitação. ( ) No sequenciamento ChIP, a proteína de interesse é reticulada ao DNA, ou seja, são formadas ligações covalentes entre a proteína e o DNA por meio da adição de anticorpos específicos para essa proteína. É falsa (F). No ChIP, a proteína de interesse é ligada ao DNA, mas não necessariamente por ligações covalentes; a ligação é geralmente por interações não covalentes, e os anticorpos são usados para precipitar a proteína ligada ao DNA, mas não para formar ligações covalentes. Portanto, a sequência correta é: V - V - F. A alternativa que apresenta essa sequência é a) A.
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Ed
há 2 anos
Vamos analisar cada afirmação sobre as técnicas utilizadas para identificar os locais de interação entre proteínas e DNA: ( ) A MNase (nuclease microcócica), uma nuclease específica, capaz de clivar o DNA em pequenos fragmentos, é modificada com a adição de uma proteína, a proteína A (pA) no sequenciamento CUT & RUN. Verdadeiro (V). A técnica CUT & RUN envolve a modificação da MNase com a proteína A para clivar o DNA em regiões de interação proteína-DNA. ( ) A MNase modificada com a pA forma regiões de interação entre a proteína e o DNA que podem ser imunoprecipitadas, formando uma amostra rica de precipitados de regiões de interação da proteína de interesse com o DNA. Falso (F). Na técnica CUT & RUN, as regiões de interação não são imunoprecipitadas, mas sim clivadas pela MNase modificada para posterior sequenciamento. ( ) No sequenciamento ChIP, a proteína de interesse é reticulada ao DNA, ou seja, são formadas ligações covalentes entre a proteína e o DNA por meio da adição de anticorpos específicos para essa proteína. Verdadeiro (V). Na técnica de imunoprecipitação de cromatina (ChIP), a proteína de interesse é ligada ao DNA por meio de anticorpos específicos, permitindo a identificação dos locais de interação. Portanto, a sequência correta é V - F - V, correspondente à alternativa B) V - F - V.
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