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O PCR em tempo real é uma técnica que permite a quantificação e amplificação simultâneas de um fragmento alvo de DNA. Apesar de essa técnica permitir uma quantificação absoluta da quantidade inicial de cópias do fragmento, o processo de quantificação deve ser sempre relativo a uma amostra controle ou a outra sequência que sirva de parâmetro para que se tenha uma ideia de aumento ou redução do produto esperado. A especificidade de sondas fluorescentes utilizadas no PCR em tempo real é importante, uma vez que evita, entre possíveis resultados indesejados da reação:
a) a interferência pela detecção da reação de polimerase em tempo real.
b) a interferência por formação de dímeros de primers.
c) a reação de polimerase tradicional.
d) interferência pela detecção de DNA.
e) interferência pela detecção de RNA.
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Questões para o Sucesso

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Para responder à pergunta sobre a especificidade das sondas fluorescentes no PCR em tempo real, precisamos entender o que essas sondas fazem e quais problemas elas evitam. As sondas fluorescentes são projetadas para se ligar especificamente ao fragmento de DNA alvo que está sendo amplificado. Isso é crucial porque, se a sonda não for específica, pode haver a detecção de produtos indesejados, como dímeros de primers ou outras sequências não-alvo. Vamos analisar as alternativas: a) A interferência pela detecção da reação de polimerase em tempo real - Isso não é um problema relacionado à especificidade das sondas. b) A interferência por formação de dímeros de primers - Essa é uma preocupação real, pois dímeros de primers podem ser amplificados, mas não é o que as sondas fluorescentes evitam diretamente. c) A reação de polimerase tradicional - Isso não se aplica, pois a questão é sobre sondas fluorescentes, não sobre a polimerase em si. d) Interferência pela detecção de DNA - Essa opção é muito ampla e não se refere especificamente ao problema que as sondas evitam. e) Interferência pela detecção de RNA - Embora o RNA possa ser um problema em algumas reações, a questão foca na especificidade em relação ao DNA. A alternativa que melhor se relaciona com a especificidade das sondas fluorescentes e o que elas evitam é: b) a interferência por formação de dímeros de primers.

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A obtenção de células-tronco é um procedimento difícil de ser realizado, tanto do ponto de vista técnico quanto do ponto vista ético. As células-tronco de adulto são raras no organismo e não apresentam características que permitam sua fácil identificação. As células-tronco embrionárias necessitam da destruição do embrião, processo controverso em vários aspectos éticos e religiosos. Recentemente os pesquisadores conseguiram produzir em laboratório as células de pluripotência induzidas, ou seja, a partir de uma célula somática obtém-se uma célula-tronco pluripotente. Esse procedimento é essencial para o futuro das pesquisas na área.
Assinale a alternativa que contém as informações verdadeiras.
I. As células pluripotentes são assim chamadas por possuir a capacidade de se transformar em qualquer tipo de célula adulta.
II. As células-tronco adultas são chamadas de multipotentes por serem mais versáteis que as embrionárias e encontram-se principalmente na medula óssea.
III. As células-tronco multiplicam-se através do processo de divisão celular chamado mitose.
IV. As células-tronco de adultos são originárias apenas de organismos adultos.
a. Apenas I.
b. I e IV.
c. I e III.
d. I e II.
e. II e IV.

O desenvolvimento de plantas transgênicas também tomou grandes proporções com os estudos envolvendo a biotecnologia e a tecnologia do DNA recombinante. A Agrobacterium tumefaciens é uma bactéria que infecta plantas (tabaco). Ela apresenta um DNA extracromossomal que é capaz de migrar da bactéria para a célula da planta durante um processo de infecção. A engenharia genética pode manipular esse DNA extracromossomal para que os genes sejam transferidos para a planta e integrem seu genoma.
Ordene corretamente as etapas para que esse processo seja possível:
a. 2, 6, 5, 7, 4, 1, 3, 8
b. 2, 3, 1, 6, 4, 5, 7, 8
c. 8, 6, 5, 4, 1, 2, 3, 7
d. 3, 2, 1, 6, 5, 4, 8, 7
e. 5, 1, 2, 7, 3, 4, 8, 6

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