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Biologia Molecular

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Hoje em dia, trabalho com material genético tornou-se rotineiro. Para uma correta extração de ácidos nucleicos, é importante a escolha adequada de protocolos e reagentes para aquele material que se quer extrair e para que fim se destina.
Em um protocolo de extração de DNA ou RNA, não se deve usar como reagente:
A Proteases
B Tampão
C Nucleases
D Sais
E Álcool

Exercícios Para o Conhecimento

ano passado

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Tema 3 Isolamento de Ácidos Nucléicos

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ESTÁCIO

Respostas

Ed

ano passado

Para a extração de ácidos nucleicos, como DNA ou RNA, é fundamental evitar a degradação do material genético. Vamos analisar as opções: A) Proteases - Essas enzimas são usadas para degradar proteínas e podem ser úteis em alguns protocolos de extração, mas não afetam diretamente a extração de ácidos nucleicos. B) Tampão - Os tampões são essenciais para manter o pH adequado durante a extração e são necessários. C) Nucleases - Essas enzimas degradam ácidos nucleicos (DNA e RNA). Portanto, sua presença é indesejável em um protocolo de extração, pois elas podem destruir o material que se deseja extrair. D) Sais - Os sais são frequentemente utilizados em protocolos de extração para ajudar na precipitação de ácidos nucleicos. E) Álcool - O álcool é utilizado para precipitar o DNA ou RNA durante a extração. Dessa forma, a opção que não deve ser usada como reagente em um protocolo de extração de DNA ou RNA é: C) Nucleases.

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Com relação à coleta, transporte, armazenamento e processamento de amostras de sangue para posterior extração de DNA, avalie as sentenças e assinale a alternativa INCORRETA:
A amostra de sangue fresca deve ser
A imediatamente resfriada e mantida a 2-8°C até a extração do DNA.
B agente anticoagulante preferencialmente utilizado é o EDTA ao invés da heparina.
C Tubos de vidro devem ser evitados.
D rompimento das hemácias pode liberar grupamento heme, este é um contaminante prejudicial.
E A amostra de sangue não precisa ser resfriada e pode ser transportada em temperatura ambiente por até 2 dias.

Um pesquisador está organizando um experimento para testar a eficiência de três métodos de extração de DNA a partir de células bucais coletadas com swab. Para garantir a validade científica dos resultados, ele decide adotar um desenho experimental rigoroso, baseado em amostragem aleatória simples e controle das variáveis independentes.
Considerando os fundamentos do desenho experimental e as boas práticas laboratoriais, qual atitude representa um erro metodológico que pode comprometer a confiabilidade dos resultados?
A Incluir apenas voluntários que consentiram participar do estudo
B Definir previamente a concentração dos reagentes utilizados em cada extração
C Utilizar um mesmo técnico para realizar todas as extrações, minimizando a variação.
D Adotar como critério de seleção apenas os voluntários disponíveis no dia da coleta.
E Realizar as análises utilizando mesmo equipamento para todos os testes.

Para selecionar uma amostra aleatória de tamanho n de uma população formada por N unidades, que são numeradas de 1 a N segundo uma certa ordem, escolhe-se aleatoriamente uma unidade entre as k primeiras unidades da população, onde k = N / n e seleciona-se cada k-ésima unidade da população em sequência. Esta técnica de amostragem denomina-se amostragem:
A Sistemática
B Por etapas
C Probabilística
D Não-probabilística
E Aleatória simples

Em um laboratório especializado na extração de RNA a partir de tecidos tumorais, uma bióloga observou que a qualidade do RNA extraído estava comprometida, com sinais de degradação. Após revisar os protocolos, verificou-se que a amostra foi deixada à temperatura ambiente por cerca de 3 horas antes da adição de qualquer solução estabilizante.
Qual das alternativas descreve, de forma mais precisa, motivo da degradação observada?
A- A presença de hemoglobina nas células tumorais acelera a degradação do RNA.
B- A amostra não foi embebida em formol, comprometendo a integridade do RNA.
C- A ausência de solução estabilizante permitiu a ação contínua de ribonucleases.
D- O transporte da amostra foi feito sem gelo seco, aumentando a atividade das DNases.
E- A demora na adição de agentes quelantes impossibilitou a extração adequada do RNA.

Durante uma capacitação em um laboratório de análises clínicas, a equipe responsável pelos testes moleculares está revisando os procedimentos para garantir a qualidade das análises. Um dos técnicos relata que uma amostra de sangue utilizada em um teste de PCR apresentou resultado inválido.
Diante dessa situação, qual das opções explica, de forma mais adequada, a razão pela qual o resultado do teste foi comprometido?
A A heparina impede a separação do plasma, impossibilitando a extração do DNA.
B A heparina interfere nas reações químicas da PCR, inibindo a amplificação do material genético.
C A presença de heparina acelera a degradação do RNA, comprometendo os testes moleculares.
D A heparina causa lise dos leucócitos, impedindo a identificação de polimorfismos genéticos.
E A utilização de heparina reduz a quantidade de plasma disponível para análise, tornando o teste inconclusivo.

Você foi contratado por uma empresa de coleta de DNA para realizar testes de ancestralidade, a coleta é feita com swab pelo próprio cliente e tubo chega em suas mãos.
Leia as alternativas e marque a incorreta.
A A amostra coletada pode ficar por até uma semana em temperatura ambiente.
B O kit utilizado para a coleta de DNA deve possuir informações claras e objetivas.
C A coleta pode ser realizada, sem a necessidade de ir ao laboratório.
D O swab utilizado deve estar limpo, sem detritos, caso tenha marcas de batom ou restos de comida o cliente deve repetir procedimento.
E O tubo deve conter apenas swab limpo dentro dele.

DNA (ácido desoxirribonucleico), material genético de seres vivos, é uma molécula de fita dupla, que pode ser extraída de forma caseira a partir de frutas, como morango ou banana amassados, com uso de detergente, de sal de cozinha, de álcool comercial e de uma peneira ou de um coador de papel.
O papel do detergente nessa extração de DNA é:
A Aglomerar DNA em solução para que se torne visível.
B Promover lise mecânica do tecido para obtenção de DNA.
C Emulsificar a mistura para promover a precipitação do DNA.
D Promover atividades enzimáticas para acelerar a extração do DNA.
E Romper as membranas celulares para liberação do DNA em solução.

Na extração de RNA, todos os cuidados citados abaixo devem ser tomados, exceto:
A- Uso de solução fenol/clorofórmio em pH ácido.
B- Todo material deve ser RNAse free e lavado com soluções neutralizadoras de RNAses.
C- É preferível o uso de um aparelho sonicador para a quebra das membranas celulares, ao invés do uso de detergentes.
D- Na extração de RNA, usamos acetato de amônio para auxiliar a separação entre a fase orgânica e a aquosa.
E- RNA deve ser rapidamente congelado em nitrogênio líquido.