O que diferencia uma nested-PCR de uma PCR convencional?

Nested PCR é uma nova PCR de um material amplificado anteriormente. A ideia é aumentar a quantidade de material genético ou trabalhar com mais de um marcador molecular de uma só vez.

A técnica criada foi chamada de PCR (Reação em Cadeia da Polimerase) que é a PCR convencional. Para tanto, são necessários dois oligonucleotídeos (iniciadores) que se ligam ao DNA e delimitam o segmento que a polimerase irá replicar.

Porém, quando a amostra de DNA não é a ideal para replicação, podemos recorrer à nested PCR. A diferença é que a amostra de DNA utilizada é obtida de uma PCR convencional anterior realizada com o DNA não ideal. Agora, precisamos de mais dois iniciadores internos à dupla de iniciadores anterior.

Portanto, o que diferencia uma nested PCR de uma PCR convencional é o fato de que a amostra utilizada na nested PCR é proveniente do produto de uma PCR convencional anterior com uma dupla de iniciadores internos à dupla utilizada na PCR convencional.