Biologia Molecular - Enzimas de restrição

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Enzimas de restrição são encontradas em bactérias (e 
outros procariontes). Elas reconhecem e se ligam a 
sequências específicas de DNA, chamadas sítios de 
restrição. Cada enzima de restrição reconhece 
apenas um ou alguns sítios de restrição. Quando ela 
encontra suas sequências alvo, a enzima de restrição 
fará um corte na dupla hélice da molécula de DNA. 
Normalmente, o corte é no sítio de restrição ou próximo 
a ele e ocorre em um padrão arrumado, previsível. 
Como um exemplo de como uma enzima de restrição 
reconhece e corta uma sequência de DNA, vamos 
considerar Eco RI, uma enzima de restrição comum 
usada em laboratórios. Eco RI corta no seguinte sítio: 
 
Quando EcoRI reconhece e corta este sítio, ela 
sempre faz isso em um padrão muito específico que 
produz extremidades com DNA fita simples. 
 
Se outro pedaço de DNA tiver terminação 
correspondente (por exemplo, porque ele também foi 
cortado pela EcoRI), as terminações podem se juntar 
por pareamento de bases complementares. Por esta 
razão, diz-se que enzimas que deixam terminações de 
fita única produzem extremidades pegajosas. 
Extremidades pegajosas são úteis em clonagem 
porque seguram dois pedaços de DNA que podem 
ser ligados pela DNA ligase. 
Nem todas as enzimas de restrição produzem 
extremidades adesivas. Algumas são "cortadoras 
bruscas" que cortam no meio de uma sequência alvo 
e não deixam terminação. A enzima de restrição SmaI 
é um exemplo de enzima que faz cortes bruscos: 
 
Fragmentos com corte perpendicular, sem terminações 
de fita única, podem ser unidos um ao outro pela DNA 
ligase. No entanto, fragmentos deste tipo são mais 
difíceis de se ligarem (a reação de ligação é menos 
eficiente e mais propensa a falhar) porque não há 
terminações de fita única para manter as moléculas de 
DNA na posição. 
 
Resumindo: 
Enzimas de restrição são enzimas que cortam o DNA. 
Cada enzima reconhece um ou mais sequências alvo 
e corta o DNA nestas sequências ou perto delas. 
Muitas enzimas de restrição fazem cortes escalonados, 
produzindo terminações com DNA fita simples. No 
entanto, algumas produzem extremidades rombas.