Resumão dos métodos de exames parasitológicos

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MÉTODOS DE EXAMES
PARASITOLÓGICOS
PARASITOLOGIA CLÍNICA
O QUE É NECESSÁRIO
SABER?
Nome do método AplicaçãoPrincípio Passo a passo
Hoffman, Pons e Janer
Rugai
Ritchie
Kato-Katz
Coproplus
Faust
Willis
Sedimentação espontânea
Termohidrotropismo
Sedimentação por centrifugação
Concentação
Flutuação espontânea
Centrifugoflutuação
 
Pesquisa de ovos e larvas de
helmintos, de cistos e
trofozoítos de protozoários
 
Ordem do procedimento
 
Materias utilizados em cada técnica
MÉTODO DE HOFFMAN,
PONS E JANER
Princípio
Materias utilizados 
Sedimentação espontânea
Aplicação
Identificação de ovos e larvas de helmintos e
cistos de protozoários.
Água destilada
Cálice de sedimentação
Parasitofiltro
Proveta de vidro graduada
Copo descartável
Espátula de madeira
Lugol
Pipeta de plástico
MÉTODO DE HOFFMAN,
PONS E JANER
Colocar de 2 - 5 gramas de fezes em um copo descartável com 5mL de água e triturar com espátula de madeira. 
Acrescentar mais 20mL de água.
Filtrar a suspensão para um cálice cônico de 200mL através do parasitofiltro; os detritos retidos são lavados com
mais 20mL de água, agitando-se constantemente com o bastão de vidro, devendo o líquido de lavagem ser
recolhido no mesmo cálice. 
Completar o volume do cálice com água. *
Deixar a suspensão em repouso durante 2 a 24 horas.
Findo esse tempo, observar o aspecto do sobrenadante tomando uma das duas condutas:
Se o líquido estiver turvo, descartá-lo cuidadosamente sem levantar ou perder o sedimento. 
Se o líquido estiver limpo e o sedimento bom, colher uma amostra do sedimento para exame. 
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Passo a passo
MÉTODO DE RUGAI
OBS: esse método não pode ser
realizado com fezes diarreicas!
Princípio
Materias utilizados 
Termohidrotropismo
Aplicação
Pesquisa de larvas de Strongyloides stercoralis e
de ancilostomídeos.
Banho-maria
Água destilada (45ºC)
Cálice de sedimentação
Gaze
Copo descartável
Espátula de madeira
Lâminas
Pipeta de plástico
MÉTODO DE RUGAI
OBS: esse método não pode ser
realizado com fezes diarreicas!
Pesar 10 gramas de fezes frescas sem conservantes diretamente na tampa do frasco da amostra ou na tampa de
outro frasco estéril.
Envolver a tampa com a amostra em uma gaze dobrada em quatro, fazendo uma pequena trouxa.
Colocar o material assim preparado, com a abertura voltada para baixo, num cálice de sedimentação contendo água
aquecida (45 ºC) em quantidade suficiente para entrar em contato com as fezes.
Deixar uma hora em repouso
Colher o sedimento no fundo do cálice, com ajuda de uma pipeta.
Examinar ao microscópio.
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Passo a passo
MÉTODO DE RITCHIE
Princípio
Materias utilizados 
Sedimentação por centrifugação
Aplicação
Pesquisa de ovos de helmintos, oocistos de
coccídeos e cistos de protozoários
Éter etílico
Água destilada
Copo descartável
Detergente neutro
Centrífuga
Swab de algodão
Formol 10%
Parasitofiltro
Pipeta graduada de vidro
Pipeta de plástico
Proveta graduada
Tubo de Falcon de 15mL
MÉTODO DE RITCHIE
Passo a passo
Pesar de 1 - 2 gramas de fezes em copo de plástico e diluir em 10mL de água destilada.
Homogeneizar bem.
Filtrar a suspensão de fezes em gaze cirúrgica dobrada em quatro ou parasitofiltro, num copo plástico descartável. 
Transferir o filtrado para um tubo cônico de centrifugação, com capacidade para 15mL. 
Centrifugar por um minuto a 1.500 rpm.
Desprezar o sobrenadante e ressuspender o sedimento em água destilada. 
Repetir o procedimento até que o sobrenadante esteja límpido.
Na última lavagem, decanta-se o líquido sobrenadante e acrescenta-se 1 - 2mL de solução tamponada de formol a 10%, misturando-se bem. 
Após a homogeneização, acrescenta-se a solução de formalina até completar-se o volume de 10mL, deixa-se a suspensão em repouso por 10
minutos e adiciona-se 3mL de éter etílico com agitação vigorosa subsequente.
Centrifugar por um minuto a 1.500rpm.
Ao final da última etapa de centrifugação, formam-se quatro camadas:
O sedimento no fundo, contendo os elementos parasitários.
Uma camada de formalina.
Uma camada rica em detritos fecais.
Uma camada de éter na superfície
As três camadas superiores são desprezadas e as paredes do tubo são limpas com o swab.
Colocar o sedimento sobre a lâmina e observar.
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KATO-KATZ
Princípio
Materias utilizados 
Concentração de ovos
Aplicação
Pesquisa de ovos de Schistosoma mansoni
Fezes frescas
Espátula de madeira
Kit Kato-Katz (cartões de plástico, papel
celofane, tela de náilon)
Solução de verde malaquita 
a 3%
KATO-KATZ
Colocar, sobre um papel higiênico, uma pequena quantidade de amostra fecal.
Comprimir as fezes com um pedaço de tela metálica ou similar de náilon. 
Retirar as fezes que passam pela parte superior da tela e transferi-la, com o auxílio de um palito, para o orifício de
um cartão retangular de plástico, colocado sobre uma lâmina de vidro.
Após encher completamente o orifício, retirar o cartão cuidadosamente, deixando as fezes sobre a lâmina.
Cobrir as fezes com o papel celofane. Inverter a lâmina sobre uma folha de papel e comprimi-la.
Após, uma hora, examinar ao microscópio contando os ovos presentes na preparação.
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Passo a passo
COPROPLUS
Princípio
Materias utilizados 
Método que utiliza pequena
quantidade de fezes
Aplicação
Diagnóstico de todas as formas e espécies
Bandeja para sedimentação Coproplus
Espátula de madeira
Fezes frescas
Frascos de Coproplus
Lâminas
Lugol
COPROPLUS
Ao receber a amostra, abrir o cap de vedação para liberação dos gases formados no interior do frasco, tampar
novamente e agitar o frasco em movimentos circulares até a dissolução da amostra.
Remover o cap de vedação, inverter o frasco, pressioná-lo levemente para retirar o excesso de amostra contida na
tampa e colocá-lo na bandeja de sedimentação por 15 minutos.
Desprezar a primeira gota e gotejar na lâmina de vidro.
Adicionar lugol e examinar ao microscópio. 
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Passo a passo
MÉTODO DE FAUST
Princípio
Centrífugo-flutuação
Aplicação
Pesquisa de ovos leves de helmintos, oocistos
de coccídeos e cistos de protozoários. 
Materias utilizados 
Fezes frescas
Alça bacteriológica
Água destilada
Copo descartável
Centrífuga
Lamínulas
Espátula
Parasitofiltro
Proveta graduada de vidro
Pipeta de plástico
Solução de sulfato de zinco a 33%
Tubo de Falcon de 15mL
OBS: não é possível observar
trofozoítos com esse método!
Pesar 10 gramas de fezes e diluir em 20 mL de água destilada
Homogeneizar bem
Filtrar através de parasitofiltro, num copo plástico, e transferir 12mL para um tubo de Falcon
Centrifugar por um minuto a 2500 rpm
Desprezar o sobrenadante e ressuspender o sedimento em água.
Repetir as operações 4 e 5 mais duas ou três vezes ou até que o líquido sobrenadante fique claro.
Desprezar o sobrenadante e ressuspender o sedimento com uma solução de sulfato de zinco a 33%.
Centrifugar novamente por um minuto a 2500 rpm
Os cistos e alguns oocistos de protozoários e ovos leves presente na amostra fecal estarão na película superficial. 
Recolher a película com a alça de platina, colocar numa lâmina, acrescentar lugol. Cobrir com lamínula.
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MÉTODO DE FAUST
Passo a passo
OBS: não é possível observar
trofozoítos com esse método!
MÉTODO DE WILLIS
Princípio
Flutuação espontânea
Aplicação
Pesquisa de ovos leves de helmintos. Não é
recomendado para busca de cistos de
protozoários, larvas de helmintos e ovos pesados.
Materias utilizados 
Fezes frescas
Espátula de madeira
Frascos plásticos de
coleta
Lâminas
Lamínulas
Lugol
Solução saturada de NaCl
Pipetas de plástico
MÉTODO DE WILLIS
Preparar previamente a solução saturada de cloreto de sódio 
Colocar 10g de fezes em um frasco de coleta (pode ser utilizado o frasco que as fezes foram enviadas)
Diluir a amostra em solução saturada de cloreto de sódio
Completar o volume até a borda do frasco
Colocar na borda do frasco uma lâmina, que deverá estar em contato com o líquido.
Deixar em repouso por cincominutos.
Findo esse tempo, retirar rapidamente a lâmina, voltando a parte molhada para cima.
Corar com lugol. Levar ao microscópio.
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Passo a passo
OBRIGADA!