desenvolvimento de linfócitos

Prévia do material em texto

Desenvolvimento de Linfócitos e Rearranjo Gênico
Insira o texto aqui
Insira o texto aqui
Insira o texto aqui
Desenvolvimento dos linfócitos b:
· Antes do nascimento:
· LB se desenvolvem a partir de células precursoras
· Após o nascimento:
· As células B são geradas na medula óssea.
Estrutura da molécula de anticorpo:
· Cadeias leves: ou ;
· Cadeias pesadas: , , , , ;
· Regiões: Aminoterminal (NH3) e Carboxiterminal (COO-)
· Regiões: Varíavel (VH e VL) e Constante (CH)
· Pontes de dissulfeto: S-S
REGIÕES HIPERVARIÁVEIS DA MOLÉCULA DE ANTICORPO:DESENVOLVIMENTO DE LINFÓCITOS:
CARACTERÍSTICAS ESTRUTURAIS DAS REGIÕES VARIÁVEIS:
· Regiões Determinantes de Complementariedade (CDRs):
· Formadas por 3 segmentos hipervariáveis de cadeia leve e pesada originando o sítio de ligação ao Ag;
· São intercaladas, entre si, por sequências de aminoácidos mais conservados, formando uma região estrutural.
REGIÕES HIPERVARIÁVEIS: CDR1, CDR2 E CDR3 DAS REGIÕES VL E VH:
· CDRs: regiões determinantes de complementariedade das regiões VL e VH; 
· Diferenças nas sequências aminoácidos entre as CDRs de diversas moléculas de anticorpos contribuem para diferentes especificidades; 
· CDR3 dos segmentos VL e VH: são as mais variáveis e proporcionam maior contato com o ag;
Classes de Imunoglobulinas Humanas-determinada pela cadeia pesada:
· IgG - Cadeia Pesada Gama;
· IgM - Cadeia Pesada Um;
· IgA - Cadeia Pesada Alfa;
· IgD - Cadeia Pesada Delta;
· IgE - Cadeia Pesada Epsilon;
· Imunoglobulinas Humanas- Tipos de Cadeias leves:
· Kappa;
· Lambda;
Geração de Diversidade:
· Indivíduo >106 clones de linfócitos T e B diferentes 
· Cada LB um possui um receptor BCR específico para cada epitopo antigênico. 
· Um gene = uma proteína >106 genes???? (1000.000 genes????) NÃO!!!!!
· Complexo gênico com regiões V (D) J e C que quando se rearranjam dão origem a um gene de Imunoglobulina;
ESTRUTURA DA MOLÉCULA DE ANTICORPO:
· Porção Variável:
· Cadeias Leves:
· K ou (V-J)
· Cadeias Pesadas:
· (V-D-J)
· Porções constantes:
· IgM, IgG, IgD, IgA, IgE;
VARIABILIDADE GÊNICA EM HUMANOS:
Ontogenia dos Linfócitos B:
ESTÁGIO DE DESENVOLVIMENTO DO LINFÓCITOS B:
· Estágio Pró B – INÍCIO DA MATURAÇÃO: 
· (1) expressão de 3 genes (TdT, RAG 1 e RAG 2): gerenciam a recombinação gênica para a síntese de Ig. 
· (2) Também ocorrerá o início da expressão gênica da cadeia pesada (u –IgM): V-D-J 
· (3) Enzima TdT: Permite a adição de nucleotídeos adicionais entre os segmentos juncionais. 
· Estágio Pré B:
· Expressão da Cadeia pesada (u –IgM) - (VDJ) + cadeia invariável;
· Estágio Pré-B: 
· Exclusão alélica: contribui para que toda célula B expresse um único receptor mantendo a especificidade clonal – rearranjo de um único alelo parental;
· Enzima tirosina kinase de Bruton (BTK): 
· Emite sinais de sobrevivência, proliferação e amadurecimento celular;
O desenvolvimento da célula da linhagem B procede por meio de vários estágios marcados por rearranjo e expressão de genes das imunoglobulinas:
· Célula B imatura: 
· Seleção positiva (Moléculas na superfície da membrana emitem sinais de sobrevivência) – 
· Seleção negativa (Edição de receptor ou morte por apoptose quando ocorre o reconhecimento de antígenos próprios com alta afinidade.)
· Células B imaturas que expressam IgM ligadas à membrana deixam a medula:
· Baço;
· Células B (foliculares) amadurecem e expressam IgM e IgD ligadas à membrana
· Genes RAG 1 e 2: 
· Participa na edição de receptores da cadeia Variável Leve (k ou ): seleção +
· Seleção Negativa: A troca das cadeias leves por edição do receptor pode resgatar algumas células B autorreativas pela mudança da sua especificidade antigênica.
· A troca das cadeias leves (Kappa-k ou Lambda (λ)) por meio da edição do receptor pode resgatar algumas células B autorreativas pela mudança da sua especificidade antigênica.
Segmentos são unidos por recombinação:
ORGANIZAÇÃO DOS LOCI DA IMUNOGLOBULINA HUMANA NA LINHAGEM GERMINATIVA:
· Um gene de imunoglobulina rearranjado produtivamente é expresso imediatamente como proteína pela célula B em desenvolvimento.
EXEMPLO DE REARRANJO GÊNICO CADEIA PESADA (VDJ):
Recombinação e expressão dos genes das cadeias pesadas e leves das Imunoglobulinas:
SPLICING ALTERNATIVO:
· O Splicing é um processo que remove os íntrons e junta os éxons durante a transcrição do RNA.
· A teoria do splicing alternativo mostra que um mesmo mRNA pode dar origem a diferentes proteínas de acordo com o splicing alternativo que clivará o mRNA e unirá os fragmentos em diferentes ordens e tamanhos, originando diferentes proteínas;
Os estágios nos rearranjos gênicos da imunoglobulina, nos quais as células podem ser eliminadas:
Resumo:
· As células B se desenvolvem na medula óssea e migram para os órgãos linfoides periféricos, onde podem ser ativadas pelo antígeno. 
· Célula B madura: Nos centros germinativos (o ocorre a maturação de afinidade (troca de bases nitrogenadas) mediada pela enzima AID. Aumenta a afinidade do Ac pelo Ag.DESENVOLVIMENTO E DIVERSIDADE DE LINFÓCITOS T:
Timo:
· Na anatomia humana, o timo está localizado na porção antero-superior da cavidade torácica;
CURIOSIDADES SOBRE O TIMO:
· Camundongos: 
· O timo continua a se desenvolver 3 a 4 semanas após o nascimento; 
· Homem: 
· O timo está plenamente desenvolvido no nascimento;
· A taxa de produção de células T é maior antes da puberdade; 
· Após a puberdade o timo começa a diminuir de tamanho, assim como a produção de novas células T no adulto, embora continue produzindo por toda a vida;
· A remoção do timo após a puberdade não é acompanhada de perdas significativas quanto ao número e função de células T: 
· A imunidade pode ser mantida sem a produção de um número significativo de novas células, pois o conjunto de células t periféricas é mantido por longos períodos (células de memória) e também pela divisão de algumas células t maduras
RECEPTOR DE CÉLULA T – TCR:
· 30.000 receptores de antígenos idênticos por célula;
TIPOS DE TCR (α,β):
· TCR: 
· Heterodímero formado por duas cadeias polipeptídicas transmembranas (alpha e beta); 
· As cadeias alpha e beta são as únicas responsáveis pela especificidade do Ag e pela restrição da célula T ao MHC; 
· CD3: 
· Proteínas responsáveis pela transdução de sinais para o núcleo da célula; ativação do LT após o reconhecimento do antígeno;
TIPOS DE TCR (γ, δ):
· Linhagem distinta de célula T; 
· Funções pouco conhecidas; 
· Residem dentro do epitélio (pele);
· Parecem ser capazes de reconhecer antígenos diretamente, assim como os anticorpos, sem a necessidade de serem apresentados via MHC; 
· Estudos mostram que os rearranjos gênicos das regiões variáveis são mais parecidas às moléculas de anticorpo do que os próprios receptores de células T alfa/beta;
CO-RECEPTORES DE CÉLULAS T:
· CD4+: 
· Monômero proteico formado por 4 domínios extracelulares; 
· CD8+: 
· Dímero proteico formado por 2 cadeias: -uma alpha e outra beta;
· Co-receptor CD4:
· Liga-se na fenda hidrofóbica formada na junção dos domínios beta 2 da molécula de MHC II
· Co-receptor CD8:
· Liga-se na fenda hidrofóbica formada na junção dos domínios alfa 3 da molécula de MHC I;
MATURAÇÃO DE LINFÓCITOS T OCORRE NO TIMO:
· Duplo +, apresenta as duas possibilidades, o co-receptor CD4 e CD8;
ONTOGENIA DAS CÉLULAS T - 3 SEMANAS:
ORGANIZAÇÃO DOS LOCI DO TCR NA LINHAGEM GERMINATIVA:
IMPORTANTE !!!
· Recombinação dependem de componentes específicos da recombinase (complexo de enzimas), chamadas de RAG – 1 e RAG – 2;
· Outras enzimas com atividade nuclease, DNA ligase e outros também são importantes neste processo;
OS ESTÁGIOS DE REARRANJO GÊNICO NOS CÉLULAS T α:β
SEGMENTOS SÃO UNIDOS POR RECOMBINAÇÃO:
O PADRÃO TEMPORAL DE EXPRESSÃO DE PROTEÍNAS CELULARES IMPORTANTES NO DESENVOLVIMENTO DAS CÉLULAS T PRECOCES:
Linfócitos T diferenciam no Timo:
PROCESSO DE SELEÇÃO DO TIMO:
· A seleção negativa elimina os linfócitos T que reagem muito forte com as células apresentadorasdo timo.
PROCESSO DE SELEÇÃO DO TIMO - SELEÇÃO NEGATIVA: