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27/03 DIAGNÓSTICO LABORATORIAL Hemograma – Eritrograma I e II Eritrograma e plaquetograma Hematopoese: é o processo pelo qual as novas células do sangue passam por formação para células maduras e prontas que passaram por processo maturativo e hematopoiético dentro da medula óssea e que caem na circulação sanguínea. Produção celular (hemácias): acontece principalmente na medula óssea. No que passamos da fase de filhote para fase adulto que todos os sistemas já estão desenvolvidos teremos produção hematopoiético em ossos longos e chatos. Dentro da medula: temos a chamada medula vermelha (tecido vermelho) responsável por produzir células sanguíneas. E temos a chamada medula amarela (tecido gorduroso/adipócito), conforme o animal vai ficando senior / idoso, a medula amarela ocupa aos poucos a medula vermelha, ou seja, a produção de células sanguíneas diminui pois diminuiu o espaço da medula vermelha. Órgãos hematopoiético: fígado, baço e linfonodo. Eritropoietina: formado pelos rins e responsável pelo estimulo maturativo da medula óssea na produção de hemácia e na presencia da mesma na circulação. Função da hemácia é oxigenação Quando o organismo percebe situações de hipóxia, tecidos que não estão sendo oxigenados por diminuição de hemácia circulante o rim libera mais eritropoietina estimulando a medula liberar mais hemácias na circulação. Ex: Por isso que pacientes renal crônico já estabelecida frequentemente precisará de transfusão, devido a disfunção não consegue produzir eritropoietina de forma adequada, onde não estimula a medula, resultando em quadros de anemia e baixa concentração de eritropoietina. Avaliação sanguínea: Hemácias > mamíferos > célula madura > são células anucleadas Eritropoise: processo maturativo das hemácias/eritócitos. Quando ela se torna hemácia e a célula madura/pronta perde seu núcleo. Composição para nutrir, formar e permitir que o processo maturativo aconteça: Substratos mais importantes para esta divisão celular e maturação celular são Cobalamina, Ácido fólico B9, Ferro, Cobre, Piridoxina B6, Cobalto – B12 em ruminantes. Hemocaterese Acontece naturalmente, em tese as células tem uma meia vida, onde temos renovação celular constante. Onde a hemácia se torna ineficiente é feito a retirada dessas hemácias velhas da circulação, essa retirada ocorre pelos órgãos do sistema fagocitário (fígado, rins e linfonodos). A retirada nada mais é do que a lise da hemácia (hemólise) expondo e liberando hemoglobina que também será degradada pelo sistema fagocitário. A morte de eritrócitos é balanceada por produção e liberação dos reticulócitos e células maduras da medula óssea para o sangue periférico. Hemograma O que é? Avaliação celular de quantidade de células (hemácias, plaqueta e leucócito) e suas morfologia. O sangue precisa se manter líquido e fluido através do tubo anticoagulante para evitar formação de coágulos, a melhor opção para mamíferos o tubo seria de cor roxa que tem como anticoagulante o EDTA. Coleta de sangue em silvestres (peixe, anfíbios, répteis, aves) seria através do tubo verde com heparina que também é um anticoagulante. A diferença de cores de tubos para diferentes espécies é por conta que mamíferos tem células anucleadas que dá match com anticoagulante EDTA e silvestres possuem células nucleadas que dá match com heparina. Cuidados pré-analíticos: cuidados antes do processamento da amostra - Anticoagulante: EDTA (respeitar proporção sangue e EDTA) - Colher em repouso (ambiente tranquilo para evitar mais estresse no animal que libera N enzinas e hormônios que causam alteração no resultado da amostra, ou seja, valores que não são reais do dia a dia daquele animal) - Jejum de 8 horas (evitar lipemia pós prandial -sinais gordurosos- aumentando proteína plasmática total - hiperproteinemia devido a alimentação) - Homogeneizar por inversão lenta (8-10x) - - Enviar imediatamente ao laboratório ou refrigerar (dentro da geladeira) a amostra por até 24 horas - Identificar adequadamente a amostra - Enviar requisição com todos os dados do animal Avaliação quantitativa de hemácia Hemácia abaixo do valor de referência denominamos como anemia podendo ser regenerativa (medula responde mas não sei o motivo de degradação da hemácia) ou arregenerativa (medula não responde) para termos a reposta solicitamos o outro exame chamado de Reticulócitos. Hemácia acima do valor de referência denominamos como policetemia (o animal fica policetemico), podemos considerar como relativa (pode acontecer mas não é real) em quadros de desidratação, onde o paciente perde a parte água do sangue (plasma) e todos solutos concentram incluindo hemácias resultando em policemita relativa onde uma fluidoterapia já resolveria, outra possibilidade seria contração esplênica para aumentar liberação de hemácia pois naquele momento o corpo precisa de oxigênio, o tratamento seria manter o paciente em repouso. Policetemia absoluta (é real) seria por um excesso de eritrócitos na circulação, por ter duas classificação, primária (vera) onde temos uma disfunção dentro da medula, por muitas vezes resultante de neoplasia ligada a tecido vascular onde começa uma liberação excessiva de hemácia ou secundária onde a muita hemácia circulante onde a culpa não é da medula óssea e sim de um estimulo excessivo de eritropoietina circulante, tratamento é adequar a eritropoietina. Eritrograma Hematócrito >> avaliação quantitativa de hemácia porém o valor é representado em um valor porcentual % somente de hemácia em relação ao sangue. capilar de vidro > preenche de sangue > uma parte do capilar veda com fogo > centrifugação por mini centrifuga (soluto/hemácias por serem mais concentrada fica abaixo, fita branca são os glóbulos brancos, e o plasma por ser mais leve fica acima) > posicionamento do capilar na régua para determinar o % de hemácias. > avaliar a cor do plasma com objetivo de identificar se está lipêmico (esbranquiçado, turvo e denso indicativo de gordura), ictérico (amarelado indicativo de excesso de bilirrubina) ou hemolisado (vermelho indicativo de hemolise, degradação de hemácia e exposição de hemoglobina). dosagem de proteína total > presente no plasma > refratômetro > determinar o quantidade de PT dosagem de hemoglobina > avaliar quantidade de moléculas que transportam oxigênio através da hemoglobina responsável por fazer a hemácia exercer suas funções. Ex: pacientes com anemiaferropriva não possuem molécula transportadora de O2 Valores hemátimétricos Importância: paciente anêmico é necessário classificar o tipo através do vcm e chcm com relação a tamanho e cor. VCM – Volume corpuscular médio = tamanho da hemácia VCM = Ht (hematócrito) x 10 / He (hemácia total) = vcm (u3) Dentro do valor de referência: Normocítica (tamanho normal) Acima do valor de referência: Macrocícita (acima do tamanho normal) Abaixo do valor de referência: Microcítica (abaixo do tamanho normal Anisocitose *** CHCM – Concentração de hemoglobina corpuscular média = concentração média dentro da hemácia/cor CHCM = Hb x 100 / Ht = chcm (%) Dentro do valor de referência: Normocrômica (cor normal) Abaixo do valor de referência: Hipocrômica (pouco corada) Não iremos encontrar situações de hipercrômica pois a hemácia não suporta mais do que cabe. Policromasia *** RWD Diferencia entre os tamanhos das hemácias onde mensura ANISOCITOSE ERITROCITÁRIA, ou seja, o grau de variação no tamanho entre eritrócitos (hemácias). Esfregaço sanguíneo Distribuição de sangue em uma lâmina de vidro de forma homogênea, onde se cora com corante específicos para que fique esroxeada/azulada (basoflíco)ou rosa/avermelhada/laranja (eosinofílico) Contagem de reticulócitos São células (hemácias) jovens e imaturas. Quando o paciente tem excesso de reticulócitos é resultado de medula responsiva, só se pede reticulócitos quando o paciente apresenta anemia classificando regeneração. Ex: Um paciente com hematócrito, hemácias normais, teor de hemoglobina normais, a quantidade de reticulócitos estará baixa ou alta? Baixa, pois não estamos precisando de mais hemácias pois a medula estará maturando aquela hemácia jovem e imatura e libera somente quando estiver madura; A) Eritoblasto (presença de núcleo) que antecede o reticulócito (12h agregado com presença de resquícios nuclear / 10/12 dias pontilhado - identificar anemia regenerativa ou não) e depois hemácia até se tornar uma célula anucleada * Em felino é possível avaliar as duas fases do reticulócito onde é feito uma contagem de cada fase, fase 1 reticulócito agregado significativo de liberação na circulação a 12hrs, pontilhado liberado a 10-12 dias. Qual o mais importante para avaliação? Agregado, pois quero saber o que está acontecendo no agora. Não levamos em consideração os pontilhados porque descrevem o que aconteceu há 10 dias. Uma doença que está tendo manifestação agora, o que aconteceu há 10 dias não é relevante. Em cães é possível enxergar somente o agregado. Laudo Contagem > CCR (contagem corrigida de reticulócitos) - é feito contagem somente dos reticulócitos somente do agregado > ↑ 1,0% cão: anemia regenerativa (medula produzindo células jovens) > ↑ 0,4% reticulócitos agregados no gato: anemia regenerativa Contagem absoluta para saber se a regeneração é nenhum, leve, moderada ou marcante: * Só se avalia o agregado CÃO GATO Grau de regeneração Reticulócitos Reticulócitos agregados Nenhum 60.000 < 15.000 Leve 150.000 50.000 Moderada 300.000 100.000 Marcante > 500.000 > 200.000 Morfologia celular Coloração de hemácia: basofílico ou eosofílico. Hemácias são biconvoca, porém olhamos a hemácia de cima, o que isso quer dizer, a parte biconvoca é a aquela arte mais clara do meio como se fosse uma palidez central (como se fosse uma rosquinha). Hemácias menores significa hemácia madura, hemácia maior e com coloração é hemácia jovem significativo de medula responsiva. Células com diferentes tamanhos: Anisocitose (diferencia de tamanho entre as células): macrocitose ou microcitose (área de maior destaque) Policromasia (alteração de coloração) Poiquilocitose Alteração em forma >>> diferencia entre a forma da hemácias Ex: A) Esferócitos: ação imunomediada contra hemácia, processo de anemia hemolítica imunomediada palidez central, menor, coloração mais densa/condensada devido o espaço que é menor. Se forma por uma tentativa de ação fagocitária falha lesionando a membrana, onde a hemácia vai se remodulando ficando menor e concentrando mais hemoglobina. B) Excentrócitos: palidez que deveria ser central está na periferia devido a processo oxidativo da molécula de hemoglobina se condensando somente em uma parte da hemácia. Pacientes que passam pelo processo de intoxicação (por condimentos, medicação, veneno, produtos químicos, etc) causando um desarranjo nessa molécula, resultando um uma má oxigenação e distribuição de oxigênio o que leva a complicações em tecidos distintos. C) Acantócitos: alteração na membrana tornando irregular. Excesso de gordura (colesterol triglicerídeos) no plasma leva a alteração. Não tem alteração funcional. D) Condócitos / Hemácia em alvo: esbranquiçamento de hemácia significativo de hemácia velha mas não se torna incapaz em relação a sua funcionalidade. A) Corpúsculo de Howell Jolly: apresenta palidez central, possuem o mesmo tamanho, presença do pontinho representando uma hemácia jovem que ainda não perdeu seu núcleo por completo. Regeneração medular B) Eritroblasto: É a célula ANTES do reticulócito pois ainda não houve diferenciação. Hemácias jovens/Regeneração medular C) Corpúsculo de Heinz: Ocorre pelo mesmo motivo do excentrócito. Significativo de anemia oxidativa devido a sensibilidade das hemácias que são mais suscetível a se romperem. Inclusão celular por agentes infecciosos As vezes dependendo da quantidade de agentes infecciosos é possível encontrar no hemograma quando se tem uma viremia alta, as vezes não é encontrado no hemograma e pede-se outro exame (PCR) mas nunca se descarta seu diagnóstico. A) Babesia sp.: significativo de doença do carrapato B) Mycoplasma sp.: parazitária C) Theileria sp.: significativo de erlichiose D) Corpúsculo de Lentz: significativo de cinomose Plaquetograma • Contagem de plaquetas (µL), avaliação quatitativa • Morfologia celular, análise de morfologia de plaqueta Função Agregar plaqueta (plug plaquetário) para combater algum tipo de sangramento / extravasamento de vaso sanguíneo. Os hormônios eritropoietina e trombopoietina são responsáveis pelo estímulo da produção e liberação de plaquetas. Plaquetas também passam pelo processo de maturação durante 3-5 dias através das células megacariócitos para serem liberadas prontas na circulação, e sua meia vida é de 8 dias. O baço sendo um órgão do sistema fagocitária é responsável pela ação contra a plaqueta onde ele retira as plaquetas velhas da circulação, em algumas situações o processo de fagocitária começa agir contra essas plaquetas agindo de forma excessiva. Quando no laudo apresentar ’’presença de agregado plaquetário’’ é preciso ignorar a contagem de plaqueta pois não é real, sendo necessário fazer uma nova coleta. VPM Volume plaquetário médio (amplitude de distribuição do tamanho das plaquetas). Mensura ANISOCITOSE PLAQUETÁRIA, ou seja, o grau de variação no tamanho entre plaquetas.
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