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Faculdade de Agronomia e Engenharia Florestal Departamento de Protecção Vegetal Licenciatura em Engenharia Agronómica Fisiologia Vegetal Relatório n°3: Efeito da Clorofila na Fotossíntese Discentes: Nhancole, Maria Augusta Nhacudine, Shelcia Merry Sérgio Docentes: Uwimana, Mureille Prof. Doutor Orlando Quilambo (PhD); Vilanculos, Nilsa Ernesto dra. Célia Martins; dra. Sónia Ventura Guilumbo dr. Mauro Machipane dr. Lucas Chiao Monitores: Elias Malazar Maputo, Novembro de 2021 Índice 1 .Introdução 1 2. Objectivos: 3 3. Material 4 4. Metodologia 6 5. Resultados 7 6. Discussão 8 7. Conclusão 9 8. Referências Bibliográficas 10 1 .Introdução Todos os órgãos verdes de uma planta, incluindo os caules e os frutos não maduros possuem cloroplastos, apesar das folhas serem o principal local de realização da fotossíntese (Viegas e Cecílio, 1998) Silva e Sasson (2007), definem a folha como sendo um órgão geralmente laminar, clorofilado e, portanto, fotossintetizante que também efetua a transpiração e trocas gasosas com o meio. As clorofilas são pigmentos naturais mais abundantes presentes nas plantas e ocorrem nos cloroplastos das plantas e ocorrem nos plastos das folhas e em outros tecidos vegetais. O nome clorofila foi proposto por Pelletire e Caventou em 1818 para designar a substância verde que se podia extrair das folhas com auxílio do álcool (Streit et al., 2005). Segundo Gonzalez (2000), a Fotossíntese é um processo químico realizado pelas plantas, algas e certos microrganismos, mediante o qual a energia solar é capturada e convertida em energia química na forma de ATP e compostos orgânicos reduzidos. A clorofila absorve fortemente a luz vermelha e violeta refletindo comprimento de onda intermediário cuja mistura dá cor verde, característico das folhas das plantas.(Godvindje, 1990). A fotossíntese é realizada pelas plantas devido a capacidade que as clorofilas tem de absorver a energia solar. Segundo Nitscke (1991) clorofilas são pigmentos que mais absorvem luz nas plantas. Os principais factores ambientais que afectam a fotossíntese são a luz, CO2 e temperatura. A disponibilidade da água e de nutrientes também são factores importantes, com efeitos mais indirectos sobre o processo ( Hopkins, 2000). A clorofila se encontra nos cloroplastos, organelos das células das folhas similares aa mitocôndrias por possuírem dupla membrana e seu próprio DNA, embora sejam muito maiores. A membrana externa dos cloroplastos é permeável a iões e pequenas moléculas (Gonzalez, 2000). Segundo Youvan (2000), a parte correspondente a matriz contém o estroma, espaço fluido que contém as enzimas das reações obscuras da fotossíntese, nos quais o CO2 é reduzido à glicose. Fazendo parte da membrana interna dos cloroplastos existem muitas estruturas planas e discoides chamadas tilápias, empilhadas como moedas, que formam unidades chamadas grana. A mafurreira cientificamente conhecida como Trichilia emética é uma dicotiledónea, de super-ordem spindales, pertencente a família Meliciaceae. A Mafurreira (Trichilia emetica) é uma árvore permanente que pode atingir entre 20 a 35 metros de altura, o seu tronco tem uma cor vermelho-escura e casca cinza e inchado na base, podendo ganhar pregas ao longo dos anos . As folhas têm uma forma irregular e são compostas por 3 a 5 pares de folíolos mais um terminal verde-escuro brilhante na superfície superior e coberto de pelos castanhos na superfície inferior. As suas flores são pequenas, com uma colocação amarela pálida e perfumadas, tendo geralmente 5 pétalas grossas com cerca de 2 cm, em torno de um centro peludo de estames (Matakala et al., 2005). As folhas desta planta, quando colocadas na cama durante a noite, têm a capacidade de induzir o sono. Uma infusão quente destas folhas é também utilizada como loção calmante sobre contusões ou como uma mistura para a tosse. As folhas são também uma fonte importante de alimento para animais selvagens (Grundy e Campbel, 1993). Na Nigéria as folhas são ainda utilizadas para o tratamento da sífilis e no Mali como remédio para cicatrização de feridas. (Komane et al., 2011). O limoeiro (Citrus limon ) é uma árvore de folha persistente que é originária da Asia. Os citrinos apresentam folhas firmes, verde-claras no início que com o passar do tempo tornam-se verde escuras. As folhas dos citrinos apresentam-se como folhas simples, na realidade são folhas compostas, mas unifoliadas, devido à incapacidade de formar outros pecíolos (Amaral, 1994). Os limoeiro apresentam limbos crenulados. As folhas são alternadas, de forma elíptica, oval ou lanceoladas. Sobre a sua epiderme existe glândulas repletas de óleos aromáticos, voláteis de aroma mais ou menos intenso e característico de cada espécie (Amaral, 1994). 2. Objectivos: Geral: · Estudar o efeito da clorofila na fotossíntese nas folhas de mafurreira (Trichillia emetica) e limaoeiro(citrus limon) Específicos: · Diferenciar o efeito da Clorofila nas folhas de mafureira e limaoeiro observadas no tratamento luz e escuro. · Mencionar os produtos gerados nas folhas submetidas aos dois tratamentos. · Observar o efeito da Clorofila na Fotossíntese nas folhas de Mafureira (Trichillia emetica) e Limaoeiro (citrus limon). 3. Material 3.1 Equipamento e material experimental · 4 Folhas verdes e frescas 2 de Trichillia emetica) e 2 de Limaoeiro (citrus limon). · Papel Absorvente; · Plástico; · 4 copos de vidro de 250ml e 4 copos de vidro de 1L · 2 placas de petri · Placa de Aquecimento; · Pinça. 3.2. Soluções · Água Corrente; · 100 ml de Álcool Etílico; · 100ml de Iodo. 4. Metodologia 24 Horas antes da aula prática 1° Cortou-se 2 folhas verdes, frescas e sem necrose de cada árvore de 2 de mafurreira (Trichillia emetica) e 2 de Limaoeiro (citrus limon). 2° Colocou-se uma das folhas de cada espécie dentro de duas placas de petri com papel higiénico humedecido e foram reservadas em local fresco (a temperatura ambiente) na luz (sobre a bancada) até o dia da realização da aula prática; 3° Embrulhou-se as outras duas folhas com papel de alumínio e foram deixadas no escuro também em local fresco (a temperatura ambiente) até o dia da realização da aula prática. No dia da aula prática: 4° Adicionou-se água corrente até 1/3 da capacidade do copo de vidro de 1L e ferveu-se na placa de aquecimento; 5° Adicionou-se uma pequena quantidade de água quente em 4 copos de vidro de 250ml e de seguida colocou-se as quatro folhas dentro dos copos por dois minutos; 6° Passados os dois minutos, retirou-se a água de todos copos de vidro de 250ml. De seguida adicionou-se álcool etílico até cobrir por completo cada uma das folhas e colocou-se em cada um dos copos de 250mL dentro de copos de vidro de 1L com água aquecida e tapou-se os copos de vidro de 1L com plástico deixando o copo de vidro de 250ml contendo as folhas e álcool destapados; 7° Depois de 45 minutos removeu-se do álcool e reservou-se as folhas nas 2 placas de petri. Observou-se o que aconteceu com as folhas e fez-se as respectivas anotações dos resultados; 8° Deixaram-se cair duas gotas de iodo sobre cada uma das folhas e anotou-se os resultados. 5. Resultados Com base na experiência pode-se verificar que das folhas das duas espécies colocadas em água fervida não houve alteração na cor da água, porém verificou-se mudança na cor da água onde se encontrava a folha da Trichillia emetica submetida ao tratamento do escuro, isto é, de verde-escuro para amarelo. Observa se também uma mudança na coloração das folhas da espécie Trichillia emetica após a adição do álcool. Essa mudança foi notada tanto as folhas submetidas ao tratamento da luz, quanto as do escuro, ou seja, a folha mudou de verde para castanho e as folhas da Citrus limon submetidas ao tratamento de luz e do escuro mantiveram a coloração inicial. Após a adição do iodo constatou-sea presença de grânulos de cor preta apenas nas folhas da Trichillia emetica nos dois tratamentos e as folhas da mangueira encontravam-se esbranquiçadas. A folha da Trichillia emetica submetida ao escuro apresentava maior quantidade de grânulos comparativamente a folha da mesma espécie submetida ao tratamento de luz. Também pôde-se verificar um maior brilho na superfície da folha de Trichillia emetica. Tabela 1: Diferença do efeito da clorofila nas folhas de e mafurreira (Trichillia emetica) na fotossíntese. Espécie Trichillia emetica (mafureira) Citrus Limon (limaoeiro) Tratamento Luz Escuro Luz Escuro Coloração após a adição do álcool Verde-Claro Verde-Claro Castanho Castanho-escuro Absorção do Iodo - - + ++ Aspecto da folha Esbranquiçada Esbranquiçada Manchas pretas Manchas pretas Produtos da Fotossíntese Amido Amido 6. Discussão As clorofilas são pigmentos verdes, presentes nas plantas e ocorre nos cloroplastos das folhas e em outros tecidos vegetais (Elbe, 2000). Por sua estrutura ser instável a clorofila encontra-se em constante síntese e degradação, alguns factores como calor, oxigénios, Luz e ácidos, interferem na degradação (Canto et al., 2005). Com a excepção da folha da mafurreira submetida ao tratamento de sombra e a água na qual restantes folhas haviam sido colocadas não apresentaram coloração alguma, visto que a agua fervida fornece calor a folha tendo um impacto sobre a clorofila. O álcool proporciona a extração da clorofila que favorecerá com auxílio de um indicador a visualização do produto fotossintetizante presente na folha. Segundo Vilarins (2011) o álcool etílico é um composto de polaridade relativamente alta que quando adicionada as folhas permite a extração com maior facilidade e em maior quantidade do pigmento clorofila nas folhas. Os solventes polares como a acetona, o metanol, o etanol, o acetato de etila, a piridina e a dimetilformamida são os mais eficazes para a extração da clorofila. O carácter hidrofóbico influencia directamente na escolha do melhor solvente para a sua extração. O iodo é uma solução que indica a presença de amido, no qual produz uma tonalidade preta-azulada ou marron-escuro. O não escurecimento da folha evidencia a inexistência de grânulos, ou seja, amido o que demostra que não houve realização da fotossíntese naquele órgão durante aquele período ou ainda a quantidade de amido poderia ser tao baixa a ponto de não ter sido evidenciada. Nas folhas, o amido é sintetizado nos cloroplastos. O teor de amido nas folhas aumenta durante o dia em virtude de o transporte de assimilados no floema não acompanhar a taxa de acúmulo promovido pela fotossíntese. À noite, como a translocação continua e a respiração o consome, os níveis de amido nas folhas decrescem. A maior quantidade de amido é comprovada pela maior extração da clorofila e consequentemente, a maior taxa fotossíntética. Quanto menor a extração da clorofila, menor é a taxa fotossíntética e consequentemente menor quantidade de amido desse órgão. Daí que evidencia-se a relação existente entre a clorofila e a fotossíntese. 7. Conclusão Depois de realizada a experiência, conclui-se que a Clorofila exerce um papel fundamental na fotossíntese visto que esta tem capacidade de captar a energia solar e transformar em energia química e depois a produção de compostos orgânicos que servirão para o seu metabolismo. As folhas da Trichillia Emetica (mafureira) quando submetidas ao tratamento luz e sombra é que apresentavam amido e as folhas de Citrus limon (limaoeiro) tanto no tratamento luz, quanto no tratamento escuro não evidenciou a substância de reserva, ou seja não evidenciou o amido. Nessa experiência observa se nas duas espécies que a Clorofila exerce efeito sobre a fotossíntese, verifica-se que a sua presença em maior ou menor quantidade serve como indicador para a taxa de realização fotossintetica. 8. Referências Bibliográficas · Canto, W., Hecktheuer, L. H. H., Liana, P. C. e Nivia, M. S. (2005). Clorofilas. Brasil. Universidade Federal Santa Maria. · Godvinje, J., Coleman, W. J. (1990). How plants make oxygen. Sci. Am. Editor. · Grazioli, A., Mendonca, E., Maito, E., Petroff, F. e Andrade, L. (2014). Extração da Clorofila. Brasil. Universidade federal do Pampa-UNIPAMPA Campus Bagé · Hopkins, W. G. (2000). Introduction to Plant Physiology. 2ª edição. New York, Jonh Wiley & Sons · Nhamussa, R. (2007). Contribuição no Estudo para a Otimização no Processso Tradicional de Produção de óleo de Triichillia emetica. [http://www.ebbah.com.br/contente/ABAAAJ5vUAI/contribuicao-no-estudo-optimizacao-processo-tradicional-producao-oleo-trichilia-emetica?part=3] (Agosto, 2007). Consultado a 03 de Novembro de 2017 · Nitscke, W., Rutherford, A. W. (1991). Photosynthetic reaction centres: variations on a common structural theme. Trends Biochem. Sci. Editor. · Prisco, J. T. (1989). Fotossíntese e Fotorespiração. Fortaleza, CE editora. · Silva Jr., C. e Sasson, S. (2007). Biologia. 4a edição reformulada, Editora Saraiva, São Paulo, Brasil. · Vilarins, R. (2011). 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