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Introdução: O hemograma é útil para avaliação quantitativa e qualitativa dos elementos do sangue. Após o processo de centrifugação, temos a presença de plasma, plaquetas (células brancas) e as hemácias. O hemograma completo divide-se em: eritrograma, leucograma, plaquetograma e dosagem de proteínas plasmáticas totais. Podem também ser realizados quando solicitados contagem de plaquetas, contagem de reticulócitos e dosagem de fibrinogênio. O hemograma é utilizado no diagnostico de: Anemias e Leucemias, Infecções, Policitemias (aumento de eritrócitos no sangue), e sintomas como fadiga, fraqueza e febre. É dividido em 3 partes conforme o enfoque. Vermelha, branca (leucócitos), plaquetária ✓ Eritrograma: É uma das etapas do hemograma e analisa alterações nos eritrócitos, hemoglobina, hematócrito, índices hematimétricos e morfologia eritrocitária O Eritrograma avalia as hemácias ✓ Leucograma: contagem total de leucócitos (leucometria) e estudo da morfologia (neutrófilos, eosinófilos, basófilos, linfócitos e monócitos) O Leucograma avalia os Leucócitos (células de defesa) ✓ Plaquetograma: estimativa do número de plaquetas e estudo da morfologia (total e PDW) Eritrograma: É a avaliação dos eritrócitos (ou célula vermelha) e compreende: • Contagem dos Eritrócitos • Dosagem da hemoglobina (avaliar se o animal tem ou não anemia) • Medição do volume globular ou hematócrito (é a % de hemácias no volume total de sangue) • Cálculo dos índices hematimétricos • Analise da formologia dos eritrócitos. Índices hematimetricos: VCM: (volume corpuscular médio), avalia o tamanho das hemácias HCM: (hemoglobina corpuscular média), avalia a cor individualmente das hemácias CHCM: (Concentração da hemoglobina corpuscular media), avalia a média de concentração de hemoglobina na hemácia VHS: (velocidade de hemossedimentação), avalia o processo inflamatório. RDW: (Amplitude de Distribuição dos Glóbulos Vermelhos), avalia a variação de Eritrograma tamanho entre as hemácias, sendo essa variação chamada de Anisocitose. Os Eritrócitos são chamados de hemácias ou glóbulos vermelhos, possuem tamanhos e vida média variável de acordo com a espécie animal. A membrana dos eritrócitos é composta por duas camadas proteicas e uma camada lipídica (colesterol) Eritron é o conjunto de todos os eritrócitos circulantes e seus precursores nucleados nos tecidos hematopoiéticos. Características dos Eritrócitos: Pode ser feita por observação microscópica de um esfregaço de sangue corado com Giemsa, Wright, Leishmann ou Panótico Rápido. Permite a avaliação de características morfológicas dos eritrócitos, como: tamanho, cor e forma Essas características são viáveis as diferentes espécies animais. Tamanho: Normalmente, deve ser observada uma monocamada delgada de eritrócitos (tapete de células), com padrão de tamanho constante, uniforme e sem variação. Macrocitose: Presença de eritrócitos de tamanho acima do normal (macrócitos), presença de reticulócitos e metarrubrícitos Microcitose: presença de eritrócitos abaixo do tamanho normal (micrócitos), aparece em anemias crônicas, anemia ferropriva. Anisocitose (RDW): presença de eritrócitos de diversos tamanhos num mesmo esfregaço sanguíneo Normocitose: Hemácias do tamanho normal. Cor: Os eritrócitos coram-se de róseo, vermelho claro ou alaranjado, como resultado da afinidade da hemoglobina pela eosina (corante ácido), apresentando uma área central mais clara. (o meio da hemácia não cora) Hipocromia: Diminuição da intensidade da cor dos eritrócitos, devido à diminuição de hemoglobina. Hipercromia: É o aumento da intensidade da cor das hemácias, devido ao aumento da concentração de hemoglobina. EX: Esferocitose (a membrana da hemácia diminui e a quantidade de hemoglobina continua a mesma. Policromasia: Variações na coloração característica dos eritrócitos. Normocromia: Coloração normal das hemácias Forma: Os eritrócitos dos mamíferos são células anucleadas, redondas, bicôncavas (discócito); as hemácias das aves são ovais e nucleadas Poiquilocitose: Presença de eritrócitos de diferentes tamanhos no mesmo esfregaço. Esferócitos: Eritrócitos esféricos, diâmetro reduzido, sem a área central pálida característica. Ex: anemias auto-imune Equisócitos: Eritrócitos deformados ou fragmentados. Ex: doenças renais crônicas, doenças esplênicas, anemias ferropriva. Equinócitos: eritrócitos estrelados, seu aparecimento não tem significado clínico. Codócitos: eritrócito com área central densa de hemoglobina separada parcial ou completamente por uma área circular clara. Ex: aumento dos níveis de colesterol Acantócitos: Eritrócito de forma irregular, com projeções de dimensões variáveis na superfície. Ex: aumento dos níveis de colesterol, e ou fosfolipídios. Reticulócitos: eritrócitos jovens que não completaram a fase de maturação. Ex: em animais normais, 1 a 2% dos eritrócitos circulantes são reticulócitos; na resposta a uma anemia, o percentual aumenta. Cães e gatos com anemias apresentam elevada reticulocitose. Metarrubrícitos: último estágio nucleado das hemácias (fase anterior a de reticulócitos). Ocasionalmente podem aparecer em baixos números (1 para cada 100 leucócitos) ou altos níveis, em caso de resposta intensa a anemias graves ou problemas esplênicos. Corpúsculos de inclusão: Nas hemácias apresentamos alguns corpúsculos, como: Corpúsculos de Howell-Jolly: pontos basofílicos, quase negros, periféricos, formados por restos nucleares que ficam no citoplasma. Ex: anemias regenerativas ou doenças esplênicas apresenta níveis elevados. Corpúsculos de Lentz: inclusões de tamanhos variáveis, com coloração variando do cinza pálido até rosa forte. Ex: casos de cinomose canina (patognomônico para esta doença). Corpúsculos de Heinz: formações de hemoglobina desnaturada e precipitada, formato arredondado e pequeno. Pode aumentar pelo uso de fenotiazina (equinos sensíveis e gatos muito sensíveis), couve e cebola pode provocar o aparecimento. Ponteado Basófilo: Pequenos pontos basofílicos no interior das hemácias, devido intensa eritropoiese ou intoxicação por chumbo. Outras alterações dos Eritrócitos: Rouleaux: disposição dos eritrócitos em forma de pilha de moedas. Aparece em casos de inflamação e desidratação. Aglutinação: hemácias agrupadas, formando grumos. Pode indicar anemia imuno-mediada. Hemoparasitas: podem ser observados no exame de esfregaço de sangue corado, como: riquétsias, protozoários (Babesia, Plasmodium e Tripanossoma) e larvas de helmintos. Numero dos Eritrócitos: O número de eritrócitos no sangue dos animais domésticos varia conforme a espécie e está estreitamente relacionado com o tamanho. Assim, animais como caprinos e ovinos que possuem eritrócitos menores que a maioria das espécies, chegam a possuir mais que o dobro de eritrócitos circulantes que a espécie canina, pois o tamanho também equivale ao dobro. Alguns fatores fisiológicos podem influenciar o númerode eritrócitos circulantes, como: Idade: animais recém nascidos possuem maior número que adultos. Sexo: machos possuem 5 a 10 % mais eritrócitos que fêmeas. Capacidade de trabalho: atividade física intensa aumenta o número de eritrócitos circulantes. Raça: em equinos, os Puro Sangue Inglês (PSI), possuem maior número de eritrócitos que as demais raças. Altitude: animais que vivem em regiões de altas altitudes, onde a pressão de oxigênio é mais baixa, possuem maior número de eritrócitos circulantes. Alimentação: animais com deficiente alimentação, principalmente com carências vitamínicas, ocorrem alterações na produção de eritrócitos, refletindo-se na diminuição do número de eritrócitos. Métodos de contagem de Eritrócitos: Técnica manual: eritrócitos contados através da câmara de Neubauer; contar os eritrócitos dos vértices e um central. Resultado multiplicado por 10.000/µl ou mm³ Técnica eletrônica: método mais preciso e mais rápido. A maioria dos contadores eletrônicos deve ser calibrado para a espécie animal, devido a diferença de tamanho dos eritrócitos. Se for um laboratório de análises clínicas humano, as amostras de caninos poderão ser processadas no contador automático e as demais a hematimetria será manual. Dosagem de Hemoglobina: A hemoglobina tem como principal função o transporte de oxigênio e gás carbônico. É encontrada livre no plasma só quando houver hemólise. A diluição de 20µl de sangue com 4 ml de reativo de Drabkin. Conversão da hemoglobina em cianometahemoglobina A leitura é feita em espectrofotômetro. E os Valores expressos em g% ou g/dl, variando de 8 a 16 nas diferentes espécies. Dosagem de Hematócrito Mede a porcentagem de hemácias num volume total de sangue. Essa dosagem é realizada por meio de centrifugação, onde colocamos o sangue em um capilar, o fechamos e colocamos ele na centrifuga por mais ou menos uns 10 minutos. Assim que esse processo acabar teremos a separação do sangue com o plasma, e analisamos por uma tabelinha que colocamos o capilar e vemos as % de hematócrito no sangue. Dosagem de proteínas totais Após a leitura do microhematócrito, quebra-se o tubo (capilar) acima do limite das células sedimentadas (considera o plasma) Verte-se o plasma no refratômetro e visualiza o limite entre parte clara e escura. Geralmente fazemos a análise de proteínas totais depois da realização do hematócrito. Relação entre hematócrito e proteínas totais: Dosagem de fibrinogênio: Uma das proteínas de reação de fase aguda da inflamação, produzida pelo fígado. A leitura é feita com o refratômetro. Através de 2 tubos de micro hematócrito, o primeiro lido no refratômetro após a centrifugação, e o segundo aquecido em banho maria e, após a centrifugação, lido também no refratômetro. Hematócrito aumentado, PPT aumentado = desidratação Hematócrito aumentado, PPT normal = problemas no baço, hipoproteinemia Hematócrito normal, PPT aumentado = anemia, aumento de globulinas Hematócrito normal, PPT normal = normal Hematócrito normal, PPT diminuído = elevada perda proteica, produção diminuída Hematócrito diminuído, PPT aumentado = anemia com desidratação Hematócrito diminuído, PPT normal = hemácia destruída, eritropoiese diminuída Hematócrito diminuído, PPT diminuído = perda de sangue
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