experimento 7 - BioQuímica enzimas

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Aula prática adaptada - 6 
01. Introdução 
Dentre os fatores que podem provocar alterações na atividade enzimática, a 
temperatura pode ser destacado como o mais importante. Conforme discutido anteriormente, 
para desempenhar sua função biológica, as proteínas devem estar em seus estados nativos, 
com suas estruturas primária, secundária, terciária e, quando for o caso, quaternária, 
íntegras. O calor é um dos fatores que podem destruir essa integridade, provocando o 
fenômeno conhecido como desnaturação proteica. As enzimas, como proteínas, também 
estão sujeitas a esse processo, que podem ocasionar a perda, algumas vezes reversível, de 
atividade. 
As enzimas também sofrem influência de substâncias que podem atuar ativando ou 
inibindo sua atividade. A essas substâncias denominam-se ativadores e inibidores 
enzimáticos, respectivamente. Os inibidores enzimáticos são substâncias que diminuem a 
atividade da enzima, de maneira reversível ou irreversível, por mecanismos que não 
envolvem a desnaturação da mesma. 
Dentre os inibidores reversíveis: inibidores competitivos: quase sempre possuem 
estrutura molecular semelhante à do substrato, competindo com ele pelo sítio ativo da 
enzima. Assim, em geral, a reação não ocorre enquanto o inibidor estiver ligado à enzima. 
-inibidores não competitivos: ligam-se a sítios distintos do substrato. Assim, é possível 
ligação simultânea do inibidor e do substrato à enzima. Porém, a enzima é inativada na 
presença do inibidor, estando o substrato ligado ou não. 
Quanto aos inibidores irreversíveis, esses combinam-se com um grupo funcional 
pertencente à molécula da enzima, e que seja essencial para a atividade da mesma. Esse 
tipo de inibidor pode, inclusive, promover a destruição desse grupo. 
 
02. OBJETIVO 
- reconhecer a ação de fatores externos, como a temperatura e substâncias químicas, sobre 
a atividade enzimática; 
 
03. ROTEIRO E EXPERIMENTO 
Efeito da temperatura na atividade enzimática 
Conforme descrito na prática "Extração e caracterização de enzimas", as batatas também 
apresentam a enzima polifenoloxidase, responsável pelo escurecimento desse vegetal quando 
cortado e exposto ao ar. Conforme discutido, essa enzima promove a oxidação dos o-difenóis (do 
qual o catecol é o exemplo mais comum), originando as quinonas, responsáveis pelo 
desenvolvimento da coloração escura. 
Para verificar o efeito da temperatura sobre a atividade enzimática, pode-se utilizar um 
procedimento bastante simples: 
1. Lave e descasque uma batata de tamanho médio; 
2. corte 6 cubos e faça pequenas escavações no meio deles, de maneira a formar pequenos 
"pocinhos"; 
3. submeta os cubos aos seguintes tratamento: 
 
INSTITUTO FEDERAL DE MATO GROSSO DO SUL - IFMS 
Coxim - MS, / / 2021 
Professor: Me. Aline Herrero Tófoli 
Aluno (a): Eng de Pesca 
http://www.fcfar.unesp.br/alimentos/bioquimica/introducao_proteinas/introducao_proteinas_quatro.htm
http://www.fcfar.unesp.br/alimentos/bioquimica/praticas_proteinas/enzimas.htm
http://www.fcfar.unesp.br/alimentos/bioquimica/praticas_proteinas/enzimas.htm
(1) manter à temperatura ambiente; 
(2) ferver por 1 minuto; 
(3) ferver por dois minutos; 
(4) ferver por três minutos; 
(5) ferver por quatro minutos; 
(6) ferver por cinco minutos; 
 
4. em cada um dos cubos goteje, igualmente, solução de catecol 0,1M; 
5. observe os resultados. 
04. RESULTADOS 
 
 
 
05. O QUE ENTREGAR A PROFESSORA: 
a. Com base nos seus conhecimentos sobre as enzimas e sua atividade, como você poderia 
explicar o resultado observado acima? (use o google e o conhecimento de nossas aulas, 
além dos livros de bioquímica disponíveis na BV Pearson) 
 
06. BIBLIOGRAFIA 
- [1] SOUZA, K. A. F. D., NEVES, V. A. Experimentos de bioquímica. Disponível em: < 
http://www.fcfar.unesp.br/alimentos/bioquimica/praticas_proteinas/atividade_enzimatica.htm>.