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Parasitologia Clínica 
 Roteiro de Aprendizagem – Ensino remoto emergencial - 2020 
_____________________________________________________________________________ ANNA JULIA LOPES MENDES 2018089702
Método Direto, Método de Hoffman, Pons e Janer (HPJ) ou de Lutz – Identificação de Ascaris lumbricoides
ATENÇÃO: NA PARTE ESCRITA, PREENCHA SEU ROTEIRO USANDO A COR AZUL
SUPORTE: Assista primeiro às videoaulas “Método direto e HPJ” e “Identificação de Ascaris”
1. Demonstração do método direto. 
 a) Esquematize o método, com desenhos e descrição escrita simplificada. (você pode desenhar a lápis, fotografar e inserir a imagem ou esquematizar com ferramentas de desenhos e formas). Não se esqueça de listar os materiais necessários. 
Materiais utilizados: Solução salina, pauster, lâmina, lamínula, amostra com fezes, microscópio e palito de madeira, lugol.
 
 b) Qual a indicação do método direto?
É indicado para visualização direta de trofozoários e cistos na lâmina.
2. Execução do método de HPJ
	b) Leia as instruções para a execução do HPJ e destaque, no texto, todos os materiais que serão usados. 
a. Colocar aproximadamente 2 g de fezes em um copo plástico descartável (ou frasco de Borrel), acrescentar cerca de 5 mL de água e com um palito de madeira (ou bastão de vidro), desfazer o bolo fecal.
b. Acrescentar mais água (cerca de 20 mL) e homogeneizar.
c. Filtrar a suspensão de fezes em gaze dobrada em quatro, diretamente no cálice de sedimentação (de 200 mL, fundo cônico). Lavar os detritos da gaze com água destilada, recolhendo o líquido no mesmo cálice.
d. Completar o volume do cálice com água.
e. Manter a suspensão em repouso por 2 a 24 horas.
f. Se o líquido sobrenadante estiver muito turvo, pode-se descarta-lo cuidadosamente no vaso sanitário e ressuspender o sedimento em água novamente, deixando em repouso mais 60 minutos.
g. Se o líquido sobrenadante estiver satisfatoriamente límpido, colher o sedimento para exame, o que pode ser realizado pelas seguintes técnicas:
· Introduzir uma pipeta obliterada pelo dedo indicador até o sedimento contido no fundo do cálice, retirar o dedo e deixar subir uma pequena porção do sedimento. Recolocar o dedo e retirar a pipeta;
· Desprezar o líquido sobrenadante cuidadosamente, homogeneizar o sedimento e colher uma gota do mesmo com a pipeta.
	h. Colocar parte do sedimento numa lâmina, colocar uma gota de lugol e cobrir com a lamínula. Examinar, com a objetiva de 10X. Ao observar uma estrutura suspeita, visualizar com as objetivas de 20X e/ou 40X, retornando à de 10X para continuar a varredura da lâmina. Deve-se examinar, no mínimo, duas lâminas de cada amostra.
Preencha a tabela a seguir, inserindo: 
- Na segunda coluna as letras dos itens referentes aos procedimentos do HPJ descritos anteriormente.
- Na terceira coluna, descreva a finalidade ou “para quê” é feita essa etapa.
	ETAPA
	PROCEDIMENTOS
	FINALIDADE
	Dissolução
	São dissolvidos 2g de fezes com água.
	Dissolver as fezes em meio aquoso para que ele possa ser filtrado.
	Filtração
	O líquido contendo a amostra é passado pela gaze para filtrar partículas mais grosseiras
	Filtrar partículas maiores de alimentos não digeridos para que haja uma sedimentação.
	Sedimentação
	Espera de duas horas ou mais para ocorrer a sedimentação no final do copo. 
	Partículas maiores, inclusive parasitos se sedimentarão.
	Análise
	Pipetar o sedimento e coloca-lo na lâmina com lugol.
	A análise no microscópio permitirá encontrar elementos parasitários.
3. Faça uma comparação entre vantagens e desvantagens do método direto em relação ao HPJ.
O método direto possui baixa sensibilidade, visto que em sua execução não ocorre etapas de processamento e concentração do material e por isso ele não é adotado como um método de rotina geral. Já o HPJ, é um método de rotina geral pois há processamento e concentração da amostra. Suas desvantagens se encontram, pois ele possui menor sensibilidade para cistos de protozoários e também pode haver falsos negativos para estrongiloidiase.
4 Visualização de adultos de Ascaris lumbricoides
 a) Faça um desenho esquemático dos parasitos ADULTOS, usando uma barra de escala para indicar seu tamanho (você pode desenhar a lápis, fotografar e inserir a imagem ou esquematizar com ferramentas de desenhos e formas).
 b) Qual a quantidade aproximada de ovos que uma fêmea de A. lumbricoides pode produzir por dia? Explique a implicação desse fato na sensibilidade dos exames parasitológicos de fezes para esse parasito.
A fêmea de A. Lumbricoides possui um alto potencial biótico podendo produzir por dia cerca de 200 mil ovos, isso significa que métodos de sedimentação identificam facilmente esse helminto mesmo que haja baixa carga parasitária.
5 Visualização de ovos de Ascaris lumbricoides
 a) Faça um desenho esquemático do aspecto dos diferentes tipos de ovos. Use a prancha de ovos e cistos para esquematizar de acordo com o tamanho aproximado, usando a barra de medida como parâmetro. Aponte as estruturas principais e características de cada tipo de ovo. (você pode desenhar a lápis, fotografar e inserir a imagem ou esquematizar com ferramentas de desenhos e formas)
Obs: Dentre as atividades avaliativas da disciplina, está incluída a elaboração do Trabalho final “Banco de Imagens”. Pesquise imagens dos parasitos estudados nesse módulo e organize-as em arquivos pessoais, para facilitar a diagramação de seu trabalho. 
Estudo dirigido – Larva migrans visceral
MATERIAL DE SUPORTE: Artigo disponível na Plataforma Teams
1. Leia o artigo a seguir: “Carvalho et al, 2011. Toxocaríase: visceral larva migrans in children. Jornal de Pediatria, 87(2):100-108.”
“Como explicitado no texto, a toxocaríase é uma infecção causada por nematoides de hospedeiros animais. Ao infectar o ser humano, essas larvas migram sem evoluir e, portanto, sem atingir a fase adulta, como ocorre nos animais. Quando larvas de nematoides migram nos tecidos do ser humano sem evoluir causam uma síndrome conhecida como larva migrans. Os nematoides do gênero Toxocara, quando infectam acidentalmente o ser humano, causam larva migrans visceral.”
2. Quais são os hospedeiros naturais de Toxocara, que são, portanto reservatórios da infecção humana? 
O gato e o cachorro.
3. De que forma a parasitose se desenvolve nesses animais (infecção, forma infectante, habitat do adulto)?
O cão ingere o ovo embrionado, que aparece nas fezes de 4 a 5 semanas após a infecção. Há a ingestão da larva e tecidos de hospedeiros paratênicos (minhoca, formiga e outros invertebrados que habitam o solo. Há a migração transplacentária: a prevalência do T. canis nos filhotes é muito alta. Com isso, há a passagem da larva pelo leite da cadela que amamenta seus filhotes: presença de larvas no colostro é máxima durante a 2ª semana de lactação. Ingestão, pela cadela, de larvas do T. canis presentes nas fezes ou vômitos de filhotes, quando da higienização dos mesmos.
4. O desenvolvimento de Toxocara no animal reservatório apresenta similaridades e diferenças em relação ao ciclo de outro ascarídeo exclusivo do ser humano, Ascaris lumbricoides. Cite algumas similaridades e diferenças no ciclo entre esses dois parasitos.
A semelhança é que pode haver autoinfecção pelos dois e os ovos também são eliminados nas fezes. Porém com o Toxocara também há transmissão vertical, transplacentária e transmamária para os filhos. 
5. Quais os fatores de risco para aquisição da toxocaríase humana?
A infecção pode ser direta do contato de crianças ou adultos com as fezes dos filhotes canídeos. E indiretamente por contato direto com objetos contaminados com ovos.
6. Quais as formas de apresentação da toxocaríase no ser humano?
Larva migrans visceral sistêmica clássica: A doença é unilateral na maioria dos casos, com inflamação leve a moderada ou difusa. A apresentação clínica varia desde granuloma na periferia da retina. Um granuloma pode também ocorrer no nervo óptico. Ossinais clínicos mais comuns e os maiores causadores de perda de visão são inflamação vítrea, edema macular cistoide e tração de filamentos vítreo-retinianos em direção ao nervo óptico e/ou um granuloma.
Comprometimento visceral de outros sistemas, algumas crianças com hepatoesplenomegalia, etc.
7. Como é realizado o diagnóstico da toxocaríase humana?
A biópsia é o único método aceito para confirmar a presença de vermes ou larvas nos tecidos. Como esse procedimento possui um risco inerente, os investigadores pensaram em desenvolver um teste imunológico para o diagnóstico da toxocaríase.