Nutrição Bacteriana

Prévia do material em texto

Introdução 
• Finalidade p/ cultivo de bactérias: isolamento 
da amostra clínica, fazer com que se desenvolvam 
em condições artificiais tentando reproduzir o 
ambiente natural e promover sua multiplicação 
no laboratório, para que realize outros 
procedimentos/estudos e classificar as bactérias. 
• Fatores que afetam o crescimento bacteriano: 
 ✓ Nutrientes 
✓ Oxigênio 
✓ Temperatura 
✓ pH 
✓ Disponibilidade de água (Aa) 
✓ Pressão osmótica 
 
Meios de cultura 
Mistura de nutrientes requeridos para a 
sobrevivência e crescimento microbiano em um 
sistema artificial. 
Nutrientes 
• Altos teores: composição de estruturas 
próprias e produção de compostos orgânicos. 
Exs: água, carbono, hidrogênio e nitrogênio. 
• Teores médios: fazem parte do papel biológico. 
Exs: Fósforo, enxofre, sódio, potássio, cálcio e 
magnésio. 
• Elementos Traço: são elementos exigidos em 
pequenas quantidades. 
Exs: Manganês, zinco e cobre. As bactérias se 
nutrem por absorção, selecionando através de 
suas membranas ou paredes. 
 
 
 
 
 
Classificação dos meios de 
cultura 
Mistura de nutrientes requeridos para a 
sobrevivência e crescimento/cultura microbiano 
em um sistema artificial. 
OBS.: quando se fala em crescimento bacteriano, não 
nos referimos ao tamanho e sim no crescimento 
populacional! 
1. QUANTO A COMPOSIÇÃO 
 ✓ MEIOS SINTÉTICOS OU DEFINIDOS: a composição 
em relação quantidade e a diversidade de nutrientes é 
precisa, ou seja, saber exatamente quanto e quais 
nutrientes entram na composição nesse meio de 
cultura. 
 
 
✓ MEIOS COMPLEXOS: possuem na sua composição, 
extratos protéicos ou polissacarídecos na qual não se 
tem uma concentração exata de aminoácidos ou 
açucares que entram nessa composição específica, e 
com isso, compromete a qualidade deste meio do 
ponto de vista de atender as necessidades de 
determinadas bactérias. 
 
Desvantagem: existem bactérias que só se consegue 
isolar com meios de cultura sintéticos/específicos 
para determinada bactéria conseguir se reproduzir. 
 
 
Nutrição Bacteriana 
Vantagem: usa esse meio 
para uma bactéria que seja 
mais exigente da 
quantidade exata para que 
ela se prolifere. 
Desvantagem: custos. Esses 
meios são mais caros do que 
os meios complexos. 
 
Vantagem: esses 
meios são mais 
baratos e mais 
utilizados nas rotinas 
laboratoriais. 
 
2. QUANTO AO ESTADO FÍSICO (CONSISTÊNCIA) 
MEIOS LÍQUIDOS: caldo. Manipulados em tubos de 
ensaio 
 
 
MEIOS SÓLIDOS : ÁGAR (1,5 - 2,0%). 
Concentração de gramas por 100ml de volume de 
meio de cultura. Quando tem 1,5 a 2,0 gramas para 
cada 100ml de meio de cultura, significa que está 
diante de um meio sólido. Concentração mais baixa, é 
 
 
MEIOS SEMISSÓLIDOS : ÁGAR (0,1 – 1,1%) 
 
 
coluna do tubo; isso significa que essas bactérias se 
espalharam por aquele meio semissólido e permitiu a 
turvação. E quando é imóvel, só cresce onde há a 
picada da agulha (inoculação central). 
 
Meios em que sua composição há 
presença do Ágar 
 
• Agente solidificante. 
• A maioria dos microrganismos é incapaz de 
degradar. 
• Não inibe as bactérias, torna a superfície úmida 
para o crescimento. 
• Obtidos das algas rodofíceas (Gelidium spp., 
Gracilaria spp.) 
• As fibras são formadas por duas cadeias 
polissacarídicas: agarose e agaropectina. 
• Apresentação em pó ou em rama. 
• Ponto de fusão: 100ºC 
• Ponto de solidificação: 40ºC 
 
Classificação dos meios de 
cultura 
 
• QUANTO AO USO OU FINALIDADE: 
 
✓ MEIO BÁSICO – quantidade mínimas de 
nutrientes para o crescimento de um 
microrganismo. Usa-se Ágar simples 
Ex: pra fazer análise da qualidade higiênico 
sanitário de um alimento... 
 
✓ MEIO DE ENRIQUECIMENTO - contém 
nutrientes que favorecerão o crescimento de um 
grupo específico de microrganismos. Para 
bactérias mais exigentes. 
Exs: Ágar sangue, Caldo BHI (infusão cérebro e 
coração). 
 
✓ MEIO SELETIVO - contém substâncias que 
inibirão os microrganismos indesejáveis, e de 
forma indireta, favorecem os de interesse. 
Mesmo que as bactérias indesejáveis pudessem 
utilizar os nutrientes, uma vez que são inibidas a 
competição por esses nutrientes será reduzida, 
então indiretamente esse meio favorece outro 
grupo de forma indireta. 
Exs: Ágar sal manitol vermelho de fenol, Ágar 
azida 
 
Porque o meio ágar sal manitol vermelho de fenol é 
considerado um meio seletivo para Staphylococcus? 
Porque tem na sua composição o sal (cloreto de sódio 
NaCl), mas não bastasse só a presença do sal que é 
importante para regular a pressão osmótica do meio 
de cultura, nesse meio seletivo para o staphylo, a 
concentração desse sal é muito elevada. Costumamos 
usar 0,5% de NaCl em 100ml de meio de cultura, e 
nesse meio, a concentração de sal chega a 7,5%. Isso 
porque o staphylo tolera a alta concentração de sódio, 
é uma bactéria que vive na superfície da pele (maior 
concentração da sudorese). 
“gelatina” 
Usado para testes bioquímicos de 
identificação bacteriano, porque 
esse meio permite multiplicação 
mais rápida das bactérias. 
Observa-se colônias. Meio de 
isolamento primário, usados p/ 
isolar bactérias. Pegando a 
amostra clínica, retira um 
fragmento e transferir p/ essa 
placa de petri (imagem ao lado). 
Usados p/ teste de motilidade. No 
tubo a esquerda tem bactéria 
imóvel, e o tubo a direta uma 
bactéria móvel porque foi feito 
uma inoculação (isolamento) com 
agulha no centro do tubo, e quando 
o crescimento turva em toda a 
 
✓ MEIO DIFERENCIAL - permite que uma bactéria 
produza estruturas ou reações que podem ser 
utilizados em sua diferenciação, ou seja, o 
aspecto da colônia ou algum acordo/alteração no 
meio de cultura para tornar diferente a 
característica da tal colônia. 
 
Ex: Ágar EMB (Eosina-Azul de Metileno) 
 
Exemplos de meio seletivos e 
diferenciais: 
 
 
 
 
 
 Ágar sangue 
 
• meio de cultura complexo: porque entra 
na sua composição a presença de 
peptonas, extratos de proteínas de origem 
muscular e fazem com que não tenha 
precisão da composição de aminoácidos e 
de peptídeos que possuem desse mesmo 
meio. 
• Enriquecido: como o próprio nome já diz, 
por causa do sangue que é uma fonte de 
vitaminas e de outros fatores de 
crescimentos essenciais p/ maior parte 
das bactérias; 
• Diferencial: hemólise 
• não seletivo: não tem na sua composição 
nenhuma substância que iniba 
crescimento de bactérias. 
 
 Qual diferença? 
 Staphyl x Strepto 
 
A diferença não está na cor vermelha e sim no 
clareamento ao redor da colônia, classificando 
como alfa, beta ou gama. 
Gama – “gama hemolítico” é de uma bactéria que 
não faz hemólise, não provoca alteração no meio 
de cultura; 
Beta – bactéria que causa hemólise completa no 
sangue, ao redor da colônia; 
Alfa – hemólise incompleta, zona esverdeada em 
volta da colônia. 
 
Etapas do preparo de meios de cultura 
 
 
 
 
▪ Ágar Sangue