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RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS: MICROBIOLOGIA E IMUNOLOGIA – aula 1 NOME: Lizandra Luiza Lopes França MATRÍCULA: 01084049 CURSO: Farmácia POLO: Boa Viagem PROFESSOR(A) ORIENTADOR(A): Karla Raisa / Maria Clara TEMA DE AULA: INTRODUÇÃO AO LABORATÓRIO DE MICROBIOLOGIA 1. Identificar os riscos em um laboratório de microbiologia e exemplificá-los; De acordo com HIRATA & MANCINI FILHO (2002), os riscos estão classificados em: de acidente, exemplo- piso escorregadio; ergonômicos, exemplo- esforço repetitivo(LER); físicos, tais como: por contato pela pele e mucosas ou absorvidas por ingestão; e rico biológicos, abrange a manipulação dos agentes e materiais biológicos, exemplo: vírus. 2. Identificar os equipamentos de proteção individual (EPI’s) e as técnicas assépticas; Epi 's - Óculos de segurança, protetores faciais, luvas e/ou mangas de proteção, calçado de proteção impermeável, solado liso e antiderrapante, jalecos, aventais e macacões, equipamentos de proteção respiratória. Técnicas assépticas: Lavar bem as mãos, limpar bem o local de trabalho e limpar e esterilizar todos os utensílios. 3. Identificar as principais funções dos itens listados abaixo laboratório de microbiologia: Vidrarias Função Placa de Petri Recipiente com formato cilíndrico e achatado, sua função é auxiliar principalmente alguns procedimentos como, cultura de microrganismos. Balão volumétrico É um frasco utilizado na preparação e diluição de soluções com volumes precisos e pré-fixados. Bastão de vidro bastão feito de vidro, agitar substâncias e facilitar a homogeneização. Tubo de Durham São tubos de vidro pequenos e cilíndricos. Servem para captar o gás formado em uma fermentação. Becker É um tipo de recipiente, sua função é trabalhar com líquidos, preparo de soluções, aquecimento de líquidos e etc. Pipeta Sua função principal é transportar quantidades precisas de material líquido. Lâmina de microscopia É um pequeno retângulo de vidro transparente que é utilizado para depositar amostras observadas no microscópio. Tubo de ensaio São recipientes de vidro alongados e cilíndricos, usados em experiências com pouco volume. Equipamentos Função Microscópio A função do microscópio óptico é de criar uma imagem ampliada.. Estufa de secagem Remover a umidade da câmara do forno para secar as amostras o mais rápido possível. Estufa de esterilização Aquecimento, cozimento, evaporação, esterilização e outras funções de laboratório industrial. pHmetro Realizar a calibração interna de pH de uma amostra. Balança analítica É utilizada principalmente em determinação de massas em análises químicas, determinação de quantidade absoluta ou relativa de um ou mais amostras. Autoclave É um tipo de tanque aquecido em alta temperatura, hermeticamente fechado, usado para processos químicos. Lamparina Consiste num reservatório que aquece em pequenas proporções análises que requerem pouco calor. Estufa de incubação Sua função é propiciar um ambiente ideal para o crescimento bacteriano, mantendo a temperatura constante e precisa. Alça de Drigalski Indicado para espalhar suspensões de microrganismos na Placa de Petri contendo meio de cultura sólido. Meios de cultura e reagentes Função / utilização Agar É um solidificante que é usado no preparo dos meios de cultura, que quando adicionado a um caldo nutriente, forma um meio de cultura. Peptona É um hidrolisado enzimático de carne que fornece uma solução aquosa muito estável, límpida e incolor. É utilizada na preparação de meios de cultura como uma fonte facilmente disponível para o crescimento de bactérias. Dextrose é um açúcar, mais especificamente, um carboidrato simples. Portanto, sua principal função é reter energia ao organismo, causando aumento da glicose. Azul de metileno É um corante utilizado como reagente na química e biologia, e sua função é identificar certas estruturas da bactéria. Cloreto de sódio Substância inorgânica que pertence a função química dos sais. Tem como característica a Dissociação e sabor salgado. Etanol Álcool etílico-utilizado na esterilização dos meios, materiais de vidro ou metais e soluções. Materiais Função Papel filtro O papel de filtro utilizado em funis de Büchner, para filtrações por pressão reduzida. É usado para separar substâncias finas de líquidos ou ar. Algodão Faz-se o uso do algodão, com o tampão para o Erlenmeyer, para higienização, etc. Pinça Utilizada para pinçar objetos, evitando o contato direto das mãos no meio de cultura. Bisturi Utilizado para abrir amostra lacrada sem precisar do contato do conteúdo com as mãos. Swab Usado para a coleta de amostra estéril. TEMA DE AULA: PREPARAÇÃO DE MEIOS DE CULTURA 1. Definir meios de cultura; Meios de cultura são composições de substâncias que fornecem nutrientes necessários para o desenvolvimento de microrganismos. Sendo favorecido o crescimento, é possível a identificação desses organismos através das suas atividades bioquímica e metabólica . 2. Classificar os meios de cultura quanto: o estado físico, composição e a finalidade; · Estado físico: -Sólidos: contêm agentes solidificantes, principalmente ágar - formação de colônias. -Semissólidos: consistência intermediária de ágar - permite o crescimento dos mo em diferentes tensões de oxigênio, verificação da motilidade (visualizada pela turvação). -Líquidos ou caldos: sem agentes solidificantes - ativação de culturas, repiques e provas bioquímicas. · Composição: -Simples: permitem o crescimento bacteriano sem exigências especiais. Ex: caldos e ágar simples. -Especiais: quando cumprem exigências vitais de determinados organismos. Ex: ágar sangue. · Finalidade: · Meios de pré-enriquecimento: permitem a dessensibilização de microrganismos que sofrem algum tipo de tratamento (térmico ou químico). Ex: água peptonada. · Meios de enriquecimento: proporcionam nutrientes adequados ao crescimento dos mo em baixo número ou baixo crescimento lento. Ex: caldo tetrationato. · Diferenciais: contêm substâncias que permitem estabelecer diferenças entre mo muito semelhantes. Ex: ágar MacConkey (enterobactérias). · Seletivos: contêm substâncias que inibem o desenvolvimento de determinados grupos de microrganismos, permitindo o crescimento de outros. Ex: Ágar Salmonella-Shigella ( SS). · Meios de triagem: avaliam determinadas atividades metabólicas permitindo caracterização e identificação presuntiva de muitos microrganismos. Ex: meio Instituto Adolfo Lutz. · Identificação: realização de provas bioquímicas e verificação de funções fisiológicas de organismos. Ex: ágar citrata. · Dosagem: determinação de vitaminas, antibióticos e aminoácidos. · Contagem: determinação quantitativa de população microbiana. Ex: ágar de contagem de placas. · Estocagem ou manutenção: garantem a viabilidade de microrganismos. Ex: ágar sabouraud. . Referências: HIRATA, M.H.; MANCINI FILHO, J.B. Manual de biossegurança. Barueri, SP: Manole, 2002. 495p. Brasil. Agência Nacional de Vigilância Sanitária. Segurança do paciente em serviços de saúde: limpeza e desinfecção de superfícies/Agência Nacional de Vigilância Sanitária. – Brasília: Anvisa, 2010. 116 p. Bier, O. Microbiologia e Imunologia. 24 ed São Paulo, Melhoramentos, 1985.
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