RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS 1 2021 - Bioquímica Humana - AULA 1 - Copia _5_

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RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS - EAD 
 
AULA 01 
 
DATA: 
 
21/08/2021 
VERSÃO:01 
 
 
RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS: BIOQUIMICA HUMANA – Aula 1 
 
DADOS DO(A) ALUNO(A): 
 
NOME: JUCIMARA OLIVEIRA BRITO MATRÍCULA: 04089082 
CURSO: Farmácia POLO: UNAMA SANTARÉM 
PROFESSOR(A) ORIENTADOR(A): Marcio Silva 
 
ORIENTAÇÕES GERAIS: 
• O relatório deve ser elaborado individualmente e deve ser escrito de forma clara e 
• concisa; 
• O relatório deve conter apenas 01 (uma) lauda por tema; 
• Fonte: Arial ou Times New Roman (Normal e Justificado); 
• Tamanho: 12; 
Margens: Superior 3 cm; Inferior: 2 cm; Esquerda: 3 cm; Direita: 2 cm; 
• Espaçamento entre linhas: simples; 
• Título: Arial ou Times New Roman (Negrito e Centralizado). 
 
 
TEMA DE AULA: ATIVIDADE CATALÍTICA DA AMILASE SALIVAR 
 
RELATÓRIO: 
 
1. Resumo sobre o tema abordado em aula. 
 
A amílase salivar é uma enzima que atua provocando a hidrólise do amido, um 
polissacarídeo muito abundante na alimentação, estando presente, sobretudo, em 
alimentos de origem vegetal, nos quais constitui a principal substância de 
armazenamento. Em termos funcionais, esta enzima é uma a (1-4) glicosídase, 
provocando a quebra da molécula de amido em dissacarídeos, nomeadamente, 
maltose, a qual, posteriormente, será simplificada a unidades de glicose, um 
monossacarídeo, por enzimas específicas no duodeno. A glicose é o principal 
substracto energético das células. A amílase salivar apenas atua em situações de pH 
próximo da neutralidade, motivo pelo qual o pH da boca varia entre os 6 e os 7.4. A sua 
ação prolonga-se mesmo no decurso do processo de deglutição, até à chegada ao 
estômago, onde é inativada pelo pH ácido do suco gástrico. Mau grado a ação da a- 
amílase, a ação enzimática na cavidade bucal tem pouca expressão no processo 
digestivo, devido ao pouco tempo de contacto entre as enzimas presentes na saliva e o 
alimento neste local. Uma mastigação lenta e persistente permite uma degradação mais 
efetiva do amido na boca, permitindo um aproveitamento mais eficaz deste nutriente. O 
amido não digerido pela amílase salivar apenas será transformado, posteriormente, ao 
nível do duodeno, por ação da amílase pancreática. 
 
 
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2. Materiais utilizados. 
 
- Reagentes: 
Solução Lugol; 
Solução Amido de 1% 
Solução de HCL 1:2 
Solução Salina a 0,95% 
 
- Vidrarias: 
Pipeta de vidro 1 ml 
Tubos de ensaio 
 
-Equipamentos: 
Estante para tubos de ensaio 
Pêra de borracha 
Papel toalha 
Descarte para pipetas 
Frasco com água destilada 
Banho maria 
Termômetro 
Cronometro 
Pinça 
 
3. Responda as Perguntas: 
 
A) Qual a composição do amido? 
 
O amido é um polissacarídeo formado pela união de moléculas de α-glicose da 
amilose e da amilopectina, sendo armazenado em diferentes órgãos vegetais. 
 
B) Comente os resultados obtidos nos tubos 1, 2 e 3 no procedimento da hidrólise química 
do amido. 
 
O resultado da amostra AA1 a mistura de água destilada com lugol ficou verde 
Amarelado. AA2 a mistura ficou Roxa. AA3 a mistura ficou marrom 
 
C) Qual o objetivo do uso de HCl, aquecimento e resfriamento no procedimento da 
hidrólise química do amido? 
 
Observar a coloração, verificar quanto mais tempo no fogo mais pigmentado fica. 
 
D) Descreva a sequência de transformações operadas pela amilase na molécula da 
amilose. 
 
Polímero linear, com cerca de 200 moléculas de glicose em sua estrutura. 
 
E) Comente os resultados obtidos nos tubos 1, 2 e 3 no procedimento da hidrólise 
enzimática do amido. 
 
Esse teste representa a presença de carboidratos 
AA4 5ml(H2O) + 5ml de (sol)gts lugol 
AA5 5ml(H2O) + 5ml de (sol) 10 min banho maria 
AA5 5ml(H2O) + 5ml de (sol) 20 min banho maria 
AA4: amarelo 
AA5: azul 
 AA6 azul 
 
 
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F) Explique a relação entre a atividade da amilase salivar, o tempo de incubação da enzima 
com o amido e a variedade de cores observada no procedimento da hidrólise enzimática do 
amido. 
 
Atividade inicial da protease e amilase, respectivamente a estabilidade 
das enzimas com detergente tixan após 30 minutos de incubação. 
 
 
 
4. Conclusão sobre a atividade catalítica da amilase salivar. 
 
O desenvolvimento deste trabalho possibilitou conhecer algumas 
peculiaridades dos amidos modificados disponíveis no Brasil 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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TEMA DE AULA: REAÇÃO DE SELIWANOFF (REAÇÃO PARA DISTINÇÃO ENTRE 
ALDOSES E CETOSES) 
 
 
RELATÓRIO: 
 
1. Resumo sobre o tema abordado em aula. 
 
 Essa prática segue os mesmos princípios teóricos que embasam a reação de 
Molisch, onde há formação de furfural e hidroximetilfurfural (HMF). A reação de 
Seliwanoff só diferencia-se da reação de Molisch nos reagentes utilizados: o ácido 
que causará a desidratação do carboidrato é o ácido clorídrico (HCl) e o fenol que 
reage como o furfural e HMF é o resorcinol. Esse teste permite diferenciar aldoses 
de cetoses porque a reação com a cetose é mais rápida e mais intensa. Isso porque 
a formação do furfural é mais fácil que a formação do hidroximetilfurfural. 
 
2. Materiais utilizados. 
 
Reagentes e soluções 
 - solução 0,1M de frutose 
 - solução 0,1M de glicose 
 - solução 0,1M de sacarose 
 - água destilada 
 - reagente de Seliwanoff * 
 Vidraria e instrumental 
 
- 04 tubos de ensaio 
- conta-gotas ou pipeta Pasteur 
- pipeta de 5 mL 
 
 
3. Responda as Perguntas: 
 
A) Explique o princípio bioquímico do teste de Seliwanoff. 
 
Este teste baseia-se no princípio de que, quando aquecidas, as cetoses sofrem 
desidratação muito mais rapidamente que as aldoses. 
 
B) Comente os resultados obtidos nos 3 tubos utilizados no procedimento, correlacionando 
com a presença ou não de aldoses e cetoses. 
 
Indentificar a presença de carboidratos 
 T1: branco, não contém 
T2: vermelho escuro, contém 
T3: vermelho médio, contém 
T4:vermelho claro, não contém 
 
 
C) Explique qual o objetivo de utilizar um tubo apenas com água destilada. 
 
Para atuar no controle. 
 
 
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D) Qual a função do ácido clorídrico (HCl) e da fervura aplicados no teste de Seliwanoff? 
 
A reação de Seliwanoff só diferencia-se da reação de Molisch nos reagentes 
utilizados: o ácido que causará a desidratação do carboidrato é o ácido clorídrico 
(HCl) e o fenol que reage como o furfural e HMF é o resorcinol. 
 
4. Conclusão sobre a identificação de aldoses e cetoses utilizando o teste de Seliwanoff. 
 
A reação positiva é caracterizada pelo aparecimento de coloração avermelhada, que 
indica a formação do complexo entre furfural ou HMF com o resorcinol e, 
conseqüentemente, indica presença de aldoses e cetoses. Como foi dito, a reação 
para cetoses é mais rápida e mais intensa do que para aldoses. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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TEMA DE AULA: PRECIPITAÇÃO POR ÁCIDOS FORTES E METAIS PESADOS 
 
 
RELATÓRIO: 
 
1. Resumo sobre o tema abordado em aula. 
 
Este procedimento é realizado para verificar a influência de sais de metais 
pesados e de ácidos fortes sobre a solubilidade da proteína, bem como 
a influência do pH sobre a carga líquida da molécula polipeptídica. Foi 
pipetado em um tubo de ensaio 1 ml da solução de proteínas. Em 
seguida adicionou-se 0,5 ml da solução de acetato de chumbo a 20% e 
5 ml de água destilada. O procedimento anterior foi repetido substituindo 
a solução de acetato de chumbo por ácido tricloroacético a 10%. 
 
 
2. Materiais utilizados. 
 
3. Responda as Perguntas: 
 
A) Comente os resultados obtidos no procedimentoda precipitação da ovoalbumina com 
ácido forte e metal pesado. 
 
Tubo1 a mistura ficou transparente. 
No tubo2,adicionamos 2ml da solução de ovoalbumina e 2 ml de 
ácido tricloroacético, obsevamos uma amostra branca e leitosa com aformação de 
precipitado. 
No tubo3 a mistura ficou um pouco leitosa e no tubo 4 não teve reação. 
 
B) Qual a fundamentação teórica que explica o processo de precipitação das proteínas 
com ácidos fortes e metais pesados? 
 
A precipitação abaixo do ponto isoelétrico através da adição de ácidos fortes. 
Comparando com o mecanismo anterior: quando a proteína está abaixo do seu 
pI, a carga líquida total da molécula é positiva. Isso facilita a interação da 
molécula com os ânions provenientes de ácidos como o tunguístico, o 
fosfotunguístico e pírico. 
 
 
C) O que ocorreu com a para que ela formasse um precipitado insolúvel neste 
experimento? 
 
Quando a reação química ocorre em meio aquoso com as espécies 
químicas dissociadas, pode ser representar esse tipo de reação por meio 
de equações e iônicas. 
 
4. Conclusão sobre a precipitação de proteínas por ácidos fortes e metais pesados. 
 
 
 
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No procedimento de precipitação por sais de metais pesados e por 
ácidos fortes, deve-se verificar o efeito destas substâncias sobre a 
solubilidade da proteína. Os cátions de metais pesados como Hg2+, Pb2+, Cu2+, 
Fe2+, Cd2+ e Zn2+ formam precipitados insolúveis de proteínas, denominados de 
acordo com o elemento formador (exemplo: proteinato de mercúrio, proteinato de 
chumbo, etc.). Essa precipitação é mais intensa quando o pH está acima do ponto 
isoelétrico (pI). Isso porque, acima do pI, a carga líquida sobre a proteína é 
negativa, favorecendo a interação com os cátions provenientes do sal. Quando a 
proteína está abaixo do seu pI, a carga líquida total da molécula é positiva. Isso 
facilita a interação da molécula com os ânions provenientes de ácidos como o 
tunguístico, o fosfotunguístico e pícrico. Nas duas situações o precipitado pode ser 
ressolubilizado através de alterações do pH. Verifica-se que na adição de sais de 
metais pesados como de ácidos orgânicos fortes ocorreram precipitação. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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TEMA DE AULA: PRECIPITAÇÃO FRACIONADA POR SOLUÇÕES SALINAS 
CONCENTRADAS 
 
 
RELATÓRIO: 
 
1. Resumo sobre o tema abordado em aula. 
 
Este é um processo importante para separação de proteínas uma vez 
que a concentração de sal necessária para precipitação é diferente para 
cada proteína. 
 
2. Materiais utilizados. 
 
Vidrarias: 
pipeta e tubos de ensaio. 
 
Reagentes: 
solução concentrada de sulfato de amônio (NH4)So4, solução ovoalbumina 
10% e hidromel 1%. 
 
Procedimentos: 
Tubo A: 2ml água destilada+(NH4)SO4 
Tubo B: 2mlovoalbumina+(NH4)SO4 
Tubo C: 2ml hidromel+(NH4)SO4 
Os líquidos devem ser misturados lentamente. 
 
3. Responda as Perguntas: 
 
A) O que é “Salting out”, “Salting in” e camada de solvatação? 
 
Salting out: cima / salting in: baixo / camada de solvatação: precipitação das 
proteínas. O efeito “salting out” é a precipitação de proteína em solução por altas 
concentrações de sais. Os sais atraem as moléculas de água do meio, de modo 
a ficar menos água disponível para as moléculas protéicas o que acarreta na 
diminuição da solubilidade e precipitação. Concentração reduzida de sal “Salting 
in” – solúvel. Diminui interação proteína-proteína (proteína- fica solúvel). 
 
B) Explique o princípio Bioquímico da precipitação de proteínas por adição de soluções 
salinas. 
 
Não se misturar 
 
C) Comente os resultados observados da precipitação da proteína por sulfato de amônio 
na presença e ausência da água, correlacionando com a solubilidade da proteína. 
 
Não teve a formação da bolha, foi adicionado glicose. Provavelmente o mel foi 
alterado. 
 
 
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3. Conclusão sobre a precipitação das proteínas por adição de sais neutros (soluções 
salinas concentradas). 
 
 
Precipitação de proteínas por adição de sais neutros (efeito da força iônica) Quando 
adicionamos sais neutros a uma solução, ocorre um aumento da força iônica 
(aumento da concentração de íons) do sistema. As moléculas de água, ocupadas 
em sua interação com os íons, deixam a estrutura protéica. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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TEMA DE AULA: REAÇÃO DE BENEDICT (IDENTIFICAÇÃO DE AÇÚCARES 
REDUTORES) 
 
 
RELATÓRIO: 
 
1. Resumo sobre o tema abordado em aula. 
 
Reação para identificar carboidratos redutores. Nas estruturas cíclicas dos 
monossacarídeos os átomos de carbono anoméricos(C1 nas aldoses e C2 nas 
cetoses) são susceptíveis de oxidação por vários agentes oxidantes contendo íons 
cúpricos (Cu2+) devido a presença de grupos aldeidos ou cetonas livres ou 
potencialmente livres. Na reação de Benedict os íons cúpricos são reduzidos pela 
carbolina dos carboidratos a íons cuprosos formando óxido cuproso que tem cor 
vermelho tijolo. Tal princípio é útil na análise de açúcares e, por muitos anos, foi 
utilizado na determinação dos níveis sanguíneos de glicose no sangue e na urina 
como diagnóstico da diabetes melito. Atualmente, há testes mais sensíveis para 
dosagem rápida da glicose, baseadas em ensaios enzimático (glicofita/glicose-
oxidase) e que são muito mais práticos, por não exigirem a disponibilidade dos 
reagentes mencionados. 
 
2. Materiais utilizados. 
 
Vidrarias: 
 pipeta de vidro, tubo de ensaio. 
Procedimento: 
T1 2,5ml H2O+2,5ml reagente Benedict 
T2 2,5ml glicose+ 2,5ml reagente Benedict 
T3 2,5ml sacarose+ 2,5ml de reagente Benedict 
T4 2,5ml sol amido+ 2,5 ml de reagente Benedict 
 Colocar em banho maria por 5 min. 
 
 
3. Responda as Perguntas: 
 
A) Qual a composição do Reativo de Benedict? 
 
Solutos: 
citrato de sódio (Na3C6H5O7), carbonato de sódio anidro (Na2CO3) e 
sulfato de cobre(CuSO4) Cristalizado. 
Solvente: 
água destilada (H2O). 
Procedimento: 
dissolver 85g de citrato de sódio e 50g de carbono de sódio anidro em 
cerca de 350ml de água quente. Dissolver à parte, em 50ml de água 
quente 0,5g de sulfato de cobre cristalizado. Tranferir lentamente, com 
agitação constante, a solução cùprica para a primeira. Completar o 
 
 
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VERSÃO:01 
 
volume com 500ml de água destilada, e filtrar se necessário. 
É um reagente químico de cor azulada, desenvolvido pelo químico 
americano Stanley Rossiter Benedict, geralmente usado para detectar a 
presença de açúcares e açúcares redutores, nos quais se incluem 
glicose, galactose, lactose, maltose e manose. O Reagente de Benedict 
consiste, basicamente, de uma solução de sulfato cúprico em meio 
alcalino (com muitos íons OH-); e pode ser preparado através do 
carbonato de sódio, citrato de sódio e sulfato cúprico. 
 
B) O que são açúcares redutores? 
Um açúcar redutor é qualquer açúcar capaz de atuar como agente redutor. Um 
agente redutor (também chamado de redutor ou redutor) é um elemento ou 
composto que perde (ou doa) um elétron para um receptor de elétrons (agente 
oxidante) em uma reação química redox. Um agente redutor é, portanto, oxidado 
quando perde elétrons na reação redox. Os agentes redutores reduzem (ou são 
oxidados por) agentes oxidantes. 
 
C) Explique a fundamentação teórica do Teste de identificação de açúcares redutores com 
o Reativo de Benedict. 
 
Esse teste faz a redução, identificar a glicose. 
 
D) Comente os resultados observados no experimento relacionando com a identificação de 
açúcares redutores. 
 
Tubo 1 (Glicose): A presença de um precipitado vermelho tijolo ou soluçãoamarelo- 
esverdeada indica a redução do cobre, possibilitando um resultado positivo. 
Tubo 2 (Sacarose): Não há mudança do reativo, a cor permanece azul, indicando 
resultado negativo. 
Tubo 3 (Água): Não há mudança do reativo, a cor permanece azul, indicando 
resultado negativo. 
 
E) Exemplifique algumas aplicações deste teste na área clínica. É um teste qualitativo ou 
quantitativo? 
 
Quantitativo. 
 
3. Conclusão sobre a identificação de açúcares redutores utilizando o Teste de Benedict. 
 
Os açúcares redutores reagem com os íons cúpricos da solução de Fehling, 
reduzindo-se a íons cuprosos, sob a ação do calor em meio alcalino. Ao reagir com 
os íons cúpricos, os açúcares sofrem oxidação, enquanto que o cobre é reduzido, 
formando-se um precipitado vermelho de óxido cuproso. Os açúcares não redutores 
 
 
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devem sofrer uma prévia hidrólise com ácido clorídrico dissociando o dissacarídeo 
em seus monossacarídeos.