extração de dna

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EXTRAÇÃO DE DNA DA DROSOPHILA
MELANOGASTER
U N I V E R S I D A D E
F E D E R A L D O R I O D E
J A N E I R O - U F R J
Nome: Aurenita Émile
DRE: 120169320
SUMÁRIO
RESUMO
MATERIAS E MÉTODOS
INTRODUÇÃO
BIBLIOGRAFIA
RESULTADO
UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO DE JANEIRO-UFRJ
01
DISCUSSÃO
04
03
02
05
04
UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO DE JANEIRO-UFRJ
RESUMO
 Dissertação sobre protocolo padrão para a extração de DNA (ácido dioxirribonucleico), a qual é usado em
diversas áreas, principalmente nos laboratórios de Biologia Molecular e Bioquímica. Comutantemente, o
processo de extração de DNA é um dos primeiros passos nas técnicas moleculares, sendo assim, existem
protocolos padrões para que esse processo seja feito devidamente correto. Por fim, a extração do DNA será
da espécie Droshophila melanogaste.
Palavras chaves: extração, DNA, protocolo, Drosophila melanogaster.
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INTRODUÇÃO
 O ácido dioxirribonucleico conhecido popularmente como DNA é uma molécula importante para o
funcionamento de um organismo, por exemplo, nos mamíferos a mesma é responsável por fornecer
instruções para organismo. Ademais, a mesma é importante para a ciência de modo geral, principalmente
para estudos moleculares, a qual vem se aperfeiçoando devido a essa molécula, como sabemos o DNA foi
descoberto em meados de 1869, pelo bioquímico suíço Johann Friedrich Miescher, em seguida, a sua
estrutura foi descoberta mais tarde pela cientista Rosalind Franklin que desempenhou um papel
revolucionário para o desenvolvimento de técnicas moleculares.
 A priori, essa descoberta promoveu um entendimento filogenético, a qual fornece descobertas evolutivas
avançada. Em vista, todo esse processo foi dado não apenas pela descoberta dessa molécula, mas também a
sua extração que adicionada em um banco de genes, visando que todo cientista com um computador e
conexão a internet podem ter acesso a esse banco. Assim, podendo analisar sequencias e comparar genes
para uso em pesquisas. Em virtude, todo esse conhecimento é utilizado para o desenvolvimento de novas
tecnologias como de medicamentos, vacinas e entre outros. Atualmente existem diversos protocolos padrões
para a extração de DNA como o uso de kits comerciais que são bastante usados, entretanto, é válido
ressaltar que esses kits não apresentam eficiência e seu custo beneficio é alto.
 Dessa forma, no relatório produzido será usado um protocolo padrão de extração de DNA de uma mosca
da espécie Drosophila melanogaster, o vídeo escolhido foi realizado pela Professora Maria Cristina Ariais
da Universidade de São Paulo- USP, exibido no portal de vídeo aulas da universidade.
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MATERIAS E MÉTODOS 
10 adultos de Drosophila melanogaster
Tampão TMD 
Micropipetador
Bastão de plástico 
Detergente SDS 
Proteinase K
incubadora
Luva
Centrifugadora
Fenol
Clorofórmio
Álcool isamílico
microtubos
Etanol 100%
Etanol 70%
Tampão TE
ponteira
 Matérias e Métodos 
 Os materiais utilizados:
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 A extração do ácido desoxirribonucleico (DNA) das moscas, Drosophila melanogaster, a princípio a
extração de ácidos ribonucleicos envolve três etapas principais, sendo a primeira a Lise, processo promove o
rompimento dos tecidos, a segunda etapa é a limpeza, reagentes químicos são usados juntamente com a
centrifugadora, e a última etapa é a precipitação do DNA, acontece a retirada da molécula.
 O primeiro processo seguido em um laboratório é uso de luvas (ARAUJO,2004), em seguida, foi iniciado
o procedimento de extração, logo, a ministrante do vídeo depositou dez Drosophila melanogaster congeladas
em um microtúbulo, em seguida, foi adicionado com ajuda de um micropipetador (300 μl) um tampão de
maceração (TMD), é válido mencionar que o tampão tem como objetivo preservar a integridade do DNA.
Logo após esse processo é necessário fazer a quebra do citoesqueleto da mosca para que ocorra a liberação
dos tecidos para a área externa, sendo assim, foi usado um bastão para essa técnica que começou a macerar a
mosca com esse bastão.
 
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MATERIAS E MÉTODOS 
 Posteriormente, o segundo passo foi introduzido 12 μl de um detergente SDS nos macerados da
Drosophila, resultando na primeira etapa da Lise. Depois que ocorre a quebra das membranas é acrescentado
uma enzima chamada proteinase K ( 1,5 μl), a qual objetivo é a quebra das histonas, após esse processo, o
microtúbulo foi adicionado em uma incubadora a 65° por 20 minutos. Seguindo o protocolo, agora
acontecerá a etapa da limpeza que necessita de reagentes químicos para desnaturar a proteína, foi usado o
fenol, clorofórmio e o álcool isoamílico ( 300 micrólitos), depois desse processo o material foi levado para a
centrifugadora ( 5 minutos por 12.000 RPM) para que ocorresse a separação.
 Por conseguinte a esse processo, foi notado a presença de duas fases a aquosa e a fenólica, em seguida,
ocorreu a transferência do sobrenadante para outro microtúbulo. A próxima etapa foi a precipitação do
DNA, sendo assim, acrescentamos um etanol 100% (600 μl), a qual foi centrifugada novamente por 5
minutos. Depois desse processo, foi descartado o líquido e apenas o pellet de DNA ficou no tubo,
posteriormente, acrescentaram etanol 70% para a retirada do excesso de sal, em seguida, o microtúbulo foi
direcionado para a centrifugadora novamente, por fim, o etanol 70% foi drenado e o pellet secou a
temperatura ambiente e depois foi adicionado o tampão TE (40 μl) para inativar enzimas que sobraram.
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RESULTADO
 Ao realizar o experimento, foi possível visualizar formação de uma “gosma branca”, a qual se
prendeu no microtúbulo. Essa gosma é justamente o DNA da mosca Drosophila melanogaster.
 
DISCUSSÃO
 Em suma, o video apresentado desenvolve passo a passo da extração do DNA (Ácido
Dioxirribonucleico) da espécie Drosophila melanogaster. Em contrapartida, cada processo foi
extremamente didático e enriquecedor. Desse modo, podemos mencionar a importância de
conteúdo como esse para o ensino-aprendizagem de crianças e jovens, ou seja, ao invés do aluno
apenas usar a perspectiva teórica e testara na prática, logo trazendo esses estudantes para mais
perto da ciência (PEREIRA, 2010). É válido mencionar a importância da extração de DNA, pois,
como mencionado anteriormente foi através do DNA que a biologia molecular moderna se
desenvolveu.
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RESULTADO
 
Arias, Ana cristina, Extração de DNA. Youtube. Disponível em: <https://www.youtube.com/watch?
v=fkeTsQVf1FQ>. Acesso em: 07 de janeiro. 2022. 11:51:21.
ARAÚJO, Enilma Marques; VASCONCELOS, Simão Dias. Biossegurança em laboratórios
universitários: um estudo de caso na Universidade Federal de Pernambuco. Revista Brasileira de Saúde
Ocupacional, v. 29, n. 110, p. 33-40, 2004.
PEREIRA, Boscolli Barbosa; CAMPOS, E. O.; BONETTI, Ana Maria. Extração de DNA por meio de
uma abordagem experimental investigativa. Genética na Escola, v. 5, n. 2, p. 20-2, 2010.