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PRÉ-TESTE 1) Qual a diferença entre as bactérias Gram positivas das Gram negativas? b) Presença de uma camada espessa de peptideoglicano; RESPOSTA CORRETA A parede celular das bactérias Gram positivas é composta por uma espessa camada de peptideoglicanos (proteínas + carboidratos), o que permite que o lugol auxilie na fixação do cristal violeta, corando as bactérias de roxo. 2) Quais são os componentes utilizados pelo método de Gram? b) Violeta genciana, lugol, álcool cetona e Safranina; RESPOSTA CORRETA A violeta genciana cora a parede celular da bactéria; o lugol auxilia a fixação da violeta; o álcool cetona promove a descoloração da bactéria que não possuem uma camada espessa de peptideoglicanos, enquanto a Safranina promove o contraste das estruturas que foram descoloridas pelo álcool cetona. 2) As bactérias são transparentes, sendo frequente o uso de corantes para a visualização da forma e do tipo de arranjo desses microrganismos. Sobre o termo “Gram”, muito utilizado neste método, marque a assertiva que indica a sua origem. 3) a) O termo Gram se origina do nome Christian Gram, pesquisador dinamarquês que, em 1884, desenvolveu o método de coloração que passou a dividir as bactérias em dois grandes grupos: Gram positivas e Gram negativas; RESPOSTA CORRETA A afirmativa está correta. 4) Considerando o Gram uma etapa crucial no processo de identificação do agente etiológico, marque a assertiva correta. a) Esse método de coloração nos permite visualizar a morfologia bacteriana, auxiliando a escolha correta das provas bioquímicas utilizadas na identificação do microrganismo; RESPOSTA CORRETA A identificação das características morfológicas e tintoriais das bactérias é crucial para a identificação final desses microrganismos. 5) Em relação aos conhecimentos adquiridos sobre o método de coloração de Gram, marque a assertiva correta. b) Uma bactéria Gram negativa, após a coloração por esse método, apresenta uma coloração rosada. RESPOSTA CORRETA As bactérias Gram negativas apresentam uma camada delgada de peptideoglicano, o que dificulta a absorção da violeta genciana, facilitando a descoloração pelo álcool cetona. Esse fato auxilia a coloração rosada após a etapa da Fucsina ou Safranina. PRÉ-TESTE 1) Quais são as etapas para uma correta coloração de Gram? a) Confecção do esfregaço com a bactéria a ser analisada; fixação do esfregaço; cobrir a lâmina com violeta de genciana por 1 minuto; lavar; cobrir a lâmina com lugol por 1 minuto; lavar; lavar com álcool rapidamente (10 segundos); lavar; lâmina com fucsina por 30 segundos; lavar; RESPOSTA CORRETA As etapas descritas seguem a ordem e o tempo correto de aplicação. 2) Em relação as etapas do método de coloração de Gram, marque a assertiva correta. a) Durante o processo da coloração de Gram, podemos suprimir a etapa da fixação sem que ocorra uma redução da qualidade da microscopia; RESPOSTA CORRETA A utilização da violeta de metila ao invés da violeta genciana permite que a etapa de fixação seja suprimida. 3) Qual afirmativa não interfere diretamente na visualização das estruturas bacterianas após a coloração de Gram? b) Esperar secar a suspensão de salina / material bacteriano para fixar o material na lâmina; RESPOSTA CORRETA A secagem da lâmina durante o processo de fixação pode interferir na visualização das estruturas bacterianas. 4) A imagem abaixo do Gram corresponde a: b) bacilos ou bastonetes Gram negativos; RESPOSTA CORRETA O Gram evidenciou a presença de estruturas em bastões com coloração rosada, o que significa ausência de uma camada espessa de peptídeoglicano, ou seja, Gram negativos. 5) A imagem abaixo do Gram corresponde a: b) cocos Gram positivos; RESPOSTA CORRETA O Gram evidenciou a presença de cocos com coloração roxa, o que significa presença de uma camada espessa de peptídeoglicano, ou seja, cocos Gram positivos. PRÉ-TESTE 1) Em relação aos meios de cultura bacteriológicos podemos afirmar que: b) não existe meio de cultura universal. É necessário conhecer a fisiologia das bactérias para poder cultivá-las; RESPOSTA CORRETA A composição dos meios deve atender as necessidades nutritivas das bactérias. Isso deve ocorrer de acordo com suas características fisiológicas. 2) São fatores que podem interferir no cultivo dos micro-organismos: a) temperatura de incubação, atmosfera de incubação, pH e composição do meio; RESPOSTA CORRETA Fatores como a temperatura de incubação, o pH e a presença de enzimas capazes de quebrar moléculas para uma melhor absorção de nutrientes dos meios de cultura também interferem diretamente na recuperação do agente etiológico. 3) Os meios de cultura podem ser classificados de acordo com suas propriedades e características específicas, portanto, são exemplos de classificações para os meios de cultura: b) diferencial, seletivos e de enriquecimento; RESPOSTA CORRETA Os meios de cultura podem ser classificados de acordo com as características que podem proporcionar: seleção de bactérias especificas, distinção entre bactérias e a promoção do crescimento de micro-organismos mais fastidiosos, por exemplo. 4) Durante a produção dos meios de cultura devemos seguir as etapas sugeridas pelo fabricante para garantir as propriedades e qualidade do meio a ser confeccionado. Diante disso, podemos afirmar que: a) o meio de cultura deve ser hidratado de acordo com as recomendações do fabricante; RESPOSTA CORRETA Os meios de culturas são preparações que possuem na sua fórmula nutrientes e substâncias que fornecem as condições necessárias para o crescimento das bactérias. Portanto, é necessário seguir as recomendações do fabricante para garantir as propriedades e qualidade do meio de cultura a ser confeccionado. 5) Os meios de cultura são classificados quanto ao estado físico. Diante disso, podemos concluir que: a) os meios podem ser classificados quanto ao seu estado físico como: sólido, semissólido e líquidos a depender da concentração ou ausência de substâncias que promovem a solidificação; RESPOSTA CORRETA PRÉ-TESTE O ágar é uma substância que promove a solidificação dos meios de cultura sólidos quando presentes em uma concentração de 1 a 2%; quando presentes em uma concentração inferior são classificados como semissólidos; e na ausência do ágar são classificados como líquidos. 1) Como podemos identificar um fungo filamentoso? a) Através da análise macroscópica (aspectos da colônia) e microscópica (hifas, conídios, por exemplo) do fungo; RESPOSTA CORRETA A identificação de fungos filamentosos tem, como fundamento, a observação da morfologia da colônia e aspectos microscópicos. A análise da colônia visa observar: cor, textura, superfície e reverso da colônia, pigmento difusível no meio de cultura, por exemplo. Enquanto a análise das estruturas microscópicas visa observar hifa hialina ou demácia, septada ou cenocítica, morfologia, disposição e formação dos esporos. 2) Quais são os meios de cultura apropriados para a realização do microcultivo para fungos filamentosos: ) ágar Sabouraud e batata; RESPOSTA CORRETA O ágar Sabouraud e o ágar batata são meios capazes de estimular o desenvolvimento das estruturas microscópicas do fungo (esporângios/conídeos). 2) A velocidade do crescimento fúngico é extremamente importante para a sua identificação. Assinale a assertiva que corresponde à classificação de crescimento dos fungos filamentosos: b) rápido (< 7 dias), intermediário (8 a 14 dias) ou lento (> 15 dias); RESPOSTA CORRETA A afirmativa classifica a velocidade de crescimento dos fungos corretamente. 4) Considerando a técnica do microcultivo de bolores (Fusarium sp.), responda: a) a técnica do microcultivo de bolores (Fusarium sp.) preserva a disposição original dos esporossobre as hifas e mantém íntegras as estruturas formadoras de esporos, o que facilita a visualização microscópica; RESPOSTA CORRETA O microcultivo permite a integridade das estruturas fúngicas, já que o fungo cresce sob a lamínula sem a necessidade da retirada de fragmentos da cultura. 5) Quando deve ser realizado o microcultivo de bolores (Fusarium sp.)? a) Quando é impossível a identificação do gênero/espécie do fungo pela lâmina realizada diretamente da colônia; RESPOSTA CORRETA PRÉ-TESTE Em alguns casos, torna-se impossível a visualização das estruturas dos fungos através da lâmina confeccionada da cultura primária. Nesses casos, é indicado o microcultivo.
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