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MICROCULTIVO DE BOLORES (FUSARIUM SP.)
PRÉ-TESTE
1) Como podemos identificar um fungo filamentoso? 
a) Através da análise macroscópica (aspectos da colônia) e microscópica (hifas, conídios, por exemplo) do fungo; 
RESPOSTA CORRETA
A identificação de fungos filamentosos tem, como fundamento, a observação da morfologia da colônia e aspectos microscópicos. A análise da colônia visa observar: cor, textura, superfície e reverso da colônia, pigmento difusível no meio de cultura, por exemplo. Enquanto a análise das estruturas microscópicas visa observar hifa hialina ou demácia, septada ou cenocítica, morfologia, disposição e formação dos esporos. 
b) Através da análise macroscópica da cultura primária do fungo filamentoso; 
c) Através dos aspectos clínicos e epidemiológicos associados ao fungo isolado. 
2) Quais são os meios de cultura apropriados para a realização do microcultivo para fungos filamentosos: 
a) ágar Sabouraud e batata; 
RESPOSTA CORRETA
O ágar Sabouraud e o ágar batata são meios capazes de estimular o desenvolvimento das estruturas microscópicas do fungo (esporângios/conídeos). 
b) ágar Mycosel e batata; 
c) ágar batata e arroz.
3) A velocidade do crescimento fúngico é extremamente importante para a sua identificação. Assinale a assertiva que corresponde à classificação de crescimento dos fungos filamentosos: 
a) rápido (< 7 dias) e lento (> 30 dias); 
b) rápido (< 7 dias), intermediário (8 a 14 dias) ou lento (> 15 dias); 
RESPOSTA CORRETA
A afirmativa classifica a velocidade de crescimento dos fungos corretamente. 
c) rápido (< 7 dias) ou lento (8 a 14 dias).
4) Considerando a técnica do microcultivo de bolores (Fusarium sp.), responda: 
a) a técnica do microcultivo de bolores (Fusarium sp.) preserva a disposição original dos esporos sobre as hifas e mantém íntegras as estruturas formadoras de esporos, o que facilita a visualização microscópica; 
RESPOSTA CORRETA
O microcultivo permite a integridade das estruturas fúngicas, já que o fungo cresce sob a lamínula sem a necessidade da retirada de fragmentos da cultura. 
b) a técnica do microcultivo de bolores (Fusarium sp.) é utilizada para diferenciar os tipos de hifas; 
c) a técnica do microcultivo de bolores (Fusarium sp.) é utilizada para facilitar a visualização dos blastoconídeos, bem como a disposição das hifas durante a microscopia.
5) Quando deve ser realizado o microcultivo de bolores (Fusarium sp.)? 
a) Quando é impossível a identificação do gênero/espécie do fungo pela lâmina realizada diretamente da colônia; 
RESPOSTA CORRETA
Em alguns casos, torna-se impossível a visualização das estruturas dos fungos através da lâmina confeccionada da cultura primária. Nesses casos, é indicado o microcultivo. 
b) Rotineiramente, pois é o método mais rápido e fácil para a identificação do gênero/espécie do fungo investigado; 
c) Em culturas que apresentam contaminação por outros fungos filamentosos de crescimento rápido.
PÓS-TESTE
1) Em alguns momentos, a preparação de uma lâmina pode ser insuficiente para a visualização adequada das estruturas microscópicas do fungo a ser investigado. Marque a alternativa que indique o motivo dessa visualização precária. 
a) Ausência de arranjos e estruturas fúngicas características; 
RESPOSTA CORRETA
Durante a confecção da lâmina diretamente da cultura primária, é necessária a fragmentação da porção retirada do meio de cultura. Esse processo pode impedir a visualização dos arranjos estruturais do fungo a ser investigado. 
b) Visualização do ágar do meio de cultura; 
c) Presença de fungos contaminantes.
2) Quais substâncias podem ser utilizadas para a visualização das estruturas fúngicas do microcultivo? 
a) Violeta genciana e salina; 
b) Hidróxido de potássio e lactofenol; 
RESPOSTA CORRETA
O microcultivo utiliza KOH a 20-40% ou lactofenol para facilitar a visualização de estruturas fúngicas na amostra avaliada. 
c) Panótico e azul de cresil.
3) É essencial durante o processo de incubação do microcultivo: 
a) o ágar Sabouraud ou de batata estarem em uma espessura adequada; 
RESPOSTA CORRETA
O fungo precisa de nutrientes e um ambiente para o seu crescimento durante o período de incubação. O microcultivo em um meio extremamente fino impede o desenvolvimento do fungo. 
b) o ágar sangue de carneiro a 5% em uma espessura adequada; 
c) o hidróxido de potássio (KOH) atua como estimulante para o crescimento fúngico.
4) Observe a imagem abaixo. Com relação ao microcultivo, esta corresponde a: 
a) um microcultivo de um fungo hialino; 
b) um microcultivo de um fungo demáceo; 
RESPOSTA CORRETA
A microscopia evidenciou estruturas demáceas. 
c) um microcultivo de um blasconídeo.
5) Durante a montagem do microcultivo, o que não devemos utilizar? 
a) Lâmina acondicionada em álcool a 70%; 
b) Lamínula acondicionada em um local mofado; 
RESPOSTA CORRETA
Uma lamínula acondicionada de modo incorreto pode dificultar a identificação do fungo investigado devido a contaminação do microcultivo. 
c) Gaze dentro da placa de Petri.
MICROSCOPIA DE FUNGOS FILAMENTOSOS (BOLORES) E FUNGOS LEVEDURIFORMES
PRÉ-TESTE
 1) Quais são as classificações utilizadas para os tipos de fungos? 
a) Filamentosos, leveduriformes e dimórficos; 
RESPOSTA CORRETA
Existem três classificações utilizadas: filamentosos (possuem suas células em forma de filamentos tubulares denominados de hifas, e o seu conjunto é chamado de micélio), leveduriformes (apresentam suas células em um formato arredondado ou ovalado e são chamadas de leveduras) e dimórficos (a depender da temperature podem se apresentar como fungo filamentoso ou leveduriforme). 
b) Filamentoso, hialino e demáceo; 
c) Pseudo-hifa, levedura e dimórfico.
2) Os filamentosos apresentam filamentos tubulares denominados de hifas e o seu conjunto é chamado de micélio. Em relação as características das hifas, marque a alternativa correta. 
a) Podem ser classificadas em hialinas quando apresentam cores claras ou são transparentes e demáceas quando apresentam uma cor mais escura; 
RESPOSTA CORRETA
As hifas podem ser classificadas como hialinas por apresentarem uma coloração clara/transparente na microscopia e como demáceas por apresentarem melanina na sua estrutura promovendo uma coloração acastanhada. 
b) Podem ser classificadas como cenocíticas quando apresentarem divisões em suas hifas; 
c) Podem ser classificadas como pseudo-hifas quando não apresentarem divisões em suas hifas.
3) Em relação aos fungos encontrados na natureza e que ocasionalmente parasitam os homens e/ou animais, marque a assertiva correta. 
a) Geofílicos são os únicos fungos que parasitam os animais; 
b) Geofílicos, zoofílicos e antropofílicos; 
RESPOSTA CORRETA
Geofílicos, zoofílicos e antropofílicos são os tipos de classificações dos fungos encontrados no solo que, ocasionalmente, podem parasitar os homens e/ou animais. 
c) Antropofílicos são os fungos que são encontrados no solo e na água.
4) Considerando que um fungo apresenta uma morfologia diferente a depender da temperatura a qual estará exposto, marque a alternativa correta. 
a) Podemos classificá-lo como fungo dimórfico; 
RESPOSTA CORRETA
Os fungos dimórficos são capazes de existir nas duas formas: leveduriformes entre 25°C a 37°C e filamentosos entre 25°C a 30°C. 
b) Podemos classificá-lo como uma pseudo-hifa; 
c) Podemos classificá-lo como um fungo filamentoso.
5) Considerando que os fungos necessitam de matéria orgânica para sobreviver, assinale a assertiva correta. 
a) Podem ser associados ao material orgânico como decompositores, simbiontes, comensais e parasitas; 
RESPOSTA CORRETA
Os efeitos decorrentes destas associações podem ser considerados úteis ou prejudiciais, já que necessitam de matéria orgânica para a obtenção de carbono e de energia para o seu metabolismo. 
b) Podem ser associados ao material orgânico como decompositores e parasitas; 
c) Podem ser classificados ao material orgânico como comensais e parasitas.
PÓS-TESTE
1) A visualização de estruturas fúngicas é essencial à identificação final desse micro-organismo. Em relação ao processo de microscopia parapesquisa direta para fungos, assinale a alternativa correta. 
a) Com o auxílio de uma alça em “L”, deve-se retirar uma pequena porção da amostra biológica a ser analisada e, já na lâmina previamente com hidróxido de potássio (KOH) a 20%-40%, fazer a suspensão em círculos suavemente. Depois deve-se colocar uma lamínula e observar no microscópio na objetiva 40X; 
RESPOSTA CORRETA
A afirmativa está correta. 
b) Com o auxílio de uma alça em “L”, deve-se retirar uma pequena porção da amostra biológica a ser analisada fazendo a suspensão em círculos suavemente no hidróxido de potássio (KOH) 20%-40%. Depois deve-se colocar uma lamínula e observar no microscópio na objetiva 100X; 
c) Com o auxílio de uma alça em “L”, deve-se retirar uma pequena porção da amostra biológica fazendo a suspensão em círculos suavemente na violeta genciana. Depois deve-se colocar uma lamínula e observar no microscópio na objetiva 100X.
2) Qual o método utilizado para a visualização das estruturas fúngicas em amostras biológicas? 
a) Ziehl Neelsen; 
b) Micológico direto; 
RESPOSTA CORRETA
O micológico direto utiliza KOH a 20-40% para facilitar a visualização de estruturas fúngicas na amostra avaliada. 
c) Coloração de Wright.
3) Os fungos possuem necessidades nutricionais que podem ser supridas através dos meios de cultura artificiais. Em relação ao cultivo de fungos, pode-se afirmar que: 
a) o ágar Sabouraud é o meio de cultura mais utilizado para o cultivo desses micro-organismos; 
RESPOSTA CORRETA
O ágar Sabouraud possui uma elevada concentração de dextrose, que proporciona uma vantagem para o desenvolvimento dos fungos estáveis por osmose, à medida que a maioria das bactérias não suporta a elevada concentração de açúcar. 
b) o ágar sangue de carneiro a 5% é o principal meio de cultura utilizado para o cultivo de fungos; 
c) podemos utilizar o KOH para o crescimento fúngico.
4) Analise a imagem do micológico direto de um raspado de unha abaixo e assinale a alternativa que corresponde aos achados visualizados na microscopia. 
a) Hifas demáceas; 
b) Hifas hialinas septadas; 
RESPOSTA CORRETA
O micológico direto evidenciou a presença de estruturas tubulares, denominadas hifas de coloração hialina e com presença de septos. 
c) Pseudo-hifas
5) Analise a imagem da coloração de Gram abaixo e assinale a alternativa que corresponde aos achados visualizados na microscopia. 
a) Hifas demáceas; 
b) Leveduras; 
RESPOSTA CORRETA
As leveduras são fungos unicelulares ovais ou esféricos (geralmente de 3 a 4 µm de diâmetro) e que podem ser corados de roxo pela metodologia do Gram. 
c) Cocos Gram positivos agrupados.