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COLORAÇÃO DE GRAM 1) Qual a diferença entre as bactérias Gram positivas das Gram negativas? b) Presença de uma camada espessa de peptideoglicano; RESPOSTA CORRETA A parede celular das bactérias Gram positivas é composta por uma espessa camada de peptideoglicanos (proteínas + carboidratos), o que permite que o lugol auxilie na fixação do cristal violeta, corando as bactérias de roxo. 2) Quais são os componentes utilizados pelo método de Gram? b) Violeta genciana, lugol, álcool cetona e Safranina; RESPOSTA CORRETA A violeta genciana cora a parede celular da bactéria; o lugol auxilia a fixação da violeta; o álcool cetona promove a descoloração da bactéria que não possuem uma camada espessa de peptideoglicano, enquanto a Safranina promove o contraste das estruturas que foram descoloridas pelo álcool cetona 3) As bactérias são transparentes, sendo frequente o uso de corantes para a visualização da forma e do tipo de arranjo desses microrganismos. Sobre o termo “Gram”, muito utilizado neste método, marque a assertiva que indica a sua origem. a) O termo Gram se origina do nome Christian Gram, pesquisador dinamarquês que, em 1884, desenvolveu o método de coloração que passou a dividir as bactérias em dois grandes grupos: Gram positivas e Gram negativas; 4) Considerando o Gram uma etapa crucial no processo de identificação do agente etiológico, marque a assertiva correta; a) Esse método de coloração nos permite visualizar a morfologia bacteriana, auxiliando a escolha correta das provas bioquímicas utilizadas na identificação do microrganismo; 5) Em relação aos conhecimentos adquiridos sobre o método de coloração de Gram, marque a assertiva correta. c) Uma bactéria Gram negativa, após a coloração por esse método, apresenta uma coloração rosada. RESPOSTA CORRETA As bactérias Gram negativas apresentam uma camada delgada de peptideoglicano, o que dificulta a absorção da violeta genciana, facilitando a descoloração pelo álcool cetona. Esse fato auxilia a coloração rosada após a etapa da Fucsina ou Safranina. 1) Quais são as etapas para uma correta coloração de Gram? a) Confecção do esfregaço com a bactéria a ser analisada; fixação do esfregaço; cobrir a lâmina com violeta de genciana por 1 minuto; lavar; cobrir a lâmina com lugol por 1 minuto; lavar; lavar com álcool rapidamente (10 segundos); lavar; lâmina com fucsina por 30 segundos; lavar; RESPOSTA CORRETA As etapas descritas seguem a ordem e o tempo correto de aplicação. 2) Em relação as etapas do método de coloração de Gram, marque a assertiva correta. a) Durante o processo da coloração de Gram, podemos suprimir a etapa da fixação sem que ocorra uma redução da qualidade da microscopia; RESPOSTA CORRETA A utilização da violeta de metila ao invés da violeta genciana permite que a etapa de fixação seja suprimida. 3) Qual afirmativa não interfere diretamente na visualização das estruturas bacterianas após a coloração de Gram? b) Esperar secar a suspensão de salina / material bacteriano para fixar o material na lâmina; RESPOSTA CORRETA A secagem da lâmina durante o processo de fixação pode interferir na visualização das estruturas bacterianas. 4) A imagem abaixo do Gram corresponde a: b) bacilos ou bastonetes Gram negativos; RESPOSTA CORRETA O Gram evidenciou a presença de estruturas em bastões com coloração rosada, o que significa ausência de uma camada espessa de peptídeoglicano, ou seja, Gram negativos. 5) A imagem abaixo do Gram corresponde a: b) cocos Gram positivos; RESPOSTA CORRETA O Gram evidenciou a presença de cocos com coloração roxa, o que significa presença de uma camada espessa de peptídeoglicano, ou seja, cocos Gram positivos.