EXERCÍCIO DE COLORAÇÃO: TESTE DE GRAM

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Agnes Dib - 19002553
EXERCÍCIO DE COLORAÇÃO: TESTE DE GRAM 1
1-Existem as bactérias ‘Gram positivo’ e ‘Gram negativo’. Geralmente as bactérias
"gram negativo" são mais patogênicas. Esses dois tipos de bactérias são detectadas a
partir de uma técnica de coloração que as diferencia com base na composição química e
integridade da _____________________.
A estrutura que melhor completa a frase é:
a) membrana plasmática.
b) parede celular.
c) envoltório nuclear.
d) vacúolo.
e) citoplasma.
2- Ao desenvolver uma prática de coloração de Gram, o analista realizou todas as etapas
da metodologia prevista, mas esqueceu de adicionar a fucsina, por trinta segundos, no
final do processo. O resultado será.
a) Gram.
b) Simples.
c) Albert-Laybourn.
d) Fontana-Tribondeau.
e) Ziehl-Neelsen.
3- Ao desenvolver uma prática de coloração de Gram, o analista realizou todas as etapas
da metodologia prevista, mas esqueceu de adicionar a fucsina, por trinta segundos, no
final do processo. O resultado será.
a) Apenas a visualização das bactérias Gram-negativas, de cor vermelha.
b) A observação, somente, das bactérias Gram-positivas, de cor roxa.
c) Que tanto bactérias Gram-positivas quanto Gram-negativas serão
visualizadas, mas ambas apresentarão cor vermelha.
d) Que nenhuma célula bacteriana será observada, visto que todas estarão
descoradas.
e) Que não será possível a distinção entre Gram-positivas e Gram-negativas,pois todas as bactérias apresentarão cor roxa.
4- Sobre a Coloração de Gram, assinale a alternativa correta.
a) É uma técnica utilizada na coloração de parasitas intestinais.
b) É a técnica mais indicada para a coloração de vírus.
c) É uma técnica utilizada para a coloração de diversos tipos bacterianos.
d) Aqueles que se coram Gram positivos ficam com coloração vermelha.
e) Aqueles que se coram Gram negativos ficam com coloração azul.
5- Sobre bactérias, analise as afirmativas abaixo e assinale a alternativa correta.
I. A espessura da parede celular das bactérias e as dimensões dos espaços intersticiais
são determinantes do resultado final da coloração de Gram.
II. Bactérias Gram positivas são coradas em “vermelho” pela fuscina ou safranina.
III. Bactérias Gram negativas são coradas em “roxo” devido a retenção de violeta pela
parede celular.
a) As afirmativas I, II e III estão corretas
b) Apenas as afirmativas II e III estão corretas
c) Apenas a afirmativa III está correta
d) Apenas a afirmativa I está correta
R: I. A espessura da parede celular das bactérias e as dimensões dos espaços intersticiais
são determinantes do resultado da coloração de Gram.
VERDADEIRO. As paredes bacterianas das bactérias gram-negativas diferenciam-se
das bactérias gram-positivas em alguns aspectos, como espessura e composição. As
gram-positivas possuem uma parede celular mais espessa, devido à presença de alguns
dissacarídeos e aminoácidos em sua composição de peptideoglicanos. Por outro lado, as
gram-negativas possuem, na constituição de sua parede celular, uma porção de lipídeos
e polissacarídeos — camada lipopolissacarídea.
6- Para o exame histopatológico de tecido pulmonar, com inflamação crônica
granulomatosa, de paciente com suspeita de infecção pelo complexo bacteriano
Mycobacterium avium-intracellulare ou pelo Mycobacterium tuberculosis, o médico
patologista solicitou ao histotécnico realizar dois métodos de coloração. Assinale a
alternativa que apresenta que métodos permitem diagnosticar qual dos dois grupos de
micobactérias é a causa da inflamação granulomatosa.
a) Métodos de Wade e do Azul de Toluidina.
b) Métodos de Fite e do Violeta de Cresila.
c) Métodos de Kinyoun e de Giemsa.
d) Métodos de Gram e de Violeta de Metila.
e) Métodos de Ziehl-Neelsen e do PAS.
7- De um modo geral, as bactérias podem ser observadas de duas formas: a fresco,
através da observação de suspensão bacteriana entre a lâmina e lamínula ou gota
pendente. A outra forma se dá através de um esfregaço fixado e corado. A maioria das
bactérias tem afinidade por um grande número de corantes derivados básicos da anilina.
O método da coloração de Gram foi desenvolvido pelo médico dinamarquês Hans
Christian Joachim Gram, em 1884 e tem como principal fundamento o fato de que as
bactérias, quando coradas por derivados próximos da rosanilina (violeta de genciana,
etc.) e depois tratadas com iodo, formam um composto de coloração escura, entre o iodo
e o corante, chamado iodopararosanilina.
Assinale a alternativa correta:
a) Nas bactérias Gram-positivas o iodopararosanilina é fortemente retido e não pode ser
facilmente removível pelo tratamento posterior com álcool, ao passo que nas Gram-
negativas este composto é facilmente descorado pelo álcool. Após a ação do álcool é
feita uma segunda coloração com safranina ou fucsina diluída e as bactérias Gram-
negativas aparecerão vermelhas e as Gram-positivas roxas.
b) Nas bactérias Gram-positivas o iodopararosanilina é fracamente retido, sendo
facilmente removido pelo tratamento posterior com álcool, ao passo que nas Gram-
negativas este composto é fortemente retido e não pode ser facilmente descorado pelo
álcool. Após a ação do álcool é feita uma segunda coloração com safranina ou fucsina
diluída e as bactérias Gram-positivas aparecerão vermelhas e as Gram-negativas roxas.
c) Tanto nas bactérias Gram-positivas quanto nas bactérias Gram-negativas o
iodopararosanilina é fracamente retido e pode ser facilmente removível pelo tratamento
posterior com álcool. Após a ação do álcool é feita uma segunda coloração com
safranina ou fucsina diluída e as bactérias Gram-negativas aparecerão vermelhas e as
Gram-positivas alaranjadas.
d) Tanto nas bactérias Gram-positivas quanto nas bactérias Gram-negativas o
iodopararosanilina é fortemente retido e não pode ser facilmente removível pelo
tratamento posterior com álcool. Após a ação do álcool é feita uma segunda coloração
com safranina ou fucsina diluída e as bactérias Gram-negativas aparecerão roxas e as
Gram-positivas azul escuro.
8- Durante a execução da coloração de Gram, a solução utilizada para descorar as
lâminas é a de:
a) cristal violeta.
b) álcool-acetona.
c) lugol.
d) fucsina.
e) azul de metileno.
9- Considerando a técnica de coloração de Gram e as características da parede
bacteriana, assinale a opção INCORRETA:
a) As bactérias, de acordo com a coloração apresentada pela técnica de Gram, podem
ser classificadas em Gram-positivas e Gram-negativas.
b) A parede das bactérias consideradas Gram-positivas é mais delgada, permitindo a
entrada do corante na célula bacteriana.
c) As bactérias Gram-positivas apresentam coloração azul ao final da técnica.
d) A parede celular das bactérias consideradas Gram negativas é composta por:
lipopolissacarídeos, fosfolipídeos, lipoproteínas e uma fina camada de peptidoglicano.
e) As bactérias consideradas Gram-negativas apresentam coloração vermelha ao final da
técnica.
10- Um técnico de laboratório de microbiologia é chamado para rever um POP que
descreve a técnica de coloração de gram no setor de microbiologia de seu laboratório e
se depara com a seguinte descrição:
I. Coloração primária: o esfregaço é fixado e corado com solução de cristal violeta
durante um minuto. O excesso do corante é lavado com água corrente e, nesse estágio,
as células adquirem coloração esverdeada;
II. Mordente: o esfregaço é coberto por uma solução de iodo-iodetada durante 10
minutos. O cristal violeta é fixado à célula pelo mordente que produz um complexo
violeta-iodo, que é fortemente retido por um grupo de bactérias;
III. Descoloração: uma solução de álcool etílico a 95% é aplicada por gotejamento até
que não haja mais desprendimento do corante.
Após a análise da metodologia, foram identificados alguns erros que estão presentes nas
afirmativas:
a) I e III apenas.
b) II e III apenas.
c) Apenas na III.
d) I e II apenas.
e) Em todas as afirmativas.
11- A bacterioscopia consiste na avaliação da presença de bactérias em materiais
biológicos. A coloração de Gram é uma técnica muito utilizada no laboratório de
análises clínicas no setor de microbiologia, paradiferenciar os microrganismos com
base na composição química e integridade da parede celular, o que permite diferenciá-
las em Gram-positivas e Gram-negativas.
Das alternativas a seguir, qual apresenta a sequência correta do método de Coloração de
Gram?
a) Cristal de violeta, álcool cetona, lugol, safranina.
b) Cristal de violeta, lugol, álcool cetona, azul de cresil brilhante.
c) Cristal de violeta, álcool cetona, lugol, fucsina.
d) Cristal de violeta, lugol, azul de metileno, fucsina.
e) Cristal de violeta, lugol, álcool cetona, fucsina/safranina.
12- Um dos procedimentos mais comuns em microbiologia é a coloração de Gram.
A respeito dessa coloração, qual das alternativas é a INCORRETA?
a) Exposição das bactérias ao etanol ou à acetona fixa o cristal violeta na camada de
peptidoglicano.
b) Tanto as bactérias Gram positivas quanto as Gram negativas coram-se de azul com o
cristal violeta.
c) As bactérias Gram positivas retêm o cristal violeta, enquanto as Gram negativas não
o retêm.
d) As bactérias Gram negativas são coradas de vermelho pela fucsina.
13- O método de coloração de Gram permite a visualização da maioria das espécies
bacterianas. Sobre esta técnica, é correto afirmar que bactérias Gram-positivas:
a) são visualizadas em azul-violeta devido à utilização do corante Safranina ou Fucsina.
b) possuem parede celular formada por camada única de peptidoglicano.
c) podem ser visualizadas como Gram-negativas, caso ocorra lise da parede celular.
d) perdem a membrana externa fosfolipídica devido à adição do mordente Lugol.
e) não retêm o corante Cristal Violeta após a lavagem da lâmina com etanol.
14- Um dos métodos mais importantes de tinção utilizados em laboratórios de
microbiologia é a coloração de Gram. A importância clínica do método reside no fato de
que muitas das bactérias associadas a infecções humanas podem ser categorizadas em
Gram-positivas ou Gram-negativas, facilitando o diagnóstico de exames biomédicos.
Em relação a esse assunto, assinale a alternativa correta.
a) Os corantes hematoxilina e eosina utilizados neste protocolo permitem diferenciar
estruturas ácidas e básicas das bactérias, separando-as, então, as bactérias em Gram-
positivas e Gram-negativas.
b) Os corantes azul-de-metileno e Orange-G utilizados no método de coloração de Gram
deixam as bactérias Gram-positivas com uma coloração azulada ou violeta, e as
bactérias Gram-negativas com uma coloração vermelho-rosado.
c) Além da eleição dos corantes utilizados, outra etapa crítica do método de Gram é a
fixação do material com Nitrato de prata, aplicado depois do corante secundário.
d) Um fato importante ocorre na etapa de descoloração do protocolo de tinção de Gram,
já que o corante Cristal-violeta é removido das bactérias Gram-negativas, mas não é
totalmente removido das bactérias Gram-positivas, facilitando a identificação de um ou
outro grupo de bactérias.