COLHEITA E TRANSPOSTE DE MATERIAL FECAL

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O Laboratório Central de Saúde Pública do Espírito Santo - LACEN/ ES –
É o centro de referência estadual de conhecimento técnico em diagnóstico laboratorial, com a missão de promover ações de vigilância em saúde na área de sua competência, provendo serviços de qualidade à população. 
No LACEN são realizados exames de interesse na área de Saúde Pública para identificação de surtos e epidemias e exames de maior complexidade para complementação diagnóstica, nas áreas de vigilância ambiental, epidemiológica e sanitária
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Coleta, Preparo e Transporte de amostras biológicas
Cumprir as exigências do Programa de Qualidade e as Normas de Biossegurança nos Serviços de Saúde
(Lei 8080/90, cap. 2 inciso VI)
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Fase pré-analítica
COLETA
Identificação adequada 
PACIENTE
RECIPIENTE
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COLETA E PRESERVAÇÃO DE AMOSTRAS FECAIS
Temos vários tipo de exames de fezes
REVELA PRESENÇA DE OVOS E LARVAS DE HELMINTOS, 
OOCITOS E CISTOS DE PROTOZOARIOS
REALIZA O ESTUDO DAS FUNÇÕES DIGESTIVAS
PESQUISA A GORDURA FECAL
PESQUISA DE SANGUE OCULTO
COPROCULTURA: cultura de fezes para pesquisa de microrganismo patogênicos
MÉTODOS QUANTITATIVOS E QUALITATIVOS
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DE UMA FORMA GERAL COLETA DE FEZES TEMOS:
COLETAR 3 AMOSTRAS EM DIAS ALTERNADOS
ANALISAR OS PRINCIPAIS ASPECTOS
REALIZAR ANÁLISE MACROSCÓPICA
REALIZAR ANÁLISE MICROSCÓPICA
VERIFICAR A PRESENÇA E ABUNDANCIA DE ELEMNETOS COMO GORDURA, SANGUE
PRESENÇA DE CISTOS OOCISTOS,TROFOZOÍTOS LARVAS, OVOS
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A QUALIDADE DO EXAME DEPENDE DE ETAPAS BEM SUCEDIDAS
PACIENTES : COLETA E CONSERVAÇÃO ADEQUADA DA AMOSTRA
MÉDICO: DEFINIÇÃO DA SUSPEITA CLÍNICA E REQUISIÇÃO ADEQUADA
TECNICO: MÉTODO CORRETO
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COLETA DE FEZES
PACIENTE DEVE RECEBER ORIENTAÇÃO POR ESCRITO
 FRASCO LIMPO,SECO DE BOCA LARGA,
CAPACIDADE 100 L, VEDAÇÃO HERMÉTICAL
QUANTIDADE NECESSÁRIA: 20 A 30g
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A COLETA PODE SER REALIZADA EM:
JORNAL
URINOL
PAPEL LIMPO
E TERNSFERIDAS PARA O RECIPIENTE DE COLETA
A MOSTRA DEVE ESTAR LIVRE DE CONTAMINANTES:
URINA
CONTRASTE DE RX
ÓLEO MINERAL
PACIENTE NÃO DEVE ESTAR FAZENDO USO DE:
ANTIBIÓTICOS
ANTIDIARREICO
VASELINA
ANTIÁCIDO
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Processamento da amostra no próprio frasco de coleta
https://www.youtube.com/watch?v=lUaIYpHiL2U
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 COLETA
DETECÇÃO E IDENTIFICAÇÃO DO PARASITA: QUALIDADE DA AMOSTRA
IDENTIFICAÇÃO DA AMOSTRA
NOME:
NÚMERO DE IDENTIFICAÇÃO
NOME DO MÉDICO
DATA E HORÁRIO DA COLETA
REQUISIÇÃO MÉDICA
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CONSERVAÇÃO
AMOSTRA DEVE SER ANALISADA O QUANTO ANTES
SE NÃO FOR POSÍVEL : REFRIGERAR POR ATÉ 24H
AMOSTRA DIARRÉICAS E LIQUEFEITAS:: EXAMIDAS EM ATÉ 30min
AMOSTRAS FORMADAS: EXAMIDAS EM ATÉ 24H
APÓS 24H: USO DE CONSERVANTE
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ATENÇÃO
AMOSTRAS PROVENIENTES DE PACIENTES COM HIV :
RECIPIENTES COM AMOSTRA DEVE SER PROTEGIDA COM ENVÓLUCRO PLÁSTICO
 E IDENTIFICADA COM ETIQUETA VERMELHA OU HIV OU SIDA
OBS A CRIPTOSPORIDIOSE SINTOMATICA USUALMENTE ESTA ASSOCIADAS AO
 NÚMERO DE OOCITOS NAS FEZES TORNANDO FACULTATIVA O USO DE MÉTODOS DE
 CONCENTRAÇÃO 
O NÚMERO DE OOCITOS VARIA EM FEZES DIAREICAS , DEVENDO SER TESTADAS 3 
AMOSTRAS ANTES DE LIBERAR O RESULTADO
USO DE LAXANTES: SÓ COM PRECRIÇÃO MEDICA
 LAXANTES SALINOS COM FOSFATO DE SODIO OU SULFATO DE SODIO
TAMPONADO
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COLETA DE AMOSTRAS MULTIPLAS
RAZÕES
A INTERMITÊNCIA DA PASSAGEM DE CERTOS PARASITOS A PARTIR DO HOSPEDEIRO
DISTRIBUIÇÃO NÃO UNIFORME DOS OVOS DE HELMINTOS
DOS ESTÁGIOS DOS PROTOZOÁRIOS
LIMITAÇÃO DAS TÉCNICAS DE DIAGNÓSTICO 
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RELEMBRANDO
ESTABILIDADE DA AMOSTRA: 
IMPORTANTE POIS PODE OCORRER MORTE E DEGRAÇÃO DAS FORMAS PARASITÁRIAS
 COM O TEMPO PÓS COLHEITA
CONSERVAÇÃO DA AMOSTRA
TEMPORARIAMENTE REFRIGERADAS 3 A 5 C CONSERVANDO OVOS, LARVAS E CISTOS
ENQUANTO LARVAS DE S.stercolaris e ancilostomídeos PERDEM MORFOLOGIA
MIF: MERTIOLATO-IODO- FORMALDEIDO
SAF: ACETÁTO DE SODIO-ACIDO ACÉTICO-FORMALDEIDO
APV: FIXADOR ALCOOL POLIVINÍLICO:
PAF: FENOL-ALCCOL-ETÍLICO-FORMALDEÍDO
LÍQUIDO DE SCHAUDINN 
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CONSERVAÇÃO
AMOSTRAS NÃO CONSERVADAS
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AMOSTRAS NÃO CONSERVADAS
TROFOZOÍTOS SE DESINTEGRAM DEVIDO A UMIDADE
 TEMP.ERATURA, PRESENÇA DE OXIGÊNIO
QUEDA DE 50% DA VIABILIDADE A
PARTIR DE 30 min
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AMOSTRAS NÃO CONSERVADAS
importante na diferenciação das larvas
S. stercoralis
Ovos típicos de Ansilostomideos
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CONSERVANTES
REFRIGERAÇÃO(3 a 5 C) temporária
OVOS CISTOS E OOCITOS : permanecem viáveis por vários dias
AMOSTRAS ENVIADAS AO LAB, EM ATÉ 24H
PERMITE A UTILIZAÇÃO DE DIFERENTES TÉCNICAS PARASITOLÓGICAS
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PRESERVAÇÃO DE AMOSTRAS FECAIS:
Refrigeração (3-5°C) - Preservação de ovos e cistos por vários dias
Larvas de S. stercoralis e de ancilostomídeos podem
 sofrer alterações morfológicas, assim como trofozoítos
 de protozoários
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CONSERVANTES AMOSTRA FECAL
SOLUÇÃO DE FORMOL( 5 a 10%)
PERFEITO PARA OVOS ,CISTOS, OOCITOS E LARVAS
FÁCIL PREPAÇÃO, TEMPO DE VALIDADE LONGA
SOLUÇÃO á 5%: Ainda permite o desenvolvimento de OVOS ASCARIDES, sem 
 distorcer as Larvas 
NÃO PROMOVE A CONSERVAÇÃO DE TROFOZOÍTOS
PODE INTERFERIR NO PCR
PROPORÇÃO
Fezes1:3 Fixador
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CONSERVANTES AMOSTRA FECAL
MIF: MERTIOLATO, IODO FORMOL
FIXAÇÃO, COLORAÇÃO
IDEAL PARA: Ovos, Cistos, Larvas, Oocitos e Trofozoítos)
PERMITE EXAME DIRETO SEM NECESIDADE DE OUTRA COLORAÇÃO
FÁCIL PREPARO E DE LONGA DURAÇÃO
PODE SER FEITO ESFREGAÇOS TEMPORÁRIO
ATENÇÃO: ESTOCAGEM POR LONGO PERÍODO PODE LEVAR A ALTERAÇÃO
 MORFOLÓGICAS DA FORMAS PARASITÁRIAS
PROPORÇÃO
Fezes1:1 Fixador
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	Formaldeído 5 ou 10%
	MIF (mertiolato-iodo-formaldeído)
	SAF (acetato de sódio-ácido acético-formaldeído)
	APV (álcool polivinílico)
	Schaudinn
	
Conservantes/Fixadores (1:3)
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EPF: EXAME PARASITOLÓGICO DE FEZES
EXAME PARASITOLÓGICO DE FEZES
TECNICAS QUALITATIVAS
TECNICAS QUANTITATIVAS
FEZES NÃO 
CONCENTRADAS
TÉCNICA DE
 CONCENTRAÇÃO
EXAME DIRETO
FLUTUAÇÃO
SEDIMENTAÇÃO
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EPF: MÉTODOS QUALITATIVOS
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EPF : EXAME MACROSCÓPICO DAS FEZES
CONSISTÊNCIA, COR,PRESENÇA OU ASUSÊNCIA DE SANGUE, MUCO, 
PROGLOTE, VERME ADULTO,
UTILIZA-SE SOMENTE AMOSTRAS NÃO FIXADAS
CONCISTÊNCIA DAS FEZES:
FROMADA
SEMI-FORMADA
PASTOSA
LÍQUIDA (DIARREICA)
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Tipo 1
Aparência: as fezes apresentam formato de bolinhas que costumam boiar no vaso sanitário.
Indicação: sinal de constipação severa
ESCALA DE BRISTOL
Tipo 2
Aparência: as fezes aparentam uma linguiça encaroçada com pequenas bolinhas aglomeradas.
Indicação: sinal de constipação leve e de trânsito digestivo lento
Tipo 3
Aparência: assim como no tipo 2, as fezes também apresentam formato de linguiça, mas com 
fissuras na superfície. 
Indicação: evacuação normal, sinal de ótimo trânsito intestinal
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ESCALA DE BRISTOL
Tipo 4
Aparência: mais uma vez, no tipo 4, as fezes se apresentam no formato de linguiça, mas 
com uma diferença: são suaves e macias.
Indicação: evacuação normal, sinal de ótimo trânsito intestinal
Tipo 5
Aparência: as fezes saem em pedaços, com bolhas suaves e bordas bem definidas. 
Indicação: tendência à diarreia
Tipo 6
Aparência: as peças das fezes são fofas e as bordas se apresentam de forma irregular.
Indicação: diarreia, sinal de trânsito intestinal desregulado
Tipo 7
Aparência: as fezes são inteiramente aquosas, ou seja, não há partes sólidas. 
Indicação: diarreia, sinal de trânsito intestinal desregulado
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ALGUNS FATORES PODEM INFLUENCIAR ESSAS CONDIÇÕES, COMO:
Alimentação desequilibrada e intolerâncias alimentares
Microbiota
Doenças intestinais, do aparelho digestivo, infecciosas, hormonais e de origem psicológica
Uso de medicamentos
Sedentarismo
ESCALA DE BRISTOL
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EPF : EXAME MACROCÓPICO DAS FEZES
SIMPLES OBSERVAÇÃO:
REVOLVER O MATERIAL FECAL COM BASTÃO DE VIDRO
ANOTAR AS CARACTERÍSTICAS OBSERVADAS:
Consistência das fezes (formadas, pastosas, diarréicas ou líquidas)
Aspecto fecal (normal, mucosa, sanguinolenta ou mucos-sanguinolenta)
Exame da superfície da amostra ( proglotes de Taenia, Ascaris ou Enterobius adulto.
FAZER A COLETA DE VERME ADULTO OU PROGLOTES DE Taenia sp
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TAMISAÇÃO
EMULSIONAR FEZES COM AGÚA E COAR COM PENEROA M ETÁLICA
PIA COM JATO FRACO DE AGUA CORRENTE
IDENTIFICAÇÃO VERME ADULTO: Ascaris lumbricoides, Enterobius vermicularisPROGLOTE Teaenia
Ocasiosnalmente outros helmintos: anccilostomídeos e Strongyloides stercoralis exige microscopia
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TAMISAÇÃO
COLOCAR AS PROGLOTES EM ÁCIDO ACÉTICO GLACIAL POR 15 MINUTOS
COMPRIMIR AS PROGLOTES ENTRE 2 LÂMINAS 
EXAMINAR AO MICROSCÓPIO ÓPTICO
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MÉTODO DA TINTA DA CHINA (tinta nanquim)
PERMNITE A DIFERENCIAÇÃO DAS PROGLOTES Taenia spp
 T solium (7-13) e
 T. saginata(15-20) ramificações 
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MÉTODO DA TINTA DA CHINA (tinta nanquim)
USAR LUVAS DURANTE TODO PROCEDIMENTO
COLOCAR, DURANTE VÁRIAS HORAS A PROGLOTE EM ÁGUA FRIA
(temperatura de geladeira)
3)SECAR A PROGLOTE, COLOCANDO-A EM UMA LÂMINA DE M0
4) TRANSPORTAR MATERIAL COM PINÇA, INJETAR TINTA DA CHINA COM SERINGA
E AGULHA HIPODÉRMICA ATRAVÉS DO PORO GENITAL
5)LAVAR EM ÁGUA CORRENTE RAPIDAMENTE E SECAR A PROGLOTE
6) COLOAR ENTE LÂMINAS COMPRIMINDO E AMARRANDO AS EXTREMIDADES
7) DESIDRATAR A PROGLOTE COM VÁRIAS PASSAGEN EM ALCOOL
( A 50% , 70%,90% ABSOLUTO)
8) CLARIFICAR A PROGLOTE ( 2 PASSAGENS EM XILOL OU TOLUOL)
9) MONTAR COM RESINA SINTÉTICA
10) CONTAR EM MICROSCOPIA DE DISSECAÇÃO
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IDENTIFICAÇÃO Teania sp
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EXAME MICROSCÓPIO DAS FEZES
EXAME DIRETO A FRESCO:
REALIZADO PRINCIPALMENTE PARA PESQUISA DE TROFOZOÍTOS EM
 FEZES DIARREICAS RECENTES
OBSERVAÇÃO DO TROFOZOÍTO VIVO
NUNCA UTILIZE AGUA CORRENTE OU DESTILADA: MATA TROFOZOÍTO
USAR SOLUÇÃO FISIOLÓGICA
TEM BAIXA SENSIBILIDAE
PERMITE RÁPIDA IDENTIFICAÇÃO DE INFECÇÃO MACIÇA
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PREPARO DO EXAME DIRETO A FRESCO
IDENTIFICAR UMA LÂMINA LIMPA COM LÁPIS
COLOCAR UMA GOTA DE SALINA NA LÂMINA
OBTER UMA PEQUENA QUANTIDA DA AMOSTRA COM UM PALÍTO
HOMOGEINIZAR A AMOSTRA COM A SALINA
COLOCAR A LAMÍNULA
OBSERVAR AO MICROSCÓPIO
TODA ÁREA DA LÂMINA DEVE SER OBSERVADA
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LEITURA CORRETA DA LÂMINA
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MÉTODOS QUALITATIVOS
SEDIMENTAÇÃO EXPONTÂNEA, LUTZ OU HOFFMAM PANS E JANER (HPJ)
PROCEDIMENTO SIMPLES, INDICADO PARA OVOS, CISTOS E LARVAS
GRANDE QUANTIDADE DE FEZES SÃO HOGEINIZADAS COM SORO FISIOLÓGICO 
OU AGUA DESTILADA
FILTAR EM GAZES
COLETAR SEDIMENTO APÓS 1 H OU
QUANDO SOBRENADANTE ESTIVER LIMPIDO
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SEIMENTAÇÃO EXPONTÂNEA ( HPJ)
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MÉTODO DE CONCENTRAÇÃO 
SEDIMENTAÇÃO EXPONTÂNEA (HPJ)
UTILIZAR ÁGUA DESTILADA ATÉ QUE O SOBRENADANTE 
FIQUE LIMPO
BARATO E DE FÁCIL IMPLANTAÇÃO
DEMORADO. SEDIMENTO COM GRANDE QUANTIDADE DE DETRITOS FECAIS
MÉTODO QUALITATIVO
Finalidade: Método de escolha para a pesquisa de ovos pesados, 
como os de Schistosoma mansoni, sendo muito útil também para 
a pesquisa de outros ovos e larvas de helmintos e cistos de protozoários.
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MÉTODO QUALITATIVO
MÉTODO DE CONCENTRAÇÃO 
SEDIMENTAÇÃO POR CENTRIFUGAÇÃO
FEZES FIXADAS
ÉTER LIPOFÍLICO
MÉTODO RAPIDO E COM MAIOR SENSIBILIDADE
BOA VISUALIZAÇÃO DAS FORMAS PARASITÁRIAS
(SEDIMENTO LIMPO)
CARO: CENTRÍFUGA E REAGENTES
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MÉTODO QUALITATIVO
MÉTODO DE CONCENTRAÇÃO FLUTUAÇÃO 
FLUTUAÇÃO: CISTOS. OOCITOS E OVOS LEVES
BASEA-SE NA DIFERENÇA DE DENSIDADE ENTRE AS FORMAS
PARASITÁRIAS EM SOLUÇÃO SATURADA (HIPERTONICA)
SOLUÇÕES CONTENDO SAL OU AÇUCAR DE DENSIDADE CONHECIDA
SHEATER: SACAROSE
FAUST: SULFATO DE ZINCO
WILLIS: CLORTEO DE SÓDIO
OCORRE A FORMAÇÃO DE MENISCO COM POUCO DETRITOS
ALGUMAS PRECISAM TER A DENSIDADE MEDIDA DIARIAMENTE
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MÉTODO QUALITATIVO
CENTRIFUGO-FLUTUAÇÃO FAUST
MÉTODO DE FAUST: FLUTUAÇÃO EM SULFATO DE ZINCO (d=1.18g/mL)
COLETA DE MATERIAL FLUTUANTE COM LAMÍNULA COLOCADA NA BOCA 
DO TUBO DE ENSAIO
O MATERIAL TAMBÉM PODE SER COLETADO
 COM ALÇA MICROBIOLÓGICA
IDEAL PARA OVOS LEVES, CISTOS E OOCITOS
OS MÉTODOS DE FLUTUAÇÃO NÃO SÃO ADEQUADOS PARA OVOS PESADOS
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MÉTODOS QUANTITATIVO
MÉTODO KATO KATZ
DESENVOLVIDO PARA PESQUISA DE OVOS DE S.mansoni
CONTAGEM DE OVOS DE HELMINTOS
INQUÉRITOS EPIDEMIOLÓGICOS
RESULTADO: NÚMERO DE OVOS/GRAMA DE FEZES
intensidade da infecção
PERMITE IDENTIFICAR A INTENSIDADE DA INFECÇÃO 
MÉDIA: 1-99 opg
MODERADA 100- 399 opg
ALTA : acima de 400 opg
S. mansoni
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MÉTODOS QUANTITATIVO
MÉTODO KATO KATZ
IDEAL: LEITURA DE 2 LÂMINAS, MÉDIA DE OVOS X 24
RÁPIDO E UTIL EM ÁREAS ENDÊMICAS DE POUCOS RECURSOS
NÃO PODE SER USADO EM FEZES DIARREÍCAS
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https://portal.fiocruz.br/video/metodo-kato-katz-original-por-naftale-katz
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PESQUISA DE LARVAS
BAERMANN-MORAESN e RUGAI
MIGRAÇÃO ATIVA DE LARVAS: TERMOTROPISMO
PESQUISA DE LARVAS ATIVAS DE Strongiloides stercolaris e ancilostomideos
(liberação intermitente de larvas)
MAIS SENSÍVEL DO QUE AS TÉCNICAS DE SEDIMENTAÇÃO
MÉTODO RUGAI: MAIS BARATO, MESMA EFICIÊNCIA
AMOSTRAS FRESCAS(SEM CONSERVANTES OU REFRIGERAÇÃO)
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MÉTODO QUALITATIVO
MÉTODO DE RUGAI
UTILIZA-SE AGUÁ AQUECIDA 40-45 C
DEIXAR EM REPOUSO POR 2 H
COLETAR SEDIMENTOS NO FUNDO DO CÁLICE
EXAMINAR ENTRE LÂMINA E LAMÍNULA
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MÉTODO QUALITATIVO
BERMANN-MORAES
ANALISE DO SEDIMENTO APÓS 1 H
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https://youtu.be/j-eTCD3JxHI
Enterobius vermicularis 
TÉCNICA DE GRAHAM (FITA ADESIVA)
Ovo: Apresenta formato da letra “D”, com 55 µm x 25 µm de tamanho, cor clara, casca espessa
 formada por membranas justapostas. 
Em seu interior pode ser encontrado massa embrionária ou larva já formada. 
É evidenciado com menor frequência em amostras fecais por técnicas de concentração
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TEST DE GRAHAM
https://www.youtube.com/watch?v=PhOF5az5_AI
VIDEO 1 KIT
VIDEO 2 
https://www.youtube.com/watch?v=J5vsNoVwVhE
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