LISTA DE EXERCÍCIOS 1

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UNIVERSIDADE ESTADUAL DE LONDRINA 
DEARTAMENTO DE BIOQUÍMICA E BIOTECNOLOGIA 
PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM BIOTECNOLOGIA 
Disciplina: 2 BIQ 048 Métodos Analíticos Aplicados à Biotecnologia 
 
LISTA DE EXERCÍCIOS – todos os cálculos devem ser apresentados, assim como 
as curvas de calibração 
1) Você tem preparada uma solução estoque de glicose 2 mg/mL, e a partir desta 
solução estoque preparar outras soluções mais diluídas para a construção de uma curva 
de calibração. Faça os cálculos e complete o quadro abaixo contendo as informações 
necessárias, considerando-se que o volume final destas novas soluções deve ser de 1 
mL: 
Concentração 
(mg/mL) 
Solução estoque 
de glicose (mL) 
Água destilada 
(mL) 
0,1 
0,2 
0,3 
0,4 
0,5 
0,6 
1,0 
 
 
2) Você tem preparada uma solução estoque de glicose 3,2 mg/mL, e precisa preparar 
20 mL de uma solução 100 g/mL. Como você procederia? 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
3) A partir de uma solução estoque de glicose 100 g/mL, preparar novas soluções mais 
diluídas para a construção de uma curva de calibração. Faça os cálculos e complete os 
volumes necessários para o preparo destas novas soluções considerando-se que o 
volume final deve ser de 0,5 mL. 
Concentração 
(g/mL) 
Solução estoque de 
glicose (mL) 
Água destilada (mL) 
20 
40 
60 
80 
100 
 
4) Você tem disponível em seu laboratório uma solução padrão de albumina 200 ppm, 
e precisa preparar uma série de soluções mais diluídas a partir desta solução estoque. 
a) Complete o quadro abaixo considerando-se que o volume final destas soluções deve 
ser de 1 mL. 
 
Concentração (ppm) Solução estoque de 
albumina (mL) 
Água destilada (mL) 
20 
40 
80 
120 
160 
200 
 
b) Que volume de solução estoque seria necessário se você tivesse que ter uma massa de 
50 μg de albumina? 
 
 
 
 
 
 
 
 
Highlight
5) Um composto X deve ser determinado por espectrofotometria UV/visível. Uma curva 
de calibração é construída a partir de soluções padrão de X com os seguintes 
resultados: 
 
 
 
 
 
 
 
 
Uma amostra de X forneceu uma absorvância igual a 0,50 nas mesmas condições de 
medida dos padrões. 
a) Utilizando qualquer programa de computador, obtenha a curva analítica com os dados 
fornecidos, bem como a equação da curva e o coeficiente de correlação. 
 
 
b) Calcule os fatores de calibração para cada ponto da curva de calibração 
 
c) Determine a concentração da amostra empregando a equação da reta e o fator de 
calibração. 
 
 
 
 
 
 
 
Concentração (ppm) Absorvância 
0,5 0,24 
1,5 0,36 
2,5 0,44 
3,5 0,59 
4,5 0,70 
Concentração (ppm) Absorvância Fator de calibração 
0,5 0,24 
1,5 0,36 
2,5 0,44 
3,5 0,59 
4,5 0,70 
Fator médio 
6) Na determinação de uma proteína pelo método de Hartree, a proteína reage com o 
reativo cupro-alcalino, formando um complexo, e numa segunda etapa, há redução dos 
sais de fosfomolibdato e fosfotungstato do reativo de Folin Ciocalteu pela tirosina 
presente nas proteínas. É um método válido para a determinação de proteínas totais 
uma vez que a tirosina ocorre em intervalos regulares nas sequências de aminoácidos 
das proteínas em geral. 
Considerando-se a curva de calibração abaixo, calcule: 
a) A equação da reta e o seu coeficiente de determinação. 
 
b) Os fatores de calibração para cada ponto da curva de calibração e o fator de 
calibração médio. 
 
 
 
 
c) A concentração de proteínas totais na amostra com o cálculo realizado pelo fator 
de calibração e pela equação da reta. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Concentração proteínas 
( µg/mL) 
Absorvância Fator de calibração 
20 0,120 
40 0,241 
80 0,470 
120 0,705 
160 0,805 
200 1,190 
Amostra 0,567 
7) A determinação de açúcares redutores em uma amostra pode ser realizada através 
do método de DNS (ácido dinitrosalicílico), que baseia-se na reação entre o açúcar 
redutor e o ácido 3,5-dinitrosalicílico (cor amarela), que é reduzido a um composto 
colorido avermelhado, o ácido 3-amino-5-nitrosalicílico, oxidando o monossacarídeo 
redutor. Considerando-se a curva de calibração abaixo, calcule: 
 
a) A equação da reta e o seu coeficiente de determinação. 
 
 
b) Os fatores de calibração para cada ponto da curva de calibração e o fator de 
calibração médio. 
 
c) A concentração de açúcares redutores na amostra com o cálculo realizado pelo 
fator de calibração e pela equação da reta. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Concentração glicose 
(mg/mL) 
Absorvância Fator de calibração 
0,1 0,065 
0,2 0,150 
0,3 0,212 
0,4 0,292 
0,5 0,360 
Amostra 0,315 
8) Uma outra amostra foi analisada quanto ao seu teor de açúcares redutores 
empregando-se o método do DNS e a mesma curva de calibração descrita acima, no 
entanto, o resultado da sua leitura de absorvância foi igual a 0,832. Considerando-se 
esse resultado, responda: 
a) O cálculo do teor de açúcares redutores poderia ser realizado nesta amostra 
considerando-se a curva de calibração apresentada? 
 
 
 
 
b) De que forma essa situação poderia ser resolvida? Explique. 
 
 
 
 
9) Deseja-se preparar uma solução 5% em massa de glicose, a partir de uma solução 
estoque de glicose a 8% (m/v). 
a) Qual o volume de solução a 8% (m/v) que deverá ser utilizado, para preparar 250 mL 
de solução a 5% em massa. 
 
 
 
 
 
 
10) Você precisa diluir algumas soluções estoque, como proceder nos casos abaixo: 
 
a) Diluição (1:10) - Você tem disponível para a diluição 0,5 mL de solução estoque, 
e o volume final da diluição deve ser de 2,5 mL 
 
 
 
 
b) Diluição (1:3) - Você tem disponível para a diluição 0,1 mL de solução estoque, 
e o volume final da diluição deve ser de 0,3 mL