Cromatografia: Técnica de Separação de Componentes

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Cromatografia 
 Cromatografia é um processo de separação e identificação de componentes de uma
mistura. 
 Essa técnica foi usada pela primeira vez como método científico por volta de 1903 pelo
cientista Mikhail Tsvet, para separar pigmentos coloridos de plantas, assim, é uma
técnica mais utilizada para separar elementos químicos orgânicos e bioquímicos com
grande familiaridades.
 A cromatografia pode ser dividida por tipos como líquida, gasosa, de troca iônica e de
afinidade, porém todos esses tipos empregam o mesmo princípio básico da
cromatografia, que independente do tipo ela possui duas fases: uma móvel e uma
estacionária. 
 Fase móvel: Fase que os componentes a serem isolados, movem-se por um solvente
fluído, que pode ser líquido ou gasoso. 
 Fase Estacionária: Fase fixa, em que o componente que está sendo separado ou
identificado na análise, irá se fixar na superfície de outro material líquido ou sólido. 
 OBS.: Para conseguir compreender a fundo as técnicas cromatográficas, é preciso
saber dois conceitos básicos e continuamente usados nessas técnicas. 
 Eluição: É dita a corrida cromatográfica, o quanto sua análise caminhou pela coluna
ou papel. 
 Eluente: É a fase móvel, ou seja, um tipo de solvente que vai interagir com a amostra
em análise e promover a separação dos componentes. 
 Desse modo, toda e qualquer análise cromatográfica, consiste na passagem da fase
móvel sobre a fase estacionária, seja em uma coluna, papel ou placa cromatográfica.
Fazendo com que os componentes da amostra sejam separados pela diferença de
afinidade através das duas fases (móvel e estacionária), por isso que a afinidade de
ambas as fases são diferentes, para que as substâncias das amostras se fixe e tenha
afinidade com a que é semelhante a ela, ocorrendo assim, a separação. Com isso, cada
um dos componentes da mistura da análise é seletivamente retido pela fase estacionária,
o que resulta em migração diferencial desdes componentes. 
 Assim, a força de adesão, também chamada de afinidades diferenciais, dos
componentes do analito que movem em direção a fase estacionária e móvel, resulta na
separação diferencial dos seus componentes. 
 A AFINIDADE é dada por duas propriedades principais das substâncias: ADSORÇÃO E
SOLUBILIDADE 
- Adsorção é a propriedade que permite a adesão dos componentes das misturas à fase
estacionária. Desse modo, quanto maior for a adsorção à fase estacionária, mais
lentamente a substância se moverá pela coluna.
- Solubilidade é a propriedade em que um certo componente da mistura em análise se
dissolve na fase móvel. Desse modo, quanto maior for a solubilidade dessa substância na
fase móvel, mais rapidamente a amostra “descerá” pela coluna cromatográfica.
 Logo, a adsorção e a solubilidade de uma molécula irão depender da fase estacionária e
móvel escolhidas. 
 
 Tipos de cromatografia
Seus tipos se divide dependendo da forma física empregada e da fase móvel e estacionária utilizada.
- FORMAS FÍSICAS DO SISTEMA CROMATOGRÁFICOS.
Cromatografia em coluna: É a técnica mais antiga, utilizada para separar componentes em duas
fases, sólida e líquida, baseada na capacidade de absorção e solubilidade. Nesse caso, a fase sólida é
a fase estacionária e a fase líquida é a fase móvel. Essa técnica ocorre em uma coluna de vidro ou
metal, geralmente com uma torneira na parte inferior. Assim, a coluna é preenchida por um
adsorvente adequado que irá permitir o fluxo ( passagem) do solvente.
 
cromatografia em coluna
 A polaridade do solvente utilizado é diferente da polaridade da substância utilizada para
preencher a coluna. 
 Exemplo: empacotar, fase estacionária, a coluna de sílica (polar) e a fase móvel ser
benzeno ( apolar ), assim a substâncias da amostra que forem mais polar ficaram mais
retidos na coluna e as mais apolares eluirão junto com a fase móvel. 
Cromatografia Planar: Esse tipo de cromatografia compreende a cromatografia em papel
e a cromatografia de camada delgada. 
- Cromatografia em Papel: É uma técnica líquido-líquido, uma vez que fase estacionária
nessa técnica é a água presente na celulose do papel. Recebe esse nome, porque a
separação e identificação ocorre na superfície de um papel de filtro.
- Cromatografia em camada delgada: É uma técnica líquido-sólido, no qual a fase líquida
ascende por uma camada fina de absorvente sobre um suporte, que geralmente é uma
placa de vidro colocada dentro de um recipiente fechado. Assim, ao possa que a fase
móvel ascende ela carrega junto a ela os componentes da mistura que possui mais
afinidade, ou seja, carrega os componentes que possui menor afinidade e interagiram
menos na fase estacionária, provocando assim a separação dos componentes dessa
mistura.
- FASE MÓVEL EMPREGADA
-Cromatografia gasosa: Essa técnica as substâncias são separadas por uma fase móvel
gasosa sobre um solvente. Essa tipo de técnica ocorre em um tubo estreito, por onde os
componentes da mistura passam por uma corrente de gás, que é a fase móvel. Já a fase
estacionária está no tupo, ou seja, cada tubo já vem uma fase estacionária determinada. 
 Os fatores que determinam a separação dos componentes são a estrutura química do
composto, a fase estacionária e a temperatura da coluna. 
-Cromatografia Líquida: Essa técnica, a fase estacionária é constituída de partículas
sólidas, no qual é atravessada pela fase móvel. 
Ela pode ser dividida em cromatografia líquida clássica, em que a coluna é preenchida
uma só vez, pois parte da amostra usualmente se adsorve de forma irreversível e
cromatografia líquida de alta eficiência, em que utiliza bombas de alta pressão para a
eluição da fase móvel, fazendo com que essa fase possa migrar com uma velocidade
razoável através d coluna, possibilitando a análise de várias amostras em pouco tempo. 
-FASE ESTACIONÁRIA EMPREGADA: 
-Fase estacionária Líquida: o líquido é adsorvido sobre o suporte sólido
-Fase estacionária Sólida: quando a fase fixa é um sólido.