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Universitária: Bruna Lais dos Santos Tema: MICROBIOLOGIA BÁSICA Alcinópolis MS - 2022 Sumário 1.0 Lavagem das mãos 4 1.1 Reflexão sobre a importância da lavagem das mãos nos serviços de saúde 4 1.2 Pesquisa da técnica correta da lavagem das mãos de acordo com o Ministério da Saúde 5 1.3 Preparo do etanol 70% 6 2.0 Preparo da coloração de Gram 7 2.1 Pesquisa da técnica da Coloração de Gram 7 2.3 diferenças entre as bactérias Gram-positivas e Gram-negativas 8 3.0 Microscopia de fungos filamentosos e leveduriformes 9 3.1 A importância dos fundos na vida dos seres humanos 10 4.0 Antibiograma 12 4.1 Método de disco difusão (Método de Kirby Bauer) 12 4.2 Vantagens e desvantagens do método de disco-difusão 13 4.3 Importância do método disco-difusão 14 4.4 Consideração final 14 Microbiologia Básica -Resumo A microbiologia é o ramo da biologia que estuda os microrganismos. Microrganismos são pequenas criaturas cujo tamanho não permite que os humanos os observem a olho nu. Portanto, eles só podem ser vistos ao microscópio. O termo microbiologia vem de uma combinação das palavras gregas mikros, "pequeno", bios e logos "o estudo da vida". Assim, o estudo da microbiologia inclui a identificação, morfologia, estilo de vida, fisiologia e metabolismo dos microrganismos, e sua relação com o meio ambiente e outras espécies. Em geral, os microrganismos contribuem para a fertilização do solo, reciclagem de materiais e participam de ciclos biogeoquímicos. Eles ainda podem ser usados para fazer produtos como iogurte, vinho, queijo, vinagre e pão. Existem também microrganismos patogênicos que causam doenças em humanos, animais e plantas. 1.0 Lavagem das mãos 1.1 Reflexão sobre a importância da lavagem das mãos nos serviços de saúde As infeções relacionadas com os cuidados de saúde continuam a representar um grave problema de saúde pública no país, e se pretender entrar com sucesso neste ramo de atividade, deveríamos conhecer, por exemplo, 5 momentos de lavagem das mãos principais. Fonte: Conteúdos, Saúde e Bem-estar 2020 A falta de cuidados adequados aumenta a morbimortalidade do paciente, além de aumentar os custos de internação por tratamento. Não à toa, a higienização das mãos é considerada uma medida mais impactante e tem se mostrado eficaz na prevenção de infecção e disseminação de micróbios. Pesquisas mostram que maior adesão às práticas de higienização das mãos está associada a menores taxas de infecção nos serviços de saúde. Apesar da simplicidade da ação, a não adesão a essa prática pelos profissionais de saúde ainda é considerada um desafio de controle de infecção no serviço de saúde. (ANVISA, 2006) Por conta da covid-19 pandemia mundial de 2020 até o momento foi proposto pela OMS o dia 5 de maio dia mundial de higiene das mãos e no dia 15 é constituído dia nacional de controle de infecções ambas as datas com utilização do álcool gel/espuma a 70%. O álcool gel se mostra mais eficaz na eliminação de microrganismos das mãos em Relação à lavagem das mãos com sabonete comum. Ele é capaz de eliminar 99% dos microrganismos e se mostra superior à lavagem das mãos com sabonete comum que pode eliminar apenas 50% dos germes. 1.2 Pesquisa da técnica correta da lavagem das mãos de acordo com o Ministério da Saúde As Mãos é a principal fonte de transmissão de infecções de microrganismos principalmente para profissionais da saúde durante assistência prestada aos pacientes. A nossa pele é um reservatório de microrganismos que pode transferir de uma para outra via contato físico. Recentemente, o termo 'lavar as mãos’ foram substituídas por 'higienização das mãos' o termo engloba desde a higienização simples até cirúrgica. Por que deveríamos higienizar as mãos? Remoção de suor, sujeira, pelos, células descamativas, oleosidade e microrganismos, fazendo a higienização é possível interromper a transmissão de infecções, a seguir o passo a passo correção para higienização das mãos. · 1 - Abra a torneira e molhe as mãos, evitando encostar na pia. · 2 - Aplique na palma da mão quantidade suficiente de sabonete líquido para cobrir todas as superfícies das mãos (seguir a quantidade recomendada pelo fabricante). · 3 - Ensaboe as palmas das mãos, friccionando-as entre si. · 4 - Esfregue a palma da mão direita contra o dorso da mão esquerda (e vice-versa) entrelaçando os dedos. · 5 - Entrelace os dedos e friccione os 5. espaços interdigitais. · 6 - Esfregue o dorso dos dedos de uma mão com a palma da mão oposta (e vice-versa), segurando os dedos, com movimento de vai-e-vem. · 7 - Esfregue o polegar direito, com o auxílio da palma da mão esquerda (e vice-versa), utilizando movimento circular. · 8 - Friccione as polpas digitais e unhas da mão esquerda contra a palma da mão direita, fechada em concha (e vice-versa), fazendo movimento circular. · 9 - Esfregue o punho esquerdo, com o auxílio da palma da mão direita (e vice-versa), utilizando movimento circular. · 10 - Enxágue as mãos, retirando os resíduos de sabonete. Evite contato direto das mãos ensaboadas com a torneira. · 11 - Seque as mãos com papel-toalha descartável, iniciando pelas mãos e seguindo pelos punhos. 1.3 Preparo do etanol 70% Para realização do álcool 70% é feito via cálculos matemáticos para misturar de substancias dessa forma, para se preparar 1 litro de solução de cloreto de sódio a 1g/L, a partir de uma solução estoque a 10g/L, são necessários 100mL da solução estoque, que será diluída com 900mL de solvente. O raciocínio demonstrado pode ser utilizado para a produção de soluções de etanol 70%, a partir de soluções estoques na concentração de 96%. A solução de álcool etílico 70% é muito utilizada na lavagem de mãos com solução antisséptica, e também como desinfetante de superfícies e objetos. O etanol apresenta maior eficácia quando em solução com água, pois sua diluição previne a evaporação precoce da substância, antes de sua atuação no microrganismo. 2.0 Preparo da coloração de Gram 2.1 Pesquisa da técnica da Coloração de Gram Esta é uma técnica de coloração secular, descrita pelo médico dinamarquês Hans Christian Joachim Gram em 1884, que envolve a preparação de um esfregaço para microscopia em uma lâmina de vidro, preferencialmente com mais pus/sangue na parte da amostra. No caso de fluidos corporais, a cito centrifugação pode ser realizada para concentrar o material para melhor visualização estrutural. As amostras foram então mantidas em ar ambiente para secar e fixadas em metanol ou por aquecimento suave. Adicione o corante (Crystal Violet) por um a dois minutos, depois insira Lugo, novamente por um a dois minutos. A partir desta reação, forma-se um complexo iodo-pararosalina na parede celular da bactéria, que se cora de púrpura (as bactérias Gram-positivas e Gram-negativas retêm o corante nesta fase). Na etapa seguinte, após a lavagem das lâminas, inicia-se a etapa de descoloração, adicionando ao material uma solução de álcool-éter ou álcool-acetona. Neste momento, devido à diferença na estrutura da parede celular (as camadas de peptidoglicano e ácido teicóico são mais espessas nas bactérias Gram-positivas, enquanto as camadas nas bactérias Gram-negativas são mais finas e a proporção lipídica é maior), as bactérias Gram-positivas têm resistência. Mude a cor, mantenha o corante, mantenha o roxo. As paredes celulares finas e lipídicas das bactérias Gram-negativas, por outro lado, fazem com que elas percam seu corante e se tornem incolores quando expostas ao álcool. Na etapa de contra coloração, após a lavagem das lâminas com água, adiciona-se Safranina (corante vermelho), responsável pela coloração vermelha das bactérias gram-negativas. Faça uma nova lavagem com água e depois seque o material com cuidado. A lâmina foi então colocada sob o microscópio e visualizada primeiro na objetiva de baixa ampliação e depois na objetiva de imersão em óleo. Exemplos de bactérias, suas características morfotinturiais e respectivas infecções: Cocos Gram-positivos: Staphylococcus aureus (infecções da pelee tecidos moles, síndrome do choque tóxico, bacteremia); Streptococcus pyogenes (infecções da pele e tecidos moles, faringite e suas complicações não supurativas), Cocci agalactiae (meningite, bacteremia neonatal); Streptococcus pneumoniae (pneumonia comunitária, meningite), Enterococcus faecalis e Enterococcus faecalis (bacteremia e infecções do trato urinário nosocomiais). Cocos Gram-negativos: Neisseria meningitidis (meningite); Neisseria gonorrhoeae (gonorréia); Moraxella catarrhalis (otite média, sinusite, pneumonia em crianças). Bacilos Gram-positivos: Listeria monocytogenes (meningite, bacteremia); Nocardia (pneumonia, infecção de tecidos moles, abscesso cerebral); Bacillus anthracis entre outros Bacilos Gram-negativos: Escherichia coli (infecção do trato urinário, diarreia, bacteremia); Klebsiella pneumoniae e Klebsiella oxytoca (infecção do trato urinário, diarreia, bacteremia) entre outros. Apesar dessa técnica ser antiga existe algumas limitações de identificação bacteriana para a coloração do Gram, sendo bastante utilizado na atualidade pela microbiologia. A principal vantagem se destaca na sua agilidade, facilidade e com baixo custo de execução para resultados de informações valiosas que orienta o diagnóstico presuntivo. 2.3 diferenças entre as bactérias Gram-positivas e Gram-negativas Há diversos graus de permeabilidade do Gram Positivo e Negativo. As bactérias Gram-positivas possuem uma espessa camada de peptidoglicano (um polímero de açúcares e aminoácidos que forma uma rede na área externa da membrana celular bacteriana) na parede celular, de modo que retêm o violeta cristal, apresentando a cor púrpura. Exemplos de Bactérias Gram-Positivas: Bacillus, Nocardia, Clostridium, Propionibacterium, Actinomyces, Enterococcus, Cornyebacterium, Listria, Lactobacillus, Gardnerella, Mycoplasma, Staphylococcus, Streptomyces, Streptococcus. As bactérias Gram-negativas têm paredes de peptidoglicano mais finas, não retêm o cristal violeta durante a descoloração e aparecem vermelhas durante a coloração final. Exemplos de Bactérias Gram-Negativa: Escherichia, Helicobcater, Hemophilus, Neisseria, Klebsiella, Enterobacter, Chlamydia, Pseudomonas, Salmonella, Shigella. 3.0 Microscopia de fungos filamentosos e leveduriformes Pode-se dizer que a diferença entre leveduras e fungos filamentosos está diretamente relacionada à aparência de suas colônias. As colônias de levedura são conhecidas por serem moles e compostas por microrganismos unicelulares com funções vegetativas e reprodutivas. A colônia micelial composta por hifas pode ser algodonosa, aveludada ou mesmo pulverulenta. Aqui estão alguns fatos interessantes sobre fungos: Os fungos são organismos considerados eucarióticos, possuem um único núcleo, O citoplasma dos fungos contém mitocôndrias e retículo endoplasmático rugoso. Os fungos são heterótrofos que se alimentam de matéria orgânica morta ou viva. As células que compõem o fungo têm vida independente e não se juntam para formar um verdadeiro tecido. Os fungos do gênero Cryptococcus possuem estrutura capsular com propriedades polissacarídicas e envolvem paredes celulares. Os principais componentes das paredes celulares dos fungos são hexoses e hexaminas, que por sua vez formam mananas, dukans e galactanas. As paredes celulares de alguns fungos são ricas em quitina (N-acetilglucosamina). Exemplos de fungos são: Levedura (mofo) cogumelo fermento mofo Brigadeiro Penicillium fungo Bem, depois de tantas explicações, podemos dizer que você já sabe que a diferença entre leveduras e fungos filamentosos está diretamente relacionada à aparência de suas colônias. 3.1 A importância dos fundos na vida dos seres humanos Por causa do fungo somos capazes de fazer pães e bebidas alcoólicas através do processo de fermentação, os fungos trazem muitos benefícios para a vida das pessoas. No entanto, você precisa ter cuidado porque, embora os fungos sejam bons, eles também podem causar mofo em alimentos e mofo em objetos. Às vezes, alguns fungos formam associações benéficas com alguns hospedeiros, um processo conhecido como reciprocidade. Um exemplo disso são os líquenes, quando os fungos estão associados a certos tipos de algas. Os cogumelos comestíveis mais consumidos são os cogumelos, como shiitake, shiitake e cogumelos, em muitos pratos de restaurantes finos e receitas gourmet. Estes cogumelos são ricos em valor nutricional e baixos em lipídios. São uma boa opção para quem busca uma alimentação saudável com benefícios para a saúde como o aumento do folato no organismo. Como mencionado anteriormente, durante a fermentação temos pão e bebidas alcoólicas como cerveja e vinho. No pão usamos o fermento (fermento) que vem da fermentação do açúcar que fará o pão crescer. As bebidas também usam um processo de fermentação. Para fazer vinho, as uvas são fermentadas e a cerveja é feita de cevada. Os fungos existem na medicina porque são usados para fazer certos medicamentos porque podem produzir compostos que podem matar certas bactérias. Esses compostos são usados na fabricação de antibióticos, como a penicilina, para combater doenças infecciosas causadas por bactérias. Ainda assim, é importante lembrar que eles são a causa de muitas doenças, como doenças fúngicas, candidíase e congelamento. Nas plantas, eles geralmente causam ferrugem. Por isso, é sempre importante ter cuidado com esse tipo de organismo. Os fungos podem ser classificados em 3 grupos a seguir: Os Zigomicetos, os Ascomicetos e os Basidiomiceto. A visualização de estruturas fúngicas é essencial à identificação final desse micro-organismo, com o auxílio de uma alça em “L”, deve-se retirar uma pequena porção da amostra biológica a ser analisada e, já na lâmina previamente com hidróxido de potássio (KOH) a 20%-40%, fazer a suspensão em círculos suavemente. 4.0 Antibiograma 4.1 Método de disco difusão (Método de Kirby Bauer) O teste de suscetibilidade antimicrobiana é um dos testes mais importantes nos laboratórios de microbiologia clínica, pois avalia a suscetibilidade dos microrganismos a diferentes agentes antimicrobianos. Os resultados desses testes afetam diretamente a escolha da terapia antimicrobiana e, portanto, testes sem o controle de qualidade adequado podem determinar o uso de antimicrobianos inadequados, resultando em falha do tratamento e risco ao paciente. O constante surgimento de novos mecanismos bacterianos de resistência antimicrobiana desencadeou uma corrida na indústria farmacêutica para produzir e lançar um número cada vez maior de novos compostos, complicando os testes de suscetibilidade. Devido à complexidade dos mecanismos de resistência aos medicamentos, é cada vez mais difícil selecionar medicamentos apropriados para testes de suscetibilidade e terapia antimicrobiana. O teste de difusão em placa de ágar foi descrito por Bauer e Kirby em 1966. Este teste fornece resultados qualitativos. É um dos métodos de suscetibilidade a drogas mais fáceis, confiáveis e mais comumente usados no laboratório de microbiologia. A justificativa é que o agente antimicrobiano se difunde do disco impregnado com o mesmo agente antimicrobiano para a superfície do ágar. Após semear um inóculo bacteriano de aproximadamente 1 a 2 x 108 UFC/mL, teste dispensando discos de papel de filtro impregnados com uma concentração fixa de agente antimicrobiano em placas de ágar. Para evitar distrações, que podem dificultar a leitura e interpretação dos halos pós-eclosão, padronizou: Em uma placa de 150 mm, devem ser colocados no máximo 12 discos; Em uma placa de 90 mm, até 5 discos. Incubar a placa em temperatura ambiente ou 5 a 7% de CO2 a 35°C por 18 a 24 horas antes de determinar os resultados. 4.2 Vantagens e desvantagens do método de disco-difusão Vantagens: fácil execução; reprodutibilidade; utilização de reagentes de baixo custo; resultados de fácil interpretação clínica; flexibilidade quanto à escolha dos antimicrobianos; não requer utilização de equipamentos especiais. Desvantagens: falta de mecanização ou automação pararealização deste teste; ausência de padronização do método para alguns microrganismos e agentes antimicrobianos, por exemplo: o S. pneumoniae versus ceftriaxona, que deverá ser avaliado por um método quantitativo; este método pode não ser adequado para a detecção de mecanismos de resistência resultantes da produção de beta-lactamases, por exemplo: o enterococo versus ampicilina, ou outros mecanismos mais complexos, como o estafilococo com sensibilidade diminuída aos glicopeptídeos. 4.3 Importância do método disco-difusão As bactérias são parte integrante da vida na Terra. Eles estão intrinsecamente ligados à vida dos organismos, organismos e meio ambiente. Muitos são benéficos para seus hospedeiros (humanos, animais, plantas) e fornecem nutrição ou proteção contra patógenos e doenças. Fazem parte do corpo humano: cobrem a pele, as mucosas e os intestinos, etc. Eles são responsáveis pelo processo de decomposição da matéria orgânica. No processo, os gases e nutrientes que eles liberam são reutilizados por outros organismos. Um dos usos mais antigos das bactérias é fermentar o leite para produzir iogurte, queijo e coalhada. Justamente por serem pequenas e simples, e terem um tempo de reprodução curto – minutos ou horas – as bactérias se multiplicam em alta velocidade e são capazes de responder rapidamente às mudanças do ambiente e se tornar resistentes a substâncias nocivas. 4.4 Consideração final As bactérias são parte integrante da vida na Terra. Eles estão intrinsecamente ligados à vida dos organismos, organismos e meio ambiente. Muitos são benéficos para seus hospedeiros (humanos, animais, plantas) e fornecem nutrição ou proteção contra patógenos e doenças. Fazem parte do corpo humano: cobrem a pele, as mucosas e os intestinos, etc. Eles são responsáveis pelo processo de decomposição da matéria orgânica. No processo, os gases e nutrientes que eles liberam são reutilizados por outros organismos. Um dos usos mais antigos das bactérias é fermentar o leite para produzir iogurte, queijo e coalhada. Justamente por serem pequenas e simples, e terem um tempo de reprodução curto – minutos ou horas – as bactérias se multiplicam em alta velocidade e são capazes de responder rapidamente às mudanças do ambiente e se tornar resistentes a substâncias nocivas. Referências Acesso 29/03/2022 - https://www.escoladapaz.com.br/blog/higienizacao-das-maos-e-sua-importancia-para-a-saude/ Acesso 29/03/2022 - https://www.saude.ce.gov.br/2020/03/03/saude-orienta-sobre-importancia-da-higienizacao-das-maos/ Acesso 29/03/2022 - https://www.saude.ce.gov.br/2020/03/03/saude-orienta-sobre-importancia-da-higienizacao-das-maos/ Acesso 29/03/2022 - https://brasilescola.uol.com.br/saude-na-escola/como-fazer-alcool-70-para-limpar-as-cantinas-escolares.htm Acesso 04/04/2022 - http://www.provida.ind.br/site/index.php/bacterias/bacterias/122-tecnica-de-gram.html Acesso 04/04/2022 - https://kasvi.com.br/bacteria-gram-positiva-gram-negativa/#:~:text=Diferen%C3%A7a%20entre%20bact%C3%A9ria%20Gram%2Dpositiva%20e%20Gram%2Dnegativa&text=J%C3%A1%20as%20bact%C3%A9rias%20Gram%2Dnegativas,no%20processo%20de%20colora%C3%A7%C3%A3o%20final Acesso 08/04/2022 - https://siteantigo.portaleducacao.com.br/conteudo/artigos/conteudo/fungos/1674 Acesso 08/04/2022 - https://ibapcursos.com.br/caracteristicas-dos-fungos-filamentosos-e-leveduriformes/ Acesso 08/04/2022 - https://kasvi.com.br/fungos-doencas-diagnostico-medico/ Acesso 10/04/2022 - http://www.profbio.com.br/aulas/ac2_06.pdf Acesso 10/04/2022 - http://www.sbpc.org.br/upload/conteudo/320070131164715.pdf Acesso 10/04/2022 - https://www.scielo.br/j/jbpml/a/k3Dgs4R4YM6L8RZ7wrpLHKQ/?lang=pt
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