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Laboratório Virtual Biotecnologia e Bioinformática

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ETANOL 70% E LAVAGEM DAS MÃOS 
PRÉ TESTE 
 
1. “Usamos as mãos praticamente para tudo que fazemos e a pele é um 
reservatório de diversos microorganismos. Por meio do contato direto 
(pele com pele) ou indireto (toque em objetos e superfícies contaminadas), 
esses microrganismos podem se transferir de uma superfície para outra. 
As mãos são um veículo eficiente para a transmissão de infecções e 
bactérias.” 
A prevenção de doenças está em suas mãos. Hospital Sírio Libanês. 
Disponível em: 
https://www.hospitalsiriolibanes.org.br/hospital/Paginas/prevencao-
doencas-esta-suas-maos.aspx. Acesso em: 27 jan. 2021. 
Em relação ao processo de higienização das mãos com água e sabão, 
pode-se considerar que: 
B. O procedimento de lavagem das mãos com água e sabão deve durar de 40 
a 60 segundos; 
o procedimento de lavagem das mãos demora de 40 a 60 segundos para ser 
realizado, considerando a lavagem de toda superfície da mão e punho. 
 
2. “Na prática assistencial, com frequência, os materiais semicríticos como 
lâminas e cabos de laringoscópios, rinovideoscópios e canetas 
odontológicas de alta rotação são desinfetados com álcool 70% (p/v), um 
desinfetante de nível intermediário, com ou sem limpeza prévia, justificado 
pela praticidade, acessibilidade e baixo custo.” RIBEIRO, M.M.; NEUMANN, 
V.A.; PADOVEZE, M.C.; GRAZIANO, K.U. Eficácia e efetividade do álcool na 
desinfecção de materiais semicríticos: revisão sistemática. Rev. Latino-
Americana de Enfermagem. v. 23(4). 2015. 
p.742. 
Disponível em: https://www.scielo.br/pdf/rlae/v23n4/pt_0104-1169-rlae-23-
04-00741.pdf. Acesso em 27 jan. 2021. 
Considerando uma solução estoque de etanol 85%, indique o volume dessa 
solução e o volume de água que deverá ser acrescentado para a produção 
de um litro de etanol 70%: 
C. 823,5 mL da solução estoque e 176,5 mL de água. 
Ao aplicar a fórmula C1 x V1 = C2 x V2, nós obtemos: 850 mL/L x V1 = 700 mL/L 
x 1000 mL. Dessa forma: V1 = 700 mL/L x 1000 mL / 850 mL, resultando em 
823,5 mL de solução estoque com mais 176,5 mL de água, para a produção de 
1 L de solução de etanol 70%. 
 
3. “Antissépticos, frequentemente chamados de germicidas, são agentes 
químicos que matam ou inibem o crescimento de microrganismos, sendo 
https://www.hospitalsiriolibanes.org.br/hospital/Paginas/prevencao-doencas-esta-suas-maos.aspx.
https://www.hospitalsiriolibanes.org.br/hospital/Paginas/prevencao-doencas-esta-suas-maos.aspx.
https://www.scielo.br/pdf/rlae/v23n4/pt_0104-1169-rlae-23-04-00741.pdf.
https://www.scielo.br/pdf/rlae/v23n4/pt_0104-1169-rlae-23-04-00741.pdf.
atóxico o suficiente para serem utilizados em tecidos vivos”. 
MADIGAN, M. T. et al. Microbiologia de Brock. 14. ed. Porto Alegre: Artmed, 
2016. p. 177. 
O etanol 70% é considerado um antisséptico por atuar: 
B. Dissolvendo os fosfolipídios da membrana plasmática; 
o etanol 70% atua dissolvendo os lipídios da membrana plasmática dos 
microrganismos das células, ocasionando a morte. 
 
4. “Em termos biológicos, os álcoois, em especial o etanol, se apresentam 
como agentes de ação biológica de largo espectro, podendo agir sobre 
bactérias, fungos e vírus.” LIMA, M. L. S. O.; ALMEIDA, R. K. S.; FONSECA, 
F. S. A.; GONCALVES, C. C. S. A química dos saneantes em tempos de 
Covid-19: você sabe como isso funciona? Química Nova [online]. 2020, 
vol.43, n.5. p .668-678. Disponível em: 
http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0100-
40422020000500668&lng=pt&nrm=iso. Acesso em 27 jan. 2020. 
A solução de etanol 70% pode ser utilizada: 
B. Como desinfetante de superfícies; 
o etanol 70% atua como desinfetante, reduzindo a quantidade de 
microrganismos de superfícies e objetos. 
 
5. “A diluição de soluções é uma técnica empregada quando se deseja 
preparar uma solução a partir de uma outra solução, mais concentrada, do 
soluto de interesse. É realizada utilizando-se um determinado volume 
(previamente calculado) da solução concentrada, diluindo-o com água 
destilada até atingir um volume de interesse.” 
CRUZ, G. N. Preparo de soluções por diluição. Disponível em: 
http://cursobioquimica.iq.usp.br/paginas_view.php?idPagina=36&preview
3=UfBxqUGAaDtI7p9VO1TOpb1BQOwIQPcWy6qscpyyR1w=#.YBGP0ehKjI
U. Acesso em: 27 jan. 2021. 
 
Os utensílios de laboratório necessários para a realização de soluções 
são: 
A. proveta, bastão de vidro e funil; 
A proveta é utilizada para medir o volume dos reagentes, o bastão de vidro para 
misturá-los e o funil para direcionar e evitar o desperdício ao despejar os 
reagentes na proveta. 
 
PÓS TESTE 
 
1. “Antissépticos, frequentemente chamados de germicidas, são agentes 
químicos que matam ou inibem o crescimento de microrganismos, sendo 
atóxicos o suficiente para serem utilizados em tecidos vivos” (MADIGAN et 
http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0100-40422020000500668&lng=pt&nrm=iso.
http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0100-40422020000500668&lng=pt&nrm=iso.
http://cursobioquimica.iq.usp.br/paginas_view.php?idPagina=36&preview3=UfBxqUGAaDtI7p9VO1TOpb1BQOwIQPcWy6qscpyyR1w=#.YBGP0ehKjIU.
http://cursobioquimica.iq.usp.br/paginas_view.php?idPagina=36&preview3=UfBxqUGAaDtI7p9VO1TOpb1BQOwIQPcWy6qscpyyR1w=#.YBGP0ehKjIU.
http://cursobioquimica.iq.usp.br/paginas_view.php?idPagina=36&preview3=UfBxqUGAaDtI7p9VO1TOpb1BQOwIQPcWy6qscpyyR1w=#.YBGP0ehKjIU.
al., 2016). 
Considerando o texto acima, pode-se considerar como antisséptico: 
B. o etanol 70%; 
O etanol 70% pode ser considerado uma substância antisséptica, por inibir o 
crescimento bacteriano e ser atóxico para as mucosas dos seres vivos. 
 
2. “A membrana plasmática é uma estrutura encontrada em todos os tipos 
de células. Uma de suas principais propriedades é a permeabilidade 
seletiva, que consiste na capacidade de selecionar quais substâncias 
entram ou saem do interior das células” (LIMA & SCHADECK, 2020). 
Considerando o texto acima, o etanol 70% é considerado uma substância 
desinfetante por: 
B. modificar a permeabilidade da membrana dos microrganismos, por meio da 
solubilidade dos lipídeos que a constituem; 
O etanol 70% atua dissolvendo os lipídeos da membrana celular e, 
consequentemente, modificando a permeabilidade dessa estrutura. 
 
3. “A diluição de soluções é uma técnica empregada quando se deseja 
preparar uma solução a partir de uma outra solução, mais concentrada, do 
soluto de interesse. É realizada utilizando-se um determinado volume 
(previamente calculado) da solução concentrada, diluindo-o com água 
destilada até atingir um volume de interesse” (CRUZ, [s. d.]). 
Com base nesse texto, para se realizar uma diluição é necessário: 
A. conhecer a concentração da solução estoque; 
Para realizar a diluição de uma solução, é necessário saber a concentração da 
solução estoque para calcular o volume da solução a ser utilizada para produzir 
a solução final. 
 
4. “Na área da saúde, 'álcool' refere-se a dois compostos químicos solúveis 
em água – álcool etílico (etanol) e álcool isopropílico – que têm 
características germicidas em função de suas concentrações. Recordo 
quando estava na graduação e aconselhei meu pai a comprar álcool 
(etanol) 70%, pois seu uso seria mais eficiente na desinfecção do que o 
álcool 99,6% (absoluto)” (ANALYTICA, [s. d.]). 
Considerando o texto acima, pode-se julgar que: 
C. o conselho é verdadeiro, pois o etanol 70% tem maior capacidade de 
penetração nos microrganismos. 
O etanol 70% tem menor capacidade de volatização e, portanto, permanece na 
superfície por mais tempo, possibilitando melhor atuação. Além disso, a água 
facilita a entrada do etanol nas células. 
 
5. "A campanha mundia 'Salve vidas: higienize suas mãos', estimulada 
pela Organização Mundial da Saúde (OMS) e apoiada pela Agência Nacional 
de VigilânciaSanitária (Anvisem 2019, tem como tema: 'cuidado seguro 
para todos está nas suas mãos'" (BRASIL, 2019). 
A lavagem correta das mãos pelos profissionais da saúde é importante, 
pois: 
B. reduz a transmissão de doenças nos serviços assistenciais de saúde; 
A lavagem das mãos reduz a transmissão de doenças nos serviços assistenciais 
de saúde, por reduzir a quantidade de microrganismos que podem ser 
patogênicos. 
 
VISUALIZAÇÃO DE CÉLULAS SANGUÍNEAS 
 
PRÉ TESTE 
 
1. “Em um adulto, o volume do sangue é de aproximadamente 5L. O tecido 
sanguíneo é constituído pelas células sanguíneas: os eritrócitos (hemácias 
ou glóbulos vermelhos), as plaquetas, os leucócitos (ou glóbulos brancos), 
que são os neutrófilos, eosinófilos, basófilos, monócitos e linfócitos, e pelo 
plasma, um líquido com compostos orgânicos e inorgânicos”. 
 MONTANARI, T. Histologia: texto, atlas e roteiro de aulas práticas [recurso 
eletrônico]. 3. ed. Porto Alegre: Edição do Autor, 2016. p. 77. Disponível 
em: https://www.lume.ufrgs.br/bitstream/handle/10183/147986/001002350.
pdf?sequence=1. Acesso em: 18 jan. 2020. 
Ao analisar um esfregaço sanguíneo, Thiago encontrou uma célula rara, 
em que os grânulos citoplasmáticos são bem corados e granulosos, 
dificultando a observação do núcleo dessas células. Ao consultar um atlas 
de histologia, ele concluiu que: 
C. a célula era um eosinófilo. 
Os eosinófilos são leucócitos granulócitos, que apresentam granulações no 
citoplasma. No entanto, esses grânulos não impedem a visualização do núcleo. 
 
2. “O exame microscópico do sangue pode ser feito em esfregaço delgado 
(distendido) [...]. Além do baixo custo, ambas permitem identificar, com 
facilidade e precisão, a espécie do plasmódio. Esses métodos também 
possibilitam quantificar a intensidade do parasitismo, mediante a 
determinação da parasitemia por volume (µl ou mm3) de sangue”. 
BRASIL. Ministério da Saúde. Secretaria de Vigilância em Saúde. Manual 
de diagnóstico laboratorial da Malária. Brasília: Ministério da Saúde, 2005. 
p. 19. 
Conforme o texto acima, a análise microscópica do sangue pode ser 
utilizada no diagnóstico de doenças. Ao avaliar uma distensão sanguínea 
no microscópio, observou-se uma grande quantidade de leucócitos 
maduros na lâmina, que pode ser uma indicativa de: 
A. processos inflamatórios; 
Os leucócitos atuam na mediação dos processos inflamatórios, promovendo a 
defesa do organismo a agentes patogênicos, tais como bactérias. 
 
3. “A despeito da definição atual em química para base e ácido (base é a 
substância capaz de aceitar prótons, e ácido é aquela que doa prótons), 
tradicionalmente os corantes catiônicos são referidos como básicos, e os 
aniônicos, como ácidos. Nesse caso, corante básico é aquele capaz de 
formar uma ligação eletrostática com grupos carregados negativamente no 
tecido, enquanto o corante ácido forma uma ligação eletrostática com 
grupos positivos do tecido”. 
MONTANARI, T. Histologia: texto, atlas e roteiro de aulas práticas [recurso 
eletrônico]. 3. ed. Porto Alegre: Edição do Autor, 2016. p. 5. 
Disponível em: 
https://www.lume.ufrgs.br/bitstream/handle/10183/147986/001002350.pdf?
sequence=1. Acesso em: 18 jan. 2020. 
Ao analisar um esfregaço, um aluno percebeu que alguns leucócitos têm 
maior atração pelos corantes hematológicos, apresentando coloração mais 
intensa devido à presença de grânulos no citoplasma. Ao pesquisar, o 
aluno classificou esses leucócitos como: 
B. granulócitos, que podem ser neutrófilos e eosinófilos; 
Os granulócitos são leucócitos que têm grânulos no citoplasma, conferindo maior 
coloração do citoplasma dessas células. Seus representantes são os neutrófilos, 
basófilos ou eosinófilos. 
 
4. “Desde 1980, o uso da análise diferencial de leucócitos automatizada tem 
se tornado comum em um grande número de laboratórios. No entanto, 
algumas amostras analisadas pelos contadores automatizados de células 
ainda requerem avaliação através da distensão de sangue periférico para 
permitir a observação de anormalidades morfológicas e outras alterações”. 
FAILACE, R; PRANKE, P. Avaliação dos critérios de liberação direta dos 
resultados de hemogramas através de contadores eletrônicos. Rev. bras. 
hematol. hemoter. 2004; v. 26 (3). p.159-166. 
As análises hematológicas dependem da realização de uma distensão 
sanguínea de qualidade, que envolve: 
C. a distensão do sangue deve ocorrer pelo deslizamento de uma lamínula 
sobre uma lâmina. 
A distensão do sangue é realizada com o deslizamento de uma lâmina de ponta 
lisa sobre a lâmina com a gota de sangue. 
 
5. “O HIV liga-se a um componente da membrana dessa célula, (...), 
penetrando no seu interior para se multiplicar. Com isso, o sistema de 
defesa vai pouco a pouco perdendo a capacidade de responder 
adequadamente, tornando o corpo mais vulnerável a doenças. Quando o 
organismo não tem mais forças para combater esses agentes externos, a 
https://www.lume.ufrgs.br/bitstream/handle/10183/147986/001002350.pdf?sequence=1.
https://www.lume.ufrgs.br/bitstream/handle/10183/147986/001002350.pdf?sequence=1.
pessoa começar a ficar doente mais facilmente e então se diz que tem 
Aids”. 
BRASIL. O que é sistema imunológico. Departamento de Doenças de 
Condições Crônicas e Infecções Sexualmente Transmissíveis, Ministério 
da Saúde, 2020. 
Disponível em: http://www.aids.gov.br/pt-br/publico-geral/o-que-e-hiv/o-
que-e-sistema-imunologico. Acesso em: 16 jan. 2020 
Alguns diagnósticos médicos, tais como o do HIV, necessitam distinguir 
os tipos de linfócitos, podendo utilizar a metodologia de: 
C. imunohistoquímica. 
As imunohistoquímicas conseguem diferenciar os tipos de linfócitos, pois os 
anticorpos específicos reconhecem os receptores que diferenciam os linfócitos. 
Ao associar um anticorpo secundário fluorescente, é possível discernir as células 
utilizando um microscópio de fluorescência ou confocal. 
 
PÓS TESTE 
 
1. “O núcleo geralmente reflete a morfologia da célula, pois seu maior eixo 
é paralelo ao eixo longitudinal da célula. Como frequentemente não se 
veem os limites das células (a membrana plasmática é muito fina e não é 
visível ao microscópio de luz), pode-se ter uma ideia da forma da célula 
pelo núcleo” (MONTANARI, 2016. p. 8). 
No laboratório virtual, ao analisar o esfregaço sanguíneo no microscópio 
de luz, algumas células são diferenciadas pelo tamanho e formato do 
núcleo. No entanto, outras são anucleadas, tais como: 
C. as hemácias. 
As hemácias dos mamíferos não apresentam núcleo celular e têm grande 
quantidade de hemoglobina no citoplasma. 
 
2. “Como os tecidos são geralmente incolores, os histologistas inventaram 
soluções corantes que têm afinidades diferentes para certas organelas e 
estruturas, possibilitando a sua localização” (MONTANARI, 2016. p. 5). 
No laboratório virtual, as células sanguíneas foram submetidas a uma 
metodologia de coloração, que possibilita a marcação das estruturas 
celulares para a observação em microscopia de luz. Essa coloração, muito 
usada na rotina hematológica, é a: 
C. panótico rápido. 
O panótico rápido é um corante utilizado em técnicas hematológicas, composto 
por azul de metileno, metanol e eosina. 
 
3. "Quando uma lesão causa a ruptura de um vaso sanguíneo, as plaquetas 
são ativadas. Elas alteram sua forma de arredondada para espiculada, 
aderem à parede do vaso danificado e umas às outras e começam a formar 
um tampão. Elas também interagem com outras proteínas do sangue para 
http://www.aids.gov.br/pt-br/publico-geral/o-que-e-hiv/o-que-e-sistema-imunologico
http://www.aids.gov.br/pt-br/publico-geral/o-que-e-hiv/o-que-e-sistema-imunologico
formar fibrina. Os filamentos de fibrina formam uma malha que captura 
mais plaquetas e células sanguíneas, produzindo um coágulo estável que 
tampa a ruptura” (MOAKE, 2018). 
Com base no texto acima, observa-se que as plaquetas atuam no processode coagulação sanguínea, sendo identificada nos esfregaços sanguíneos 
por suas características morfológicas, tais como: 
C. tamanho reduzido em relação aos outros tipos celulares. 
As plaquetas são fragmentos celulares anucleados provenientes dos 
megacariócitos da medula óssea. 
 
4. "De um modo geral, em resposta a um estímulo lesivo (físico, químico 
ou biológico), o organismo animal reage com a liberação, ativação ou 
síntese de substâncias conhecidas como mediadores químicos ou 
farmacológicos da inflamação, que determinam uma série de alterações 
locais, que manifestam-se inicialmente por dilatação de vasos da 
microcirculação, aumento do fluxo sanguíneo e da permeabilidade 
vascular, com extravasamento de líquido plasmático e formação de edema, 
diapedese de células para o meio extravascular, fagocitose, aumento da 
viscosidade do sangue e diminuição do fluxo sanguíneo, podendo ocorrer 
até uma estase" (BECHARA, & SZABÓ, 2006). 
O texto acima se refere a um processo inflamatório em que células de 
defesa fagocitárias são recrutadas por estímulos químicos. Ao analisar um 
esfregaço de uma amostra sanguínea coletada de um paciente no início da 
infecção, esperamos encontrar uma maior quantidade de: 
A. neutrófilos; 
Os neutrófilos são os leucócitos mais frequentes no sangue e estão envolvidos 
na fase aguda da inflamação, realizando diapedese para os tecidos e fagocitose 
de restos celulares ou microrganismos. 
 
5. “Quando os resultados do hemograma estão anormais, é examinado o 
esfregaço de sangue e feita uma contagem diferencial de leucócitos para 
determinar a presença de células anormais ou imaturas” (LABTESTES 
ONLINE, 2019). 
A determinação dos tipos de células sanguíneas no esfregaço é realizada 
utilizando um microscópio de luz, com objetiva de: 
C. 
aumento de 100 vezes. 
A objetiva de 100x é aplicada para a avaliação dos esfregaços sanguíneos, pois 
permite avaliar os detalhes celulares das mais variadas células do tecido 
sanguíneo. 
 
PREPARO DE ESFREGAÇO E COLORAÇÃO DE GRAM 
 
PRÉ TESTE 
1. O procedimento de coloração de Gram permite que as bactérias 
retenham a cor dos corantes, com base nas diferenças das propriedades 
químicas e físicas de sua estrutura. 
De acordo com as cargas positivas e negativas relacionadas às estruturas 
bacterianas e aos corantes utilizados na coloração de Gram, marque a 
alternativa correta: 
B. Bactérias Gram-positivas e Gram-negativas apresentam carga positiva e 
negativa, respectivamente. Mesmo apresentando cargas diferentes, o cristal 
violeta penetra ambas as paredes celulares; 
O cristal violeta é o corante primário e cora ambas as bactérias, Gram-positivas 
e Gram-negativas. 
 
2. As bactérias apresentam diversas estruturas que as diferenciam entre 
Gram-positivas e Gram-negativas. Marque a alternativa que mais descreve 
essas diferenças: 
C. As bactérias Gram-negativas apresentam uma estrutura mais complexa, com 
uma parede celular mais fina, porém envolta por uma membrana lipídica externa 
e um espaço periplasmático. 
Gram-negativas realmente são mais complexas que Gram-positivas. Gram-
positivas não apresentam membrana lipídica externa, nem parede celular 
externa, tampouco um espaço periplasmático separando a parede celular da 
membrana citoplasmática. 
 
3. As bactérias são microrganismos unicelulares procarióticos. A estrutura 
da célula é mais simples do que a de outros organismos, pois não há um 
núcleo definido, nem a presença de organelas membranosas. Existem 
muitos tipos diferentes de bactérias. Uma forma preliminar de classificá-
las é pela morfologia e pelo arranjo formado. 
De acordo com seus conhecimentos teóricos de microbiologia, qual 
alternativa melhor responde sobre os tipos morfológicos bacterianos 
existentes, bem como sobre seus arranjos formados? 
B. Os bacilos são estruturas longas e delgadas que formam arranjos com dois 
bacilos (diplobacilos) ou que se agrupam formando cadeias (estreptobacilos) ou 
apenas se alinhando lado a lado (paliçada); 
Os bacilos são bactérias em forma de “bastão”, apresentando estrutura longa e 
delgada. Pode ser uma célula que não se agrupa ou que forma arranjos com um 
ou mais outros bacilos. 
 
4. A coloração é uma técnica auxiliar largamente utilizada em microscopia. 
As colorações são amplamente utilizadas no campo científico para 
destacar a estrutura das amostras biológicas, de células, tecidos, etc. O 
procedimento de coloração mais amplamente utilizado em microbiologia é 
a coloração de Gram, descoberta pelo cientista e médico dinamarquês 
Hans Christian Joachim Gram, em 1884. 
Com base em seus estudos, marque a alternativa que melhor justifica os 
objetivos e as funcionalidades da coloração de Gram: 
A. A coloração de Gram auxilia na categorização das bactérias em Gram-
positivas ou Gram-negativas e na observação da morfologia bacteriana (coco, 
bacilo, vibrião, espirilo), bem como nos arranjos formados por elas; 
Em laboratórios de microbiologia clínica, a coloração de Gram é fundamental 
para diferenciar linhagens bacterianas entre Gram-positivas e Gram-negativas e 
muito utilizada para definir a morfologia e a forma como as bactérias se agrupam, 
auxiliando na antibioticoterapia. 
 
5. O cultivo bacteriano pode ser realizado em meio líquido e em meio 
sólido. Alguns meios são seletivos e são utilizados para selecionar 
espécies que serão isoladas. Há também os meios diferenciais, os quais 
promovem mudança na coloração das colônias de bactérias, 
possibilitando a distinção de vários gêneros e espécies de 
microrganismos. 
Com base em seus conhecimentos, marque a alternativa que melhor define 
o ágar manitol e o ágar MacConkey: 
A. O ágar manitol é um meio seletivo e diferencial indicado para o isolamento de 
Staphylococcus; 
No ágar manitol é possível selecionar: 1) estafilococos não patogênicos de 
tamanho pequeno e rodeados de uma zona vermelha; 2) Staphylococcus 
aureus, fermentadores do manitol, que são maiores e rodeados de uma zona 
amarela; e 3) Staphylococcus epidermidis e Bacillus subtillis, que irão crescer no 
ágar formando colônias brancas. 
 
PÓS TESTE 
 
1. A coloração de Gram diferencia as bactérias pelas propriedades 
químicas e físicas de suas paredes celulares. As bactérias Gram-positivas 
têm uma camada espessa de peptideoglicano na parede celular que retém 
a coloração primária (cristal violeta). As bactérias Gram-negativas têm uma 
camada mais fina de peptideoglicano que permite que o cristal violeta seja 
removido com a adição de etanol. 
Com base na sua aprendizagem prática no laboratório virtual, assine a 
alternativa que responda corretamente qual etapa deve ser realizada antes 
da adição do etanol. 
A. Após a coloração com cristal violeta, a próxima etapa é a adição de lugol com 
a função de se ligar ao cristal violeta, aumentando sua afinidade pela parede 
celular e formando um complexo insolúvel (CV-I); 
O lugol age como mordente e agente de aprisionamento, para reter o corante na 
parede celular bacteriana por meio da formação de um complexo formado entre 
cristal violeta e iodo. 
 
2. Você foi responsável por analisar, por meio da metodologia de Gram, 
duas amostras recebidas no laboratório. Logo após a realização dos 
procedimentos, você observou as seguintes imagens: 
C. As amostras recebidas em laboratório passaram por quatro etapas – 
coloração primária, adição de lugol, descoloração com álcool e contracoloração 
– até se chegar à obtenção dessas imagens. A cor roxa/violeta representa a 
presença de bactérias Gram-positivas na amostra, enquanto a cor vermelha/rosa 
representa a presença de bactérias Gram-negativas. 
Após as quatro etapas da coloração de Gram, o diagnóstico preliminar obtido é 
de que a cor roxa/violeta representa o grupo de bactérias Gram-positivas, e a cor 
vermelha/rosa, Gram-negativas. 
 
3. Antes de utilizar os reagentes para a metodologia de Gram com a 
finalidadede corar as bactérias, há a necessidade de primeiro fixar a 
amostra por meio do calor. Esse procedimento é realizado passando a 
lâmina por cima da chama azul em um bico de Bunsen algumas vezes. 
No laboratório virtual você realizou esse procedimento. Mas, afinal, por que 
você faz isso? 
C. Para que as bactérias não sejam eliminadas durante as etapas de coloração. 
Caso as bactérias não sejam fixadas por meio do esfregaço em lâmina, quando 
ocorrer a adição do corante cristal violeta, do lugol, do álcool e da safranina e 
retirada dos excessos, não haverá mais amostras na lâmina. 
 
 
4. A coloração de Gram apresenta diversas etapas, que se iniciam com o 
esfregaço. Após a amostra estar fixada na lâmina, iniciam-se as etapas de 
coloração primária, adição de lugol, descoloração e contracoloração. Todo 
o procedimento é finalizado com a visualização da lâmina com o auxílio de 
um microscópio óptico. 
No experimento realizado no laboratório virtual, você percorreu todas as 
etapas. Levando em consideração o seu conhecimento prático e teórico 
adquirido, qual etapa é crucial na coloração de Gram? 
A. O esfregaço bacteriano; 
O esfregaço é a primeira etapa; se não for realizado de forma correta, não terá 
como realizar as demais etapas e obter um diagnóstico preliminar correto. 
 
5. Cada reagente utilizado na coloração de Gram apresenta uma função 
definida. O cristal violeta age como um corante primário, corando todas as 
bactérias. O iodo (presente no lugol) age formando um complexo com o 
cristal violeta, prendendo-o no interior das bactérias. O álcool age diluindo 
a membrana lipídica de bactérias Gram-negativas, liberando o cristal 
violeta para fora delas. A contracoloração com safranina age corando as 
bactérias Gram-negativas de vermelho/rosa. 
Após a realização desse procedimento experimental no laboratório virtual, 
qual a função do mordente na reação de Gram? 
A. Fixar o corante primário (cristal violeta parede celular de bactérias Gram-
positivas e Gram-negativas; 
O lugol age como um agente mordente e aprisionador. Isso ocorre com a 
formação de um complexo insolúvel entre iodo e cristal violeta, ficando retido na 
parede celular das bactérias. 
 
EFICÁCIA DE AGENTES ANTISSÉPTICOS 
 
PRÉ TESTE 
 
1. As instalações onde ocorre o processamento de alimentos, as 
superfícies como mesas, bancadas, equipamentos e utensílios, além das 
mãos, nariz e bocas dos manipuladores são alguns exemplos de onde 
podemos encontrar microrganismos em unidades processadoras de 
alimentos. A presença nesses locais possibilita a transferência de 
microrganismos para os alimentos; alguns podem ser benéficos para o 
homem, mas outros estão associados à deterioração dos alimentos e às 
doenças transmitidas pelos alimentos. 
Os microrganismos estão presentes em diversos ambientes: no solo, na 
água, no ar e no nosso corpo. Sendo assim, assinale a alternativa que 
justifica a utilização de agentes antissépticos em unidades de 
processamento de alimentos. 
B. A presença de microrganismos em superfícies como mesas, bancadas, 
equipamentos e utensílios, além das mãos, nariz e bocas dos manipuladores, 
são locais que possibilitam a sua transferência para os alimentos; 
 
2. As mãos dos manipuladores de alimentos são importantes vias de 
contaminação, sob o risco de doenças de origem alimentar. Sendo assim, 
é de extrema importância que as pessoas que manipulam alimentos 
adquiram hábitos de higienizar as mãos com frequência, antes e após a 
manipulação de alimentos e/ou quando trocar de atividade, sendo 
fundamental a higienização após usar o sanitário. 
Após analisar as informações fornecidas, escolha a alternativa que está 
correta em relação à higienização das mãos: 
B. Segundo a Organização Mundial da Saúde (OMS), 40% dos casos de 
diarreias, gripes e conjuntivites poderiam ser evitados com o simples ato de lavar 
as mãos corretamente; 
Lavagem correta das mãos: com água e sabão, por 40 a 60 segundos, ou álcool 
em gel por 20 a 30 segundos, não se esquecendo de espalhar bem o produto e 
limpar as regiões entre os dedos e ao redor das unhas. A utilização do álcool é 
para os locais onde não é possível a utilização de água. 
 
3. Para evitar a contaminação dos alimentos, é necessário o treinamento 
dos manipuladores em relação à frequência e à correta higienização das 
mãos. Nos processos de higienização, são utilizados os antissépticos e os 
desinfetantes. 
Qual das alternativas indica melhor o uso de antissépticos e desinfetantes 
em locais onde ocorre o processamento de alimentos? 
A. Os antissépticos e desinfetantes desempenham um importante papel nos 
processos de higienização, atuando de forma a minimizar a disseminação de 
microrganismos; 
Esses compostos agem em múltiplos alvos da parede celular, da membrana 
citoplasmática e do citoplasma microbiano. 
 
4. O álcool etílico (etanol) é classificado como antisséptico de nível 
intermediário, apresentando rápida ação antimicrobiana contra bactérias, 
vírus e fungos. 
Assinale a alternativa correta em relação ao uso de álcool como agente 
antisséptico: 
A. O principal mecanismo de ação do etanol é a destruição de proteínas que 
fazem parte do revestimento das bactérias, fungos e vírus; 
Essa alternativa está correta, pois os danos causados nas membranas dos 
microrganismos são extremamente letais. 
 
5. Na prática realizada, será possível verificar a eficiência do álcool 70% 
como agente sanitizante. Para isso, será utilizado o kit swab e placas de 
Petri contendo o meio de cultura ágar chocolate suplementado. 
A utilização do kit swab em atividades práticas e em laboratórios de 
microbiologia é recomendável, pois: 
C. a prática irá avaliar a eficácia de agentes químicos (antissépticos) sobre as 
bactérias do polegar e meio ambiente. 
Esse é o principal objetivo da prática: avaliar os álcoois e a carga microbiana 
presente na maçaneta da porta. 
 
Pós Teste 
 
1. O meio de cultura ágar chocolate suplementado é amplamente utilizado 
para o cultivo de microrganismos exigentes, embora cresçam nesse meio 
quase todos os tipos de microrganismos. 
Sobre a suplementação utilizada no meio de cultura ágar chocolate, qual é 
a opção correta? 
C. A suplementação é feita com sangue, que pode ser de cavalo, carneiro ou 
coelho, utilizando temperatura alta. 
A temperatura alta possibilita a lise das hemácias e a liberação de hemina e 
hematina, compostos fundamentais para o crescimento dos microrganismos 
exigentes. 
 
2. As mãos são um importante veículo de transmissão de microrganismos 
que causam infecções. Sendo assim, a correta higienização das mãos é a 
forma mais eficiente de evitar a proliferação desses microrganismos e das 
infecções associadas a eles. 
O texto acima fala da importância da higienização correta das mãos para 
evitar a contaminação dos alimentos. Das opções apresentadas a seguir 
sobre esse assunto, qual está correta? 
A. Na aula prática, foi possível observar a contagem de microrganismos antes 
da higienização e após a higienização das mãos; 
Com o processo de higienização, espera-se uma redução no número de 
microrganismos presentes na mão do analista. 
 
3. No meio de cultura ágar chocolate suplementado, é possível o 
crescimento de microrganismos exigentes como Haemophilus spp., 
Neisseria spp., Branhamella catarrhalis e Moraxella spp. É importante 
destacar que, nesse meio, temos crescimento bom a excelente de 
Haemophilus influenzae (ATCC 10211). 
Assinale a alternativa correta em relação à interpretação dos resultados. 
C. Colônias de tamanho pequeno a médio, com pigmento amarelo, são 
sugestivas de Neisseria spp., Branhamella catarrhalis ou Moraxella spp. 
Na interpretação dos resultados, deve-se observar que colônias de tamanho 
pequeno a médio, com pigmento amarelo, são sugestivas de Neisseria spp., 
Branhamella catarrhalis ou Moraxella spp. Já as colônias pequenas e delicadas,com pigmento creme claro, são sugestivas de Haemophilus spp. Para a 
identificação, são necessários testes bioquímicos, como coloração de Gram, 
oxidases, catalases, PCR, entre outros. 
 
4. Os microrganismos fastidiosos pertencem a um grupo heterogêneo de 
bactérias que apresentam como característica em comum exigências 
especiais de condições de cultivo, em relação às enterobactérias e à 
maioria dos não fermentadores. 
Sobre esse assunto, assinale a opção que estiver correta. 
B. Esses microrganismos podem ser encontrados em pele e mucosas, portando 
podem estar presentes nas mãos dos manipuladores de alimentos; 
Esses microrganismos podem estar presentes nas mãos dos manipuladores em 
falhas de higienização e serem transmitidos aos alimentos. 
 
5. O kit swab (Figura é composto de uma haste contendo algodão na ponta, 
mergulhado em solução de diluição, ambos esterilizados e lacrados, 
prontos para o uso. Na solução de diluição, poderão ser utilizadas as 
soluções salinas ou a água peptonada. 
A utilização do kit swab permite coletar amostragem ambiental nas 
condições assépticas exigidas pelos protocolos de microbiologia de 
alimentos. Assinale a alternativa correta sobre os kits swabs. 
B. Os kits foram projetados para simplificar a coleta de amostragem ambiental e 
de pessoas; 
Os kits swabs contêm frascos limpos e estéreis que simplificam bastante a coleta 
de amostras.

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