EXTRAÇÃO DE DNA DE CEBOLA

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ALEXANDRA ANDRADE GOUVEIA 
DANIELLE CRISTINA GOMES 
 
 
 
 
 
 
 
PRÁTICA 07 
EXTRAÇÃO DE DNA DE CEBOLA 
 
 
 
 
 
Governador Valadares 
2021 
1. INTRODUÇÃO 
O DNA, o ácido desoxirribonucleico é um dos ácidos nucleicos que constituem o material genético 
da maioria dos seres vivos. O DNA é formado por nucleotídeos e cada um deles é formado por uma 
molécula de desoxirribose, uma molécula de fosfato e uma base nitrogenada que pode ser púrica ou 
pirimídica. O seu principal papel é armazenar as informações necessárias para a construção das 
proteínas e RNA. 
As bases púricas encontradas no DNA são adenina e guanina: e as bases pirimídicas são citosina e 
timina, sendo que a adenina se liga à timina e a guanina liga-se á citosina através de pontes de 
hidrogênio. 
A molécula de DNA consiste em duas cadeias de nucleotídeos dispostas em hélice em torno de um 
eixo. As bases púricas e pirimídicas de cada cadeia polinucleotídica situam-se dentro da hélice dupla, 
em planos paralelos entre si e perpendiculares ao eixo da hélice (JUNQUEIRA & CARNEIRO. 2005) 
As substâncias químicas presentes no interior das células interferem em toda a organização e 
funcionamento do organismo dos seres vivos. A substância central nesse processo é o ácido 
desoxirribonucleico ou simplesmente DNA. 
O processo de extração de DNA é o começo do estudo molecular dos genes. A partir do isolamento 
(extração) da substância química DNA, é possível por meio de diferentes métodos identificar genes, 
fazer sequenciamento de nucleotídeos que compõem esses DNA e localizar sequências homólogas 
(iguais ou similares) a sequência encontrada em outros seres vivos. 
2. OBJETIVO 
Conhecer os princípios básicos da extração do material genético da cebola, a partir dos tecidos do 
bulbo. 
3. MATERIAIS, REAGENTES E EQUIPAMENTOS 
MATERIAIS 
• Cebola picada; 
• Detergente incolor; 
• Cloreto de sódio; 
• Papel de filtro; 
• Gelo; 
• Funil; 
• 2 béqueres 50 mL; 
• Bastão de vidro; 
• Faca de cozinha; 
• Água destilada; 
• Proveta 50 mL; 
• Espátula. 
REAGENTES 
• Álcool etílico comercial (95°C) 
EQUIPAMENTOS 
• Banho Maria 
 
4. PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL 
Em uma proveta foi medida 10 ml de detergente incolor e uma pitada de sal (NaCl) dissolvidos em 
20 mL de água destilada (solução de lise) misturou-se a solução e transferiu-se para um béquer de 5 
mL. Cortou-se metade de uma cebola em cubos, adicionou-se ao béquer até completar a solução de 
lise, misturou-se completamente. Foi disposto o béquer em banho maria por 15 minutos a 60°C 
Após o aquecimento, resfriou-se a solução no gelo por cerca de 5 minutos. Com a solução 
devidamente resfriada, filtrou-se a solução em um béquer limpo para a extração do DNA. 
Após a filtração, adicionou-se lentamente sob as paredes do béquer 20 mL de álcool etílico, esperou-
se alguns minutos para observação de bolhas na solução e a precipitação do DNA. 
Com o auxilio do bastão de vidro em movimentos circulares notou-se uma divisão de fases na solução 
denominada DNA da cebola onde os fios esbranquiçados formados são aglomerados de moléculas de 
DNA que fixou-se ao bastão. 
5. RESULTADOS 
Detergente → desnaturação das moléculas de lipídios; 
NaCl → ambiente favorável a extração de DNA; 
Aquecimento → desnaturação das moléculas de DNA (abertura das fitas duplas); 
Resfriamento → precipitação do DNA; 
Álcool → diminui a solubilidade do DNA → menos solúvel forma aglomerado de moléculas de DNA. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
6. DISCUSSÃO 
O processo de picar a cebola é realizado com o intuito de quebrar a parede celular, expondo assim o 
citoplasma e as organelas pois quando picadas, rompem-se facilmente. As moléculas do detergente 
são capazes de desestruturar a organização das moléculas de lipídios presentes nas membranas 
celulares promovendo o rompimento celular (lise). A solução de lise é assim definida devida sua 
função de rompimento da membrana plasmática e outras membranas. 
A importância da adição do NaCl se da pela dissociação em íons Na + Cl, pois o NaCl proporciona o 
ambiente favorável para a extração de DNA da solução. Estes íons interagem com os fosfatos e 
histonas das moléculas de DNA, neutralizando e estabilizando-as, possibilitando assim que as 
moléculas de DNA fiquem menos solúveis em contato com a água. Por outro lado, a função do 
detergente neutro é emulsificar os fosfolipídios presentes nas membranas plasmáticas da célula e de 
suas organelas, e o seu alto grau de interação faz com que haja a exposição das moléculas de DNA 
presente no núcleo celular assim como das organelas, mitocôndrias e cloroplastos. 
O banho maria realizado expõe a solução a uma temperatura média de 60°C com a função de 
desnaturar as proteínas e enzimas, entre elas as DNases, (abertura das fitas duplas) além de degradar 
alguns constituintes das células. A submissão da solução no gelo é utilizada para diminuir a quebra 
das moléculas de DNA. 
O processo de filtragem tem a função de manter a solução homogênea, contendo uma grande 
quantidade de material genético e facilitando a visualização. Por fim, a adição de álcool permite a 
observação das moléculas de DNA em suspensão, notada como pequenos filamentos esbranquiçados. 
7. CONCLUSÃO 
O material genético faz parte dos mais diversos tipos de organismos, e seu armazenamento e 
transferência de informações genéticas são de extrema importância para manutenção da vida. A 
compreensão do mesmo é importante para a preservação de espécies, identificação e controle de 
doenças, realizar o melhoramento genético de um determinado organismo visando uma maior 
produtividade entre outras funcionalidades. 
8. REFERÊNCIAS 
JUNQUEIRA, L. C.: CARNEIRO J. Biologia Celular e Molecular Rio de Janeiro: 8ª ed. Guanabara. 
2005. 
 
SANTOS, Alexandre soares. Extração do DNA da cebola (Alliun cepa). Minas Gerais: 
Departamento de Ciências Básicas - DCB/UFVJM. Minas Gerais, 20