Métodos Parasitológicos - Willis, Faust e Ritchie

Prévia do material em texto

Parasitologia Clínica – Laís Nunes [5º semestre] 
 
 
 A técnica de Willis baseia-se na flutuação espontânea para a pesquisa de ovos de helmintos que apresenta baixo peso (P. Ex., ancilostomídeos) e 
oocistos de protozoários em uma solução saturada de sal ou açúcar; 
 
Vantagens Desvantagens 
o Técnica barata, simples e eficiente; 
o Evidencia ovos leves de helmintos 
o A solução saturada pode destruir cistos de 
protozoários presentes na amostra 
 
 
Metodologia 
o Colocar uma porção de fezes em um frasco de borel e homogeneizar com um pouco de solução saturada de NaCl; 
o Completar o frasco com NaCl até a borda do frasco e formar um menisco; 
o Colocar uma lâmina em cima do menisco que se formou de forma que ela esteja em contato com o líquido; 
o Deixar a lâmina em repouso por cinco minutos, após isso, tirar a lâmina rapidamente, com a parte que estava em contato com o menisco para cima; 
o Adicionar lugol (optativo) e a lamínula em cima e fazer a leitura no microscópio, usando a objetiva de 10 e 40X. 
 
 
 A técnica de Faust é um centrífugo–flutuação em sulfato de zinco, o qual possibilita a pesquisa de cistos de protozoários e também é útil na 
pesquisa de ovos leves de helmintos. A diferença de densidade, faz com que os cistos/ovos se tornem mais leves, ocasionando na flutuação deles. 
 
Vantagens Desvantagens 
o Fácil identificação de ovos de helmintos; 
 
o Demorada e dispendiosa (cara); 
o O contato com a solução de ZnSO4 pode 
deformar as formas parasitárias, 
especialmente os cistos de protozoários e ovos 
de helmintos de cascas fina. 
Metodologia 
o Coletar uma porção da amostra e misturar com água filtrada, homogeneizando bem; 
o Filtrar a amostra em um tamis coberto com gaze dobrada em quatro, e coletar o material filtrado em um béquer ou copo descartável; 
o Transferir o material filtrado para um tubo cônico de vidro, e centrifugar a 2500 rpm, por cerca de 3 a 4 vezes, até o sobrenadante ficar 
límpido; 
o Desprezar o sobrenadante (água) e ressuspender o sedimento com uma solução de sulfato de zinco a 33% (± 8 a 10 mL); 
o Centrifugar novamente por 1 minutos a 2500 rpm, a tendência é que o sedimento desça e os parasitas migrem para a superfície do tubo; 
o Os cistos e alguns oocistos de protozoários e os ovos leves, presentes na amostra fecal, estarão na película superficial, recolher a película com 
alça de platina, colocar em uma lâmina, acrescentar 1 gota de lugol, homogeneizar e cobrir com lamínula; 
o Fazer a leitura no microscópio, usando a objetiva de 10 e 40X. 
 
 
 A técnica de Ritchie baseia-se em centrifugação para concentrar elementos parasitários no sedimento. Baseia-se na na centrífugo-sedimentação 
utilizando um sistema de formol-éter. 
 
Vantagens Desvantagens 
o Excelente na pesquisa de cistos de protozoários 
e evidenciar ovos (leves e pesados) e larvas de 
helmintos; 
o Elimina o excesso de detritos. 
 
o Demorado e dispendiosa; 
o O contato com os reagentes por muito tempo 
pode deformar as formas parasitárias, 
especialmente os cistos de protozoários; 
Metodologia 
o Coletar uma porção e diluir em água, homogeneizar bem, após isso, filtrar a amostra em gaze dobrada em 4, num cálice de sedimentação; 
o Transferir cerca de 10 a 1 2 mL da amostra para um tubo cônico graduado ou para um tubo de hemólise; 
o Centrifugar por um minuto a 2.500 rpm por cerca de 3 a 4 vezes, até o sobrenadante ficar límpido, para eliminar o excesso de resíduos; 
o Desprezar o sobrenadante e ressuspender o sedimento adicionando uma solução de acetato de etila (± 6 mL), deixo em repouso por 5 minutos; 
o Após este tempo adiciona formalina a 10% (± 6 mL), para retirar o excesso de gordura das fezes, fecha-se o tubo e faz-se homogeneização por 
cerca de 20 minutos; 
o Após está homogeneização deixa o tubo em repouso por 5 minutos para que ocorra a separação das camadas; 
o Colocar uma amostra na lâmina, acrescentar 1 gota de lugol e cobrir com lamínula e fazer a leitura no microscópio com objetiva de 10 e 40x. 
Métodos Parasitológicos 
Método de Willis 
Método de Faust 
Método de Ritchie