Atividades microbiologia Alunos

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Atividade 1: Compreensão:
Desde os primórdios do estudo da biologia, o homem é fascinado pela estrutura das células. Acredita-se que o microscópio tenha sido inventado em 1590 por Hans Janssen e seu filho Zacharias, dois holandeses fabricantes de óculos. Tudo indica, porém, que o primeiro a fazer observações microscópicas de materiais biológicos foi Antonie van Leeuwenhoek em 1677. Seus microscópios eram dotados de uma única lente, pequena e quase esférica. Nesta época iniciou-se a observação dos microorganismos em lentes de Leeuwenhoek, que possuía um aumente de 300 vezes. Uma das observações dos cientistas naquela época eram as estruturas das células bacterianas e células de mamíferos, que permitiram a eles fazerem distinções entre essas células, hoje conhecidas como procariontes e eucariontes respectivamente. A microbiologia evoluiu e essa evolução, trouxe microscópios e corantes cada vez mais capazes de elucidar as estruturas celulares. Hoje, conhecemos todas as estruturas de células procariontes e suas funções, o que nos permite estudar e relacionar essas estruturas com os mecanismos de doenças geradas pelas bactérias. Com base no texto desenvolva um quadro relacionando as estruturas celulares com suas funções e a distinção dessas estruturas com diferentes classes tintoriais das bactérias gram-negativas e gram-positivas.
	Estrutura
	Função
	Classe tintorial
	
	
	
	
	
	
	
	
	
	
	
	
	
	
	
	
	
	
	
	
	
Atividade 2: Contextualização.
Paciente grávida chega ao posto de saúde apresentando queixa de dor ao urinar. O médico então pede exames de urina que confirma uma infecção urinária por um microorganismo. O médico então realiza antibióticoterapia na gestante, que retorna 15 dias depois ao posto de saúde com as mesmas queixas, porém com dor na regial lombar e abdominal. Pela segunda vez, médico pede um exame de urina, porém pede um exame bacteriológico desse material com identificação e antibiograma. No laboratório você utiliza as seguintes provas:
Coloração de gram: Presença de bastonetes gram-negativos TSI: indicou presença de bactéria fermentadoras e produtoras de gás. SIM: Sugestivo de bactéria móvelCitrato: Indicou presença de E. coli. Sorotipagem: UPEC Escherichia coli uropatogênica. Exame de imagem: Infecção ascendente com comprometimento do ureter e renal.
Na primeira consulta a paciente apresentava dor ao urinar, comum à infecções na uretra. Posteriormente a bactéria já havia comprometido o rim. Alguns testes que você utilizou como coloração de gram, SIM, e sorotipagem são baseados na estrutura bacteriana. Argumente quais estruturas são essas e como elas ajudam na diferenciação de microorganismos.
Exercícios de fixação
1- As células procariontes possui uma infinidade de estruturas, e cada uma dessas estruturas possui uma função específica para a sobrevivência da bactéria. O desenho esquemático mostra uma célula bacteriana. Assinale a afirmativa verdadeira em relação às estruturas numeradas dessa célula. 1
2
3
4
5
a) A estrutura 1 está presente em todas as bactérias que causam doença no homem.
b) A estrutura 2 é quimicamente constituída de peptidoglicano.
c) Na estrutura de número 3 ocorre a respiração celular aeróbia.
d) A estrutura 4 confere vantagens à bactéria que a possui.
e) A estrutura 5 é o plasmídio, sendo formado de ADN.
2- Observe o esquema de uma célula bacteriana e assinale, em ordem crescente, a alternativa que identifica corretamente as estruturas numeradas.
a) Mesossomo, ribossomos, nucleóide, fímbrias, cápsula.
b) Mesossomo, plasmídeos, nucleóide, enzimas respiratórias, parede celular.
c) Corpo basal, lisossomos, DNA, fímbrias, membrana plasmática.
d) Mesossomo, plasmídeo, nucleóide, enzimas respiratórias, membrana plasmática.
e) Mesossomo, ribossomos, nucleóide, membrana plasmática, parede celular
3- Considere os seguintes componentes celulares:
(1) membrana plasmática;
(2) cariotéca;
(3) cromossomos;
(4) hialoplasma;
(5) ribossomos;
(6) retículo endoplasmático;
(7) mitocôndrias;
(8) cloroplastos;
Dentre as alternativas seguintes, assinale a que tiver a seqüência representativa de estruturas ausentes em bactérias:
a) 1-2-7-8
b) 2-6-7-8
c) 2-3-5-6
d) 3-6-7-8
e) 5-6-7-8
4- O uso indiscriminado de antibióticos tem como consequência o aparecimento de superbactérias patogênicas, capazes de resistir a uma grande quantidade de antibióticos. As estruturas das células bacterianas, envolvidas nessa resistência a antibióticos, são os (as) 
a) paredes celulares. 
b) membranas celulares. 
c) flagelos. 
d) plasmídeos. 
e) mesossomos
5- Polímero situado externamente à parede celular da célula procariótica, composto de polissacarídeo, polipeptídeo ou ambos. Sua composição química varia amplamente entre as espécies. Na maioria dos casos é produzido dentro da célula e secretado para a superfície celular. Qual das alternativas corresponde à estrutura externa descrita? 
a) flagelo. 
b) filamentos axiais. 
c) fímbrias. 
d) pili. 
e) glicocálice. 
Questões de Prova.
1-Com base na análise da figura de uma célula bacteriana típica, Analise as afirmativas abaixo e assinale a alternativa que condiz apenas com alternativas corretas.
I- A estrutura indicada em I corresponde aos plasmídeos bacterianos, elementos genéticos provenientes do núcleo, essenciais para sobrevivência de bactérias.
II-A indicação em II corresponde aos inúmeras fímbrias celulares presentes ao longo de toda a superfície celular, que possibilitam a adesão de bactérias em meios sólidos.
III- A indicação em III representa o nucleossomo bacteriano, formado a partir da união do material genético a proteínas compactadoras específicas.
IV- A estrutura indicada em IV consiste na parede celular, que protege as células bacterianas contra agressões do meio em que se encontram e determina a sua forma estrutural.
V- A indicação em V representa os cílios bacterianos, que, ligados à membrana dupla bacteriana, realizam movimentos por meio de batimentos coordenados.
A) I, II e III estão corretas.
B) I, IV e V estão corretas.
C) II, IV e V estão corretas.
D) I e III estão corretas.
E) II e IV estão corretas.
2- A célula procariótica é mais simples que a eucariótica em todos os níveis, com uma única exceção: seu envoltório celular é mais complexo. A distinção entre procariotos e eucariotos ainda é baseada no fato de que os procariotos não possuem um aparato mitótico como os eucariotos. Essas células se dividem por divisão binária. As bactérias também podem trocar de material genético e assim criar mecanismos de invasividade, evasividade e toxicidade. A recombinação refere-se aos processos de aquisição ou perda de genes, para formarnovas combinações em um cromossomo, contribuindo para a diversidade genética e a variação evolutiva, como mostrado na figura abaixo:
Analise as afirmativas abaixo e assinale a alternativa que condiz apenas com afirmativas verdadeiras:
I- A estrutura marcada na foto com interrogações (?????) Corresponde ao flagelo bacteriano. Os flagelos bacterianos são rotores helicoidais semirrígidos que conferem à célula um movimento de rotação, impulsionada pelo fluxo de prótons no interior da célula ao longo do gradiente produzido pela bomba de prótons primária e ajudam na transferência de material genético entre células da mesma espécie.
II- Muitas bactérias Gram-negativas e Gram-positivas são dotadas de apêndices superficiais rígidos, denominados pili ou fímbrias, mais curtos e mais finos que os flagelos; tal como os flagelos, são compostos de subunidades proteicas estruturais denominadas pilinas.
III- A virulência de certas bactérias patogênicas depende da produção não apenas de toxinas como também de “antígenos de colonização”, reconhecidos como pili comuns, que conferem às células suas propriedades não só de transferência de material genético, mas também de aderência.
IV- As fímbrias existem apenas em procariotos gram-negativos e dessa forma não possuem relação nenhuma relação com peptidoglicano, sendo ele espesso ou delgado.
V- Existem diversos tiposde proteínas denominados de pilina. Alguns pili contêm um tipo de pilina, enquanto os outros apresentam mais de um tipo.
A) III, IV e V estão corretas
B) I, II e V estão corretas
C) I, II, III e V estão corretas
D) I, III e IV estão corretas
E) Nenhuma alternativa está correta
Questão Discursiva:
Adolescente morre com meningite bacteriana em São Vicente
Um adolescente de 15 anos morreu na noite desta terça-feira, por meningite bacteriana, no Hospital Municipal de São Vicente, o antigo Crei.  O estudante Paulo Sérgio Araújo Firmino dos Santos morava no Jardim Rio Branco e deu entrada no hospital na quinta-feira passada, com dores de cabeça e febre alta. A tia paterna do jovem, Cristiana Aparecida dos Santos, conta que, dias antes de ser internado, ele foi a uma Unidade de Pronto Atendimento da Cidade com os mesmos sintomas e que, na ocasião, foi diagnosticado com virose. "Deram um remédio para mal estar na segunda ou terça-feira e liberaram ele. Na quinta-feira foi quando ele desmaiou e os pais correram para o Crei". Desacordado, no Hospital Municipal de São Vicente, Paulo Sérgio, segundo a tia, esperou cerca de 24 horas em uma maca colocada no corredor, sem atendimento. A mãe do jovem precisou intervir para que ele fosse atendido e o exame, que diagnosticou a doença, realizado. "Quando a minha cunhada perguntava pelo filho, falavam que não tinha nenhuma criança de 15 anos lá. Acharam que ele era maior. Só fizeram o exame porque minha cunhada entrou lá e começou a gritar falando que ele era menor e que precisava de atendimento".
Fonte: Gabriela Lousada Jornal Tribuna do povo. Quarta-feira, 19 de Março de 2014 - 15h30. Acessado pelo link:http://www.atribuna.com.br/cidades/s%C3%A3o-vicente/adolescente-morre-com-meningite-bacteriana-em-s%C3%A3o-vicente-1.371702
O meningococo, principal causador de meningite bacteriana no Brasil, é uma bactéria em forma de cocos gram-negativo. É uma bactérica chamada de Neisseria meningitidis muito patogênica por apresentar uma estrutura incomum a outras bactérias Gram-negativas como mostra a figura abaixo:
 Identifique na figura acima qual seria esta estrutura e argumente qual seria a vantagem que esta bactéria possui em relação às outras como causador de doenças.
Desafios:
Atividade 1: Compreensão 
1- As bactérias são classificadas de acordo com sua forma e arranjo. Elas podem ser em formato de cocos, bacilos, espirilos, vibrião e espiroquetas; ou nos arranjos estafilococos, estafilobacilos e estreptococos. Essas formas e arranjos facilitam no diagnóstico e também a mapear qual classe desses microorganismos causam infecções localizadas nos mais diversos órgãos. De acordo com seus conhecimentos em formas e arranjos, relacione a primeira coluna com a segunda, levando em consideração a figura abaixo:
A) 
B) ( )
C) ( )
D) ( )
E) ( )
F) ( )
G) ( )
H) ( )
I) ( )
Assinale a alternativa que representa a seqüência correta:
A) 1 – 7 -2- 3 – 5 – 4 – 8 – 7.
B) 6 – 7 -2- 3 – 5 – 8 – 4 – 1.
C) 6 – 3 -2 - 7 – 4 – 8 – 5 – 1.
D) 6 – 7 -2- 3 – 4 – 8 – 5 – 1.
E) 6 – 7 -2- 7 – 8 – 4 – 5 – 1.
Atividade 2: Contextualização:
Como já sabemos, as bactérias podem possuir diversas classificações que podem ser baseadas na sua seqüência de ácidos nucléicos (DNA) que define sua análise filogenética, nas suas características tintoriais (coloração de gram) e na sua forma e arranjo, podendo ser cocos, bacilos, espirilos, sarcina, tétrades e espiroquetas etc... e no seu arranjo. Abaixo podemos observar fotos destes microorganismos a partir de microscopia ótica e coloração. Julgue as alternativas abaixo em “V” quando considerá-la verdadeira e “F” quando considerá-la falsa. A seguir marque apenas a alternativa que condiz com a seqüência de respostas corretas.
I-(f) A Figura de número 7 são representados por cocos gram positivos dispostos aos cachos, enquanto a figura 6 também são cocos gram positivos porem dispostos em cadeia.
II-(f) A Figura 9 representa estreptobacilos gram negativos enquanto que na figura 4 temos a representação de cocobacilos gram negativos.
III-(v) A Figura 1 Observamos vibrião gram negativos enquanto que na figura dois podemos observar microorganismos no formato de espiroquetas.
IV-(v) Na Figura 3 podemos observar cocobacilos gram negativos e na figura 5 observamos bacilos gram positivos.
V- (f ) A figura 7 representa um microorganismo no formato de sarcina e na figura 3 observa-se estreptococos.
VI- (v) Na figura 8 observam-se cocos na disposição de cachos ou estafilococos enquanto que na figura 6 podemos notar cocos na disposição de cadeias, conhecidos como estreptococos.
A) F, F, V, V, F, V.
B) F, V, F, V, F, F.
C) F, F, F, V, V, V.
D) F, F, V, F, F, F.
E) F, F, V, F, V, V.
Exercícios de fixação:
1- Numere a Segunda coluna de acordo com a primeira e depois assinale a alternativa que contenha a seqüência correta:
Coluna I
(1) bacilos
(2) estreptococos
(3) estafilococos
(4) tétrades
(5) sarcina
(6) espirilos
Coluna II
( ) cocos em grupos densos
( ) cocos em grupos aproximadamente cúbicos
( ) cocos em fileira
( ) filamentos helicoidais
( ) bastonete reto em geral de 1 a 15 micra
( ) cocos em grupo de quatro
a) 2-3-5-6-1-4
b) 2-5-3-6-1-4
c) 3-5-2-1-6-4
d) 2-5-3-6-4-1
e) 5-3-1-2-4-6
2- Bactérias causadoras de infecção e que são vistas ao microscópio como grupamento de glóbulos em cacho certamente são:
a) estafilococos.
b) estreptococos.
c) diplococos.
d) micrococos.
e) bacilos.
3- Em relação a morfologia, as bactérias com formas esféricas, de bastão, em cacho de uva e em colar denominam-se, respectivamente:
a) cocos, bacilos, estafilococos, estreptococos.
b) bacilos, cocos estafilococos, estreptococos.
c) cocos, bacilos, estreptococos, estafilococos.
d) bacilos, cocos, estreptococos, estafilococos.
e) estreptococos, estafilococos, bacilos, cocos.
4-  Medidas de saneamento básico são fundamentais no processo de promoção de saúde e qualidade de vida da população. Muitas vezes, a falta de saneamento está relacionada com o aparecimento de várias doenças. Nesse contexto, um paciente dá entrada em um pronto atendimento relatando que há 30 dias teve contato com águas de enchente. Ainda informa que nesta localidade não há rede de esgoto e drenagem de águas pluviais e que a coleta de lixo é inadequada. Ele apresenta os seguintes sintomas: febre, dor de cabeça e dores musculares. Ao microscópio ótico foram vistos bactérias em formato de “saca-rolhas que tendem a se mover com um movimento ondulante semelhante ao de uma hélice
Disponível em: http://portal.saude.gov.br. Acesso em: 27 fev. 2012 (adaptado).
Relacionando as características apresentadas com as condições sanitárias da localidade, há indicações de que o paciente apresenta um caso de
a) difteria.   
b) botulismo.   
c) tuberculose.   
d) leptospirose.   
e) meningite meningocócica.  
5- Observe a figura abaixo: 
Esta é a foto de uma bactéria que causa uma doença transmitida por relações sexuais desprotegida, a Neisseria gonohrroeae, esta bactéria apresenta-se como _______________________________ e é responsável por causar uma doença chamada de gonorréia. Alguns membros são habitantes normais das vias aéreas humanas e de ocorrência extracelular, enquanto outros (gonococos, meningococos) são patogênicos para o homem, e sua localização é tipicamente intracelular. Acerca do texto, a alternativa que apresentam as palavras que melhor se encaixa no espaço acima é:
A) Bacilos gram negativos dispostos ao pares
B) Estreptobacilos gram negativos
C) Cocos gram positivos aos pares
D) Diplococos gram negativos
E) Cocobacilos gram negativos
Questões de Prova:
1- Como já sabemos, as bactérias podem possuir diversas classificações que podem ser baseadas na sua seqüência de ácidos nucléicos (DNA) que define sua análise filogenética, nas suas características tintoriais (coloração de gram) e na sua forma e arranjo, podendo ser cocos, bacilos, espirilos, sarcina, tétrades e espiroquetas etc... e no seu arranjo. Abaixo podemos observar fotos destes microorganismos a partir de microscopia óticae coloração. Julgue as alternativas abaixo em “V” quando considerá-la verdadeira e “F” quando considera-la falsa. A seguir marque apenas a alternativa que condiz com seqüência de respostas corretas.
I-( ) A bactéria representada na figura de número 9 causa uma doença sexualmente transmissível denominada sífilis e são diplococos gram negativos.
II-( ) Observando a Figura 8. As infecções mais comuns acometidas por estas bactérias são: furúnculos, sepses da pele, infecções pós-operatória, endocardites, osteomelites, síndrome da pele escaldada, síndrome do choque tóxico e infecções por alimentos.
III-( ) A Figura 6 é formado pela espécie Streptococcus pyogenes, é do tipo beta e é o que tem maior relevância. Causa algumas doenças graves que precisa de atenção especial médica: a faringite estreptocócica; erisipela; febre puerperal; febre reumática; glomerulonefrite aguda. 
IV-( ) Na figura 2 temos como O principal representante o Treponema paliddum, agente etiológico da sífilis que é uma doença infecciosa causada pela bactéria Treponema pallidum.
V- ( ) Na figura 5 temos bacilos gram positivos, os principais representantes deste arranjo e positividade na coloração de gram são os Clostridium sp. que causam doenças como botulismo e tétano.
VI- ( ) As bactérias representadas na figura 3 são bacilos gram negativos pequenos, que justamente pelo seu tamanho diminuto assemelham-se a cocos. Causam doenças relacionadas a vaginose
A) F, F, V, V, F, V.
B) F, V, F, V, F, F.
C) F, F, F, V, V, V.
D) F, F, V, F, F, F.
E) F, V, V, V, V, V.
2-  CASOS DE LEPTOSPIROSE CRESCEM NA REGIÃO
M.P.S. tem 12 anos e está desde janeiro em tratamento de leptospirose. Ela perdeu a tranqüilidade e encontrou nos ratos, (...), os vilões de sua infância. "Se eu não os matar, eles me matam", diz. Seu medo reflete um dos maiores problemas do bairro: a falta de saneamento básico e o acúmulo de lixo...
            (O Estado de S. Paulo, 31/07/1997)
 OITO SUSPEITOS DE LEPTOSPIROSE
A cidade ficou sob as águas na madrugada de anteontem e, além de 120 desabrigados, as inundações estão fazendo outro tipo de vítimas: já há oito suspeitas de casos de leptospirose (...) transmitida pela urina de ratos contaminados.
            (Folha de S. Paulo, 12/02/1999)
 
As notícias dos jornais sobre casos de leptospirose estão associadas aos fatos:
I. A Leptospirose é uma doença causada por uma bactéria denominada Treponema pallidum.
II. As bactérias causadoras da leptospirose são bacilos curvos.
III. As espiroquetas causadoras desta doença são bactérias em forma de saca-rolhas que tendem a se mover com um movimento ondulante semelhante ao de uma hélice.
IV. As principais cepas (espécies) das espiroquetas incluem o Treponema, a Borrelia, a Leptospira e o Spirillum. Muitas espécies de espiroquetas são agentes patogénicos nocivos ao homem. 
 
a) Apenas II está correta   
b) I, II e III estão corretas 
c) III e IV estão corretas   
d) Apenas III esta correta   
e) Não há alternativas corretas 
Questão discursiva:
Desde os primórdios da humanidade, os seres humanos são vítimas fatais de uma gama de microorganismo. Os principais causadores de doenças sistêmicas que levou essas populações à óbito foram as bactérias. Antes do tratamento com antibióticos, as bactérias foram responsáveis por dizimar populações inteiras, como por exemplo, a Yersínia pestis que causou mais de 300 milhões de mortes na Europa. Nos dias atuais algumas bactérias persistem pelo uso indiscriminado dos antibióticos, e dois gêneros bacterianos envolvidos nessa resistência são os estreptococos e os estafilococos representados nas figuras abaixo respectivamente.
Acerca do texto e figuras acima, seus conhecimentos em formas e arranjos bacterianos e doenças principais causadas por esses microorganismos, responda:
A) Qual o arranjo das bactérias observadas nas figuras acima?
B) Quais as principais características e doenças causadas por estas bactérias?
Atividade 1: Compreensão: 
A parede celular bacteriana é uma estrutura complexa de várias camadas cuja composição varia conforme o hábito de cada organismo perante os processos evolutivos e adaptativos. Esta estrutura esta está relacionada a uma gama de funções de síntese, forma e resistência bacteriana, além de estar relacionada à divisão binária da célula procariótica. Vários pesquisadores estudaram por anos a estrutura da parece celular bacteriana, e chegaram à conclusão de que esse emaranhado de proteínas e lipídeos poderia ser utilizado à favor do próprio homem, como por exemplo na busca de um antibiótico que atacasse essa estrutura, já que ela não é encontrada em células humanas, tornando este medicamento único e específico. A parede bacteriana possui várias estruturas, e existe ainda muitas diferenças entre estruturas de bactérias gram-positivas e gram-negativas. Desta forma faça um quadro diferenciando a estrutura da parede celular de bactérias das duas classes tintoriais. Gram-positivas e Gram-negativas.
	Bactérias Gram-positivas
	Bactérias Gram-positivas
	
	
	
	
	
	
	
	
Atividade 2- Contextualização:
Uma das principais características das bactérias gram-negativas é a presença de uma estrutura na sua membrana externa. Trata-se de uma molécula de grandes dimensões constituída de um lípido e um polissacarídeo (carbohidrato) ligados por uma ligação covalente. LPS é um dos componentes principais da membrana exterior destas bactérias, contribuindo muito para a integridade estrutural da bactéria, protegendo a membrana de certos tipos de ataque químico. O LPS é uma endotoxina, provocando uma forte resposta por parte de sistemas imunitários animais normais. Abaixo segue uma estrutura do lipopolissacarídeo.
No laboratório clínico essa estrutura é muito importante. Você é o responsável pelo setor de microbiologia do laboratório “Carlos Chagas” e recebeu uma ligação telefônica de um médico questionando seu laudo que tinha o seguinte resultado:
Bacterioscopia: Positiva. Presença de bastonetes gram negativos
Crescimento em Ágar SS: Positivo
Crescimento em Ágar Cled: Positivo
Crescimento em Ágar MacConkey: Positivo
Provas bioquímicas: TSI
			SIM Salmonela sp.
			CITRATO
Questionamento do médico: Não é possível realizar tratamento com antibióticos sem saber por qual Salmonela o paciente está infectado. 
Com base no texto, figura e caso clínico argumente o que você pode fazer para ajudar o médico a iniciar a antibióticoterapia específica o mais rápido possível.
Exercícios de Fixação:
1- As bactérias têm capacidade de estimular a formação de anticorpos, quando inoculadas em animais de laboratório. Sabendo-se que esse potencial antigênico é devido à natureza química de três estruturas encontradas na célula intacta da bactéria, assinale a opção em que essas estruturas se fazem presentes. 
A) Cápsula, lipopolissacarídeo (LPS) e DNA. 
B) Parede celular, cromossomos e membrana. 
C) Parede celular, flagelo e cápsula. 
D) Cápsula, flagelo e DNA. 
2- Os envelopes celulares de bactérias Gram-positivas e Gram-negativas são compostos de macromoléculas complexas. Qual das seguintes afirmativas descreve os envelopes de células Gram-positivas e Gram-negativas? 
a) Contém uma quantidade significativa de ácido teicóicos;
b)  A especificidade antigênica é determinada pelo antígeno polissacarídeos “O”; 
c) Atuam como uma barreira à extração do complexo cristal-violeta-iodo pelo álcool; d)  Contém os aminoácidos usuais; 
e)  São barreiras à difusão de grandes moléculas providas de cargas;
3- A parede celular é um envoltório extracelular presente em todos os vegetais e algumas bactérias, fungos e protozoários, cuja composição varia conforme o hábito de cada organismo perante os processos evolutivos e adaptativos. Essa estrutura impossibilita alterações morfológicas dos organismos, em razão de seu caráter semirrígido, ou seja, as células não conseguem alterar a forma em consequência do impedimento espacial limitado pela rigidez da parede celular. Em relação aos envelopes celulares de bactérias é corretoafirmar: 
a) O envelope da célula bacteriana consiste, em ambos, em parede e membrana celular: b) O envelope das bactérias Gram-positivas consiste em parede e membrana celular; 
c)  O envelope das bactérias Gram-negativas consiste em parede e membrana celular; d)  O envelope celular de bactérias Gram-negativas contém moléculas de lipoproteína, lipopolissacarídeos e peptídeoglicana; 
e)  Todas estão corretas.
4- Em relação aos envelopes celulares de bactérias é correto afirmar: 
a)  O componente polissacarídeo do lipopolissacarídeo é o antígeno “O”; 
b)  As bactérias Gram-positivas contém grandes quantidade de ácido teicóico; 
c)  A parede celular de bactérias Gram-positivas atuam como uma barreira do complexo cristal-violeta-iodo pelo álcool; 
d)  Grandes moléculas providas de cargas não difundem livremente através da membrana citoplasmática;
 e)  Todas estão corretas.
5-  Aforma da bactérias pode ser observada através de coloração de Gram que divide as bactérias em dois grupos: Gram-positivas e Gram-negativas, aproximadamente iguais em número e impotância. A reação das bactérias à técnica de Gram expressa diferentes características, de modo especial no que diz respeito à composição química, estrutura, permeabilidade da parede celular, fisiologia, metabolismo e patogenicidade. As bactérias Gram-negativas, diferem das Gram-positivas: 
a) pela presença da peptídeoglicana; 
b)  pela presença da membrana externa; 
c) pela presença dos antígenos polissacarídeos “O”; 
d) pela ausência do N-acetil murâmico na parede celular; 
e)  pela presença de ácido teicóico.
Questões de Prova:
1- Analise as afirmativas abaixo e julgue a alternativa que condiz apenas com alternativas verdadeiras.
I- Quando uma bactéria Gram-negativa é tratada com etanol, o lipídeo na membrana externa é dissolvido e removido. Isto rompe a membrana externa e aumenta sua permeabilidade. Assim, o complexo corante pode ser removido, descorando a bactéria Gram-negativa.
II- A parede celular é um envoltório extracelular presente apenas nas bactérias, cuja composição varia conforme o hábito de cada organismo perante os processos evolutivos e adaptativos. 
III- A função primordial da parede bacteriana é conferir resistência e proteção celular, impedindo a lise osmótica quando em meio hipotônico.
IV- Em algumas espécies é possível observar as endotoxinas, substâncias que induzem o sistema imune a ter uma reação exacerbada e provocar a morte do próprio hospedeiro. Essa estrutura é observada apenas em bactérias gram-negativas.
V- Depois de cessado o crescimento bacteriano, a parede recebe novas camadas de celulose e outras substâncias conferindo maior resistência, denominada de parede secundária. Bacterias gram-negativas possuem um maior número de camadas dessa estrutura, denominada de peptidoglicano.
A) I, II, III e IV são verdadeiras.
B) II, III, IV e V são verdadeiras.
C) I, II e V são verdadeiras.
D) I, III e IV são verdadeiras.
E) I ,II, IV e V são verdadeiras.
2- A parede celular é uma estrutura extracelular que envolve células, sendo composta por diferentes substâncias dependendo do organismo. É uma estrutura que confere proteção à célula pela sua rigidez. De acordo com a estrutura da parede celular analise as afirmativas abaixo e julgue a alternativa que condiz com um resultado de apenas afirmativas verdadeiras.
I- A parede bacteriana e a coloração de gram são diretamente ligadas, sendo assim as bactérias gram-positivas por apresentarem uma camada de peptidoglicano mais rígida e compacta em relação as gram-negativas conseguem reter o corante violeta.
II- Por serem relativamente carregados, os ácidos teicoicos, presente apenas em bactérias gram positivas, são responsáveis, em parte, pela carga negativa da superfície celular como um todo. A composição do ácido teicoico, formado por determinada espécie bacteriana, pode variar de acordo com a composição do meio de crescimento.
III- Contrariamente, aos organismos gram-negativos, os gram-positivos possuem uma camada externa complexa, consistindo em polissacarídeos, lipoproteínas e fosfolipídeos. Situado entre a camada da membrana externa e a membrana citoplasmática encontra-se o espaço periplasmático, que, em algumas espécies, corresponde ao sítio de enzimas denominadas β-lactamases, as quais degradam penicilinas e outros fármacos β-lactâmicos.
IV- A membrana externa de uma bactéria gram-negativa é quimicamente distinta de todas as outras membranas biológicas. Forma uma estrutura em dupla camada; seu folheto interno assemelha-se, em sua composição, ao da membrana celular, enquanto os fosfolipídios do folheto externo contêm um componente distintivo, o LPS.
V- A maioria das bactérias gram-negativas possuem diversas cepas que causam doenças semelhantes, ou ate mesmo doenças em diferentes sítios invasivos. Desta forma precisamos saber qual a bactéria daquele gênero esta infectando uma determinada pessoa. A distinção entre essas cepas é feita através da fração do lipídeo A contidos no LPS.
F) I, II, III e IV são verdadeiras.
G) II, III, IV e V são verdadeiras.
H) I, II e V são verdadeiras.
I) I, III e IV são verdadeiras.
J) II e IV são verdadeiras.
Questão discursiva:
O diagnóstico microbiológico, especialmente o bacteriano, é uma medida essencial no estabelecimento da etiologia das enfermidades infecciosas por ter a capacidade fundamental de identificação do agente patológico, e mais atualmente, a sensibilidade in vitro  a antimicrobianos. Existem estruturas celulares que são utilizadas pelo laboratorista para elucidar o diagnóstico do agente etiológico da infecção e até mesmo fazer a sorotipagem correta da cepa pertencente àquela classe de bactérias. Dentre essas estrutura temos o LPS nas gram-negativas e a cápsula nas gram-positivas. De acordo com informações do texto, e seus conhecimentos, relacione as figuras três figuras abaixo com o diagnóstico microbiológico, argumentando a relação da figura “A” em relação as figuras “B” e “C”.
		Figura A
Figura B							Figura C
Exercício de Prova:
1- Luis Inácio da Silva é o farmacêutico bioquímico responsável pelo laboratório de análises clínicas “Carlos Chagas” na cidade de Uberaba-MG por trinta anos. Todos os dias ele fica responsável pela coloração de gram de todo material do setor de microbiologia do laboratório. Como Luis é muito experiente, durante todos esses anos ele memorizou a técnica de coloração e dessa forma vem trabalhando neste setor. Na ultima semana, Luis Inácio notou que a coloração das lâminas de bactérias urinárias não estava no padrão de qualidade como costumava ser nos últimos anos. Ele notou que as lâminas apresentaram coloração dupla e que algumas lâminas estavam “embaçadas” quando observadas ao microscópio ótico, como mostra a figura abaixo. Você acabou de ser contratado pelo laboratório e ajudará Luis Inácio neste problema. 
A) Crie pelo menos três argumentos que faça com que as lâminas do setor de microbiologia não apresentem mais os problemas encontrados anteriormente.
B) Qual seria o procedimento correto quanto à qualidade técnica e profissional do laboratório que evitaria que esse problema ocorra?
2- A técnica de Gram, também conhecida como coloração de Gram, é um método de coloração de bactérias desenvolvido pelo médico dinamarquês Hans Christian Joachim Gram (1853-1938), em 1884. O método consiste em tratar sucessivamente um esfregaço bacteriano, fixado pelo calor, com os reagentes cristal violeta, lugol, etanol-acetona e fucsina básica. As bactéricas que adquirem a coloração azul violeta são chamadas de Gram-positivas e aquelas que adquirem a coloração vermelho são chamadas de Gram-negativas. É um método de fácil execução, porém necessita de um técnico experiente e atencioso na confecção e coloração das lâminas e um farmacêutico com habilidades natas em microbiologia para interpretá-las. Julgues as alternativas abaixo e assinale a que mais condiz com as opções corretas:
I- O método da coloração de Gram é baseado na capacidade das paredes celulares debactérias Gram-negativas de reterem o corante cristal violeta no citoplasma durante um tratamento com etanol-acetona enquanto que as paredes celulares de bactérias Gram-positivas não o fazem.
II- A coloração de Gram é um dos mais importantes métodos de coloração utilizados em laboratórios de microbiologia e de análises clínicas, sendo quase sempre o primeiro passo para a caracterização de amostras de bactérias. A técnica tem importância clínica uma vez que muitas das bactérias associadas a infecções são prontamente observadas e caracterizadas como Gram-positivas ou Gram-negativas em esfregaços de pus ou de fluidos orgânicos.
III- Ao microscópio, as células Gram-positivas aparecerão coradas em violeta escuro e as Gram-negativas em vermelho ou rosa escuro. Células de bactérias Gram-positivas, células velhas, mortas ou com envelopes danificados por agentes físicos ou químicos, tendem a perder o cristal violeta e uma mesma amostra bacteriana pode exibir parte ou todas as células coradas como Gram-negativas.
IV- O uso de material fresco nem sempre é importante. Resultados do tipo "falso Gram-positivo" só são obtidos se o tratamento com etanol-acetona for omitido.
V- Microrganismos isolados de pacientes sob antibioticoterapia podem apresentar respostas anormais à coloração de Gram, tanto morfológica como tintorial. 
a) I, II, III e V estão corretas.
b) II, IV e V estão incorretas
c) Apenas a II e III estão corretas
d) I e IV estão incorretas
e) Todas as alternativas estão corretas
3- Uma das profissões mais importantes dentro de um laboratório clínico é o microscopista. Em qualquer área do laboratório, quanto mais experiente for o microscopista, mais confiáveis serão os resultados. Na microbiologia, o primeiro teste de identificação de um material clínico, por exemplo, urina, é a coloração de gram. Assim, em poucos minutos, já se sabe qual o grupo de microorganismos podem estar atacando aquele paciente ( i. é gram-positivo e/ou gram-negativo). Dependendo da experiência e dos conhecimentos do farmacêutico tal coloração já dá presuntivamente a idéia de qual o microorganismo está presente naquela amostra. Analise as lâminas abaixo e julgue as alternativas que melhor condiz com a resposta CORRETA.
 
A B C
 
D
I- A foto “B” representa bacilos gram-positivos em forma de cadeia, também conhecido como estreptobacilos.
II- A foto “B” e “C” representam cocos, e ambos possuem características tintoriais de gram-positivas. Porém em “B” observamos estreptococos e em “C” observamos estafilococos.
III- A foto “A” mostra cocos dispostos aos pares, com características tintoriais de gram-negativo.
IV- A foto “D” representa a presença de bastonetes gram negativos.
A) Todas as alternativas estão corretas
B) Todas as alternativas estão incorretas
C) Apenas a alternativa I está incorreta
D) As alternativas I, II e III estão corretas
E) As alternativas I, III e IV estão corretas
Questões de Prova
1- Staphylococcus sp. são cocos G+ arranjados em cachos, que fazem parte da microbiota da pele, porém podem causar patogenias e serem responsáveis infeções piogênicas e septicemias fatais. Alguns fatores favorecem estas infecções, como alterações hormonais (puberdade) e metabólicas (diabetes). No diagnóstico dessas bactérias, o laboratorista utiliza testes que identificam enzimas e proteínas que fazem parte do sistema de ataque e defesa utilizados por estas bactérias para colonizar e causar doença. De acordo com o texto e seus conhecimentos correlacione a prova utilizada com suas características e assinale a alternativa que possui apenas afirmativas verdadeiras.
( )É uma enzima que decompõe o peróxido de hidrogênio (H202) em água e oxigênio. 
( ) É uma proteína de composição desconhecida, com atividade semelhante à protrombina, capaz de transformar o fibrinogênio em fibrina.
( ) Staphylococcus coagulase negativa isolados de culturas quantitativas de urina, suscetíveis, fazem o diagnóstico presuntivo de Staphylococcus saprophyticus
( ) Está presente em duas formas: livre e conjugada, e cada uma possui propriedades diferentes que requerem o uso de técnicas separadas.
( ) Quimicamente é uma hemoproteína, com estrutura similar a da hemoglobina, exceto que os 4 átomos de ferro na molécula estão na forma oxidada.
( 1 ) Catalase ( 2 ) coagulase ( 3 ) novobiocina
A) 1, 2, 3, 2, 2
B) 2, 1, 3, 1, 1
C) 3, 1, 1, 2, 2
D) 3, 3, 1, 2, 1
E) 1, 2, 3, 1, 1
2- Staphylococcus sp. são cocos G+ arranjados em cachos, que fazem parte da microbiota da pele, porém podem causar patogenias e serem responsáveis por infeções piogênicas e septicemias fatais. Alguns fatores favorecem estas infecções, como alterações hormonais (puberdade) e metabólicas (diabetes). No diagnóstico dessas bactérias, o laboratorista utiliza testes que identificam enzimas e proteínas que fazem parte do sistema de ataque e defesa utilizados por estas bactérias para colonizar e causar doença. De acordo com o texto e seus conhecimentos, identifique a figura abaixo e marque a alternativa correta.
Aspecto da colônia e coloração de Gram
Cocos Gram positivos
“TESTE A”
“TESTE A”
 Positivo
“TESTE B”
 
“TESTE B” positiva			“TESTE B” negativa
 Ou Staphy teste positivo
	“TESTE C”	 		 TESTE C”		 Sensíveis			 Resistentes
 Staphylococcus aureus
 			 Staphylococcus		 Staphylococcus
				 Coagulase negativa		 saprophyticus
				 ou Staphylococcus
					epidermidis
De acordo com a figura acima, os testes intitulados como “TESTE A” “TESTE B” e “TESTE C” são respectivamente:
A) Catalase, coagulase e novobiocina
B) Coagulase, catalase e novobiocina
C) Catalase, Coagulase em tubo e bacitracina
D) Coagulase em tubo, Catalase, Novobiocina
E) Catalase, Coagulase, optoquina
Questão discursiva:
A identificação dos estreptococos e estafilococos é baseada na morfologia que apresentam em meios líquidos. Sendo o estreptococo uma cadeia normalmente longa e os estafilococos mostrando-se em forma de cocos aos pares, em cachos de uva ou agrupados. A identificação presuntiva começa com a inoculação primária na placa de ágar sangue de carneiro que deve ser incubada em 5% de tensão de CO² (método da vela ou estufa de CO2). As colônias de estafilococos são geralmente maiores, convexas, de coloração variando do branco-porcelana a amarelo podendo apresentar hemólise ou não. A diferenciação entre os estreptococos e os estafilococos se dá, seguramente, pela prova da catalase. Argumente como é feito esse teste e o seu princípio, e como é possível a visualização macroscópica desse teste.
Questões de Prova
1- Embora os estreptococos façam parte da microbiota normal da pele, vias aparelho genito-urinário e trato intestinal, muitos deles são responsáveis por uma variedade de manifestações clínicas. Os estreptococos necessitam de meios de cultura enriquecidos pela adição de sangue (Ágar-sangue) e possuem capacidade hemolítica. Sendo assim, são classificados como beta-hemolíticos (hemólise total), alfa hemolíticos (hemólise parcial) e gama-hemolíticos / não-hemolíticos (não causam hemólise). Após a hemólise existem outros testes laboratoriais que diferenciam os estreptococos mais relacionados com as doenças humanas. De acordo com a figura abaixo identifique quais são os testes intitulados de “TESTE A” “TESTE B” “TESTE C” “TESTE D” “TESTE E” , em seguida assinale a alternativa que possue a ordem correta destes testes:
A) Catalase, coagulase, optoquina, novobiocina, NaCl.
B) Catalase, coagulase, bacitracina, novobiocina, NaCl.
C) Coagulase, optoquina, bacitracina, bile, NaCl
D) Catalase, bacitracina, optoquina, NaCl, bile.
E) Catalase, optoquina, bacitracina, Bile, NaCl
2- Os estreptococos podem ser diferenciados de acordo com sua aparência na placa de ágar sangue após incubação a 35°C em presença de 5% de CO2, podendo apresentar: hemólise total (beta), parcial (alfa, de cor esverdeada)ou nenhuma (gama). A identificação de espécie de estreptococos beta hemolíticos é feita através de aglutinação com soros específicos contra os antígenos de Lancefield (A, B, C, D, F e G), que constitui uma prova rápida, porém não acessível a todos os laboratórios em virtude do elevado custo. Devido a esse elevado custo, essa diferenciação é feita através de testes baseados em antibióticos. De acordo com o texto acima e seus conhecimentos, julgue as afirmativas abaixo e assinale a alternativa que apresenta apenas afirmativas verdadeiras.
I- O tipo de hemólise produzida em ágar sangue é muito útil para identificação inicial dos estreptococos, pois direciona os tipos de testes que serão feitos a seguir para a identificação da espécie.
II- Alfa hemólise: Apresentam uma zona nítida de lise total de hemácias em torno da colônia, com coloração esverdeada. Circundando essa zona pode haver uma zona de hemólise clara, estreita ou larga, que tende a aumentar com o prolongamento da incubação, dando a falsa impressão de hemólise beta.
III- Estreptococos do grupo A são sensíveis a baixas concentrações de bacitracina e resistentes a sulfametoxazol-trimetoprim. Estreptococos do grupo B são resistentes a ambos. Outros estreptococos hemolíticos mostram susceptibilidade variada a bacitracina, mas são suscetíveis a sulfametoxazol-trimetoprim. A interpretação dos dois testes aumentou a sensibilidade e especificidade do teste da bacitracina.
IV- Dentre os vários tipos de testes empregados na diferenciação de pneumococos dos outros estreptococos hemolíticos ou outros cocos, o mais correntemente usado é o da sensibilidade à bacitracina. A bacitracina (cloridrato de etil-hidroxicupreína), um derivado de quinina, inibe seletivamente o crescimento de Streptococcus pneumoniae em concentrações muito baixas (5 mg/ml). 
V- O teste da bile-esculina é baseado na habilidade de certas bactérias, notavelmente estreptococos do grupo D e Enterococcus sp de hidrolisar a esculina na presença de bile. A esculina é um derivado cumarínico glicosilado. 
A) I, III e V
B) I, II, III, IV, e V
C) I, II, IV e V
D) II, III e V
E) II, III, IV e V
Questão discursiva:
HISTÓRIA CLÍNICA : C.M.S., sexo feminino, 30 anos, compareceu ao pronto atendimento do Hospital Universitário, queixando-se que, há 3 dias, vem apresentando febre, fraqueza e tontura. Refere perda de peso significativa nos últimos 3 meses. Apresentava dor de garganta e tosse produtiva.
EXAME FÍSICO:
Mucosas: úmidas, hiperemiadas e ictéricas (+++/++++)
Sist. Respiratório: pulmões limpos
Hiperemia de orofaringe com produção de secreção
Abdome: Plano, sem visceromegalias, doloroso à palpação
· Cultura de secreção do orofaringe: 
Houve o crescimento de Streptococcus pyogenes.
De acordo com o resultado do caso clínico, argumente como o laboratorista chegou a essa conclusão de resultado, dando ênfase nas provas diagnósticas básicas para identificação de cocos gram-positivos.
.
- ATIVIDADES DE COMPREENSÃO E FIXAÇÃO:
1 – Sabemos que de acordo com o estado físico dos meios de cultura eles podem aparecer na forma sólida, semissólida e liquida. Diante disse explique por qual ou quais motivos utilizamos os meios líquidos e sólidos.
2 – Os meios de cultura podem ser classificados de acordo com sua função, um dos amis importantes são os meios seletivos como e meio da imagem abaixo. Diante disso responda por quais motivos eu devo utilizar um meio seletivo.
- EXERCÍCIOS DE FIXAÇÃO PARA PLATAFORMA ADAPTATIVA:
1 - Os meios de cultura podem ser usados ou aplicados em diversas situações, diante disso todos os abaixo estão corretos de acordo com suas aplicações e finalidade exceto:
A – Estocagem ou manutenção
B – Contagem
C – Identificação
D – Diferencial
E – Filtração
2 – Com relação aos meios seletivos é correto afirmar que:
A - Eles contém substâncias que inibem o desenvolvimento de determinados grupos de microrganismos, permitindo o crescimento de outros. Exemplo: meios com telurito de potássio (para isolamento de Corynebacterium diphtheriae), ágar Salmonella-Shigella (SS) e ágar MacConkey, meios com sais biliares e verde brilhante para isolamento seletivo de Salmonella, meios com 7,5% de cloreto de sódio, meio Baird-Parker, para isolamento de Staphylococcus aureus.
B – Eles contém substâncias que inibem o desenvolvimento de determinados grupos de microrganismos, permitindo o crescimento de outros. Exemplo: meios com telurito de sódio (para isolamento de Corynebacterium diphtheriae), ágar Salmonella-Shigella (SS) e ágar MacConkey, meios com sais biliares e verde brilhante para isolamento seletivo de Salmonella, meios com 7,5% de cloreto de sódio, meio Baird-Parker, para isolamento de Staphylococcus aureus
C – Eles contém substâncias que não inibem o desenvolvimento de determinados grupos de microrganismos, permitindo o crescimento de outros. Exemplo: meios com telurito de potássio (para isolamento de Corynebacterium diphtheriae), ágar Salmonella-Shigella (SS) e ágar MacConkey, meios com sais biliares e verde brilhante para isolamento seletivo de Salmonella, meios com 7,5% de cloreto de sódio, meio Baird-Parker, para isolamento de Staphylococcus aureus
D – Eles contém substâncias que inibem o desenvolvimento de determinados grupos de microrganismos, permitindo o crescimento de outros. Exemplo: meios com telurito de potássio (para isolamento de Corynebacterium diphtheriae), ágar Salmonella-Shigella (SS) e ágar Sangue, meios com sais biliares, açucares e verde brilhante para isolamento seletivo de Salmonella, meios com 7,5% de cloreto de sódio, meio Baird-Parker, para isolamento de Staphylococcus aureus
E – NDA
3 – O meio de cultura mais utilizado para isolamento e diferenciação de cocos Gram positivos é:
A – Ágar SS
B – Ágar Sangue
C – Ágar 
D – Ágar MacConkey
E – Ágar Chocolate
4 - Os meios de cultura podem ser classificados quanto ao seu estado físico em:
A – Sólido, semissólido líquido e pastoso
B – Sólido, líquido e pastoso
C – Sólido, semissólido e líquido
D – Sólido e líquido
E - NDA 
5 – O meio de cultura conhecido como ágar tríplice açúcar e ferro é usado para qual finalidade:
A – Triagem de microrganismo
B – Identificação de microrganismo
C – Estocagem de microrganismo
D – Identificação de microrganismo
E - NDA
- QUESTÕES PARA A PROVA:
1 – Você recebeu duas amostras de cultura de microrganismo, a amostra A e confirmada como enterobactéria e você terá que identificar o gênero e a espécie. A outra amostra B e sugestivo de Salmolena sp. E você terá que selecionar a cepa para posterior confirmação. Diante dessas informações quais meios de cultura você usaria? Justifique sua resposta.
2 – Os meios de cultura são classificados de acordo com sua função ou utilização diante disso analise as alternativas abaixo e marque aquela que mais condiz com situação correta para a utilização de um meio de cultura enriquecido.
B - Quando não houver a necessidade de proporcionar nutrientes adequados ao crescimento de microrganismos presentes usualmente em baixos números ou de crescimento lento, bem como microrganismos exigentes e fastidiosos. Esses meios têm a propriedade de estimular o crescimento de determinados microrganismos, mas existem alguns que também podem inibir o crescimento de outros.
C – Quando houver a necessidade de proporcionar nutrientes adequados ao crescimento de microrganismos presentes usualmente em números elevados ou de crescimento rápido, bem como microrganismos exigentes e fastidiosos. Esses meios têm a propriedade de estimular o crescimento de determinados microrganismos, mas existem alguns que também podem inibir o crescimento de outros.
D - Quando não houver necessidade de proporcionar nutrientes adequados ao crescimento de microrganismos presentes usualmente em altos números ou de crescimento rápido, bem como microrganismos exigentes e fastidiosos. Esses meios têm a propriedade de estimular o crescimento de determinados microrganismos, mas existem alguns que também podem inibir o crescimento de outros.
E – NDA
3 – Com relação ao estado físico do meio de culturarelacione a primeira coluna com a segunda. Lembrando que cada letra da primeira coluna só irá se encaixar em uma única alternativa da segunda coluna.
A – Sólido
B – Semissólido
C – Líquido
( A ) Quando contém agentes solidificantes, principalmente ágar (cerca de 1 a 2,0 %)
( ) Quando contém agentes solidificantes, principalmente ágar (cerca de 1 a 20 %)
( ) Quando contém agentes solidificantes, principalmente ágar (cerca de 0,01 a 2,0 %)
( ) Quando a quantidade de ágar e ou gelatina for de 0,075 a 0,5 %
( ) Quando a quantidade de ágar e ou gelatina for de 0,075 a 5,0 %
( ) Quando a quantidade de ágar e ou gelatina for de 0,0 a 00,5 %
( ) Quando não houver quantidade nenhuma de gelatina
Atividade 1: Compreensão 
1) A perda das proteínas de membrana externa, porinas, que constituem o canal de entrada dos β-lactâmicos e a presença de bombas de efluxo ocorre à alteração da permeabilidade da membrana externa Estes mecanismos geralmente encontram-se associados a outros mecanismos de resistência bacteriana, como, principalmente, a produção de β-lactamases. Explicar a função das porinas na membrana externa de células bacterianas Gram-negativas.
Atividade 2: Contextualização
1-Ao discutirmos a resistência bacteriana é conveniente considerar tanto os mecanismos de ação dos antimicrobianos quanto as propriedades necessárias para a sua eficácia. A bactéria que apresentar na estrutura de sua parede celular uma camada extramembranosa, que se “cora” de rosa com a coloração de Gram e que apresentam maior resistência a antibióticos, além de ser potencialmente mais tóxicas, é classificada como, justifique as alternativas erradas.
a) Bactéria Gram Positiva
b) Bactéria Gram Negativa
c) Bactéria de Gram
d) Micoplasma
e) Todas as anteriores estão erradas
Exercícios de fixação:
1-Em relação a coloração de Gram marque (V) para verdadeiro e (F) para falso.
( )O Cristal de Violeta e o lugol penetram tanto na bactéria Gram (-) como nas (+).
( ) No Gram usa-se cristal de violeta, lugol, álcool, fucsina e azul de cresil.
( ) O álcool somente retém o corante e não diferencia as gram-positivas.
( ) Gram-negativas coram de cor avermelhadas e as gram-positivas de cor roxa.
2-A seqüência correta na Coloração de Gram e:
A )Violeta de metila - lugol -Álcool acetona - Safranina
B )Fucsina - álcool - lugol - Cristal de violeta
C )Cristal de violeta - lugol - álcool - fucsina
D) N.D.A
3- Com relação à coloração de Gram pode-se afirmar: 
a)As bactérias mortas, mesmo há pouco tempo, são sempre Gram-positivas.
b)As bactérias mortas nunca se coram.
C)As bactérias mortas, mesmo há pouco tempo, são sempre Gram-negativas.
D)As bactérias gram-negativas retêm o corante azul do cristal violeta.
E)A coloração de Gram é ideal para corar micobactérias
4-Em relação à coloração de Gram, NÃO é correto afirmar que:
(A) a coloração de Gram começa com a aplicação de um corante básico, o cristal-violeta;
(B) a descoloração com álcool descora preferencialmente as bactérias Gram-positivas;
(C) a coloração final com o contra-corante (vermelho safranina) faz com que as células Gram-positivas adotem uma coloração
púrpura enquanto as Gram-negativas coram em vermelho;
(D) a segunda etapa na coloração de Gram é a utilização de uma solução contendo iodo que cora as bactérias com uma coloração violeta-azulada;
(E) a base diferencial da coloração de Gram é a estrutura da parede celular das bactérias.
5-Atraves do seu conhecimento adquirido diferencie uma bactéria gram-positiva de uma bactéria gram-negativa:
QUESTÕES DE PROVA
1-A coloração de Gram é usada para classificar bactérias com base no tamanho, na morfologia celular e no comportamento diante de corantes. No laboratório de microbiologia clínica, é um teste adicional rápido para diagnóstico de agentes infecciosos, sendo também utilizada para avaliar a qualidade da amostra clínica analisada. Considerando os aspectos de identificação de microrganismos, assinale a opção correta.
a) A coloração mencionada é útil para a classificação de bactérias e de vírus.
b) O método de Gram permite corar bactérias em diversos materiais, tais como escarro, liquor ou urina.
c) O Haemophilus influenzae, um coco gram-positivo, é o agente causador da gripe aviária.
d) Todos os microrganismos gram-positivos são patogênicos
2- Entre os métodos utilizados para estudos da morfologia bacteriana, a coloração de Gram se mostra muito útil, principalmente para diferenciar grupos bacterianos – denominados Gram positivos e Gram negativos – e classificar quanto a forma e o arranjo.Com base nessa informação, assinale a alternativa correta:
a) As bactérias Gram positivas apresentam a coloração rosa e podem ser encontradas na forma de cocos e de bacilos.
b) Uma característica importante na diferenciação de células bacterianas Gram negativas é a presença de uma membrana externa.
c) Uma solução de safranina é utilizada como agente descolorante.
d) As bactérias Gram negativas caracterizam-se pela presença de uma camada espessa de peptideoglicana em sua parede celular.
e) A coloração de Gram pode ser uma técnica de auxílio na terapêutica antimicrobiana, ajudando na escolha de antibióticos com ação direta nos componentes da parede celular.
3-Comparar a estrutura e a composição química das paredes celulares de bactérias Gram-negativas e Gram-positivas.
Atividade 1: Compreensão 
1- Com relação aos meios de cultura usados na rotina de laboratório, numere a segunda coluna de acordo com a primeira:
(1) Agar verde brilhante
(2) Agar Brolacin 
(3) Agar manitol salgado
(4) AgarTriple Sugar Iron
(5) Agar eosina azul de metileno
(6)Mio Medium
() É um meio seletivo para o isolamento e identificação de estafilococos patogênicos.
() É um meio diferencial utilizado no isolamento de enterobactérias e bacilos coliformes, a partir de fezes, água e outros materiais.
( ) É um meio de cultura não seletivo, idealizado para utilização em urocul-turas.
() É um meio recomendado na identificação de enterobactérias, fornecendo resultados em termos de produção de indol, ornitina descaboxilase e determinação de mobilidade.
() É um meio altamente seletivo utilizado para o isolamento do gênero salmonella, a partir de fezes e outros materiais biológicos.
A sequência numérica correta é:
a) 4, 6, 3, 1, 2.
b) 6, 2, 1, 3, 5.
c) 2, 3, 5, 4, 6.
d) 5, 1, 4, 2, 3.
e) 3, 5, 2, 6, 1.
2- Um paciente apresentou uma lesão profundana pele, suspeitando-se deinfecção causada porStaphylococcus aureus.A amostra desse paciente foi submetida a uma técnica para o isolamento e a diferenciação desse microrganismo como proceder a semadura:
Atividade 2: Contextualização
1- A rotina do Laboratório de Microbiologia envolve exposição tanto com material clínico e reagentes químicos como com potenciais agentes patogênicos concentrados em meio de cultura. Assim profissionais da área de saúde e outros trabalhadores que exercem suas atividades em laboratórios, estão sob risco de desenvolver doença por exposição a agentes infecciosos, produtos químicos tóxicos e inflamáveis, entre outros.
Atualmente, com a sofisticação das novas técnicas de diagnóstico, observamos profissionais de outras áreas, tais como físicos, químicos, analistas de sistemas, etc, envolvidos em atividades com exposição a agentes infecciosos e por outro lado, microbiologistas manipulando substâncias químicas ou materiais radioativos.
No entanto, os funcionários também são responsáveis pela sua adesão às técnicas microbiológicas seguras e da incorporação das normas de biossegurança.sendo normal fazer meios de cultura emgrandes quantidades, devem os mesmos devem ser armazenados para a sua boa qualidade de uso em. Justifique a resposta.
a) Temperatura ambiente.
b) Freezer a -20º C.
c) Geladeira entre 2 e 8º C.
d) Estufa a 56º C.
e) Freezer a -60º C.
Exercícios de fixação:
1- Os meios de cultura não são 100% específicos, podendo crescer eventualmente outros microrganismos. São meios que permitem o crescimento de um tipo de microrganismos em detrimento de outro ou de outros, pois são formuladospara suprimir o crescimento dos microrganismos que não interessam ao fim em vista, permitindo o crescimento dos microrganismos que se desejam isolar. Assim, o favorecimento de um tipo de microrganismo pode dever-se a uma ação inibidora sobre os restantes (condiciona o crescimento de uns) ou à ação estimuladora do microrganismo pretendido (mais raro) ou ambas, ou seja, inibe o crescimento de um tipo de microrganismos enquanto aumenta o crescimento de outro. Os meios de cultura que possui substâncias inibidoras de crescimento de um grupo de bactérias são chamados de:
a) Enriquecido.
b) Diferencial.
c) Seletivo.
d) Sólido.
e) Líquido.
2- As placas de Petri é uma peça de vidro ou plástico, de formato idêntico a pequeno prato de bordas verticais,as placas devem o seu nome a uma homenagem feita ao bacteriologista alemão Julius Richard Petri (1852 – 1921). São utilizadas na rotina laboratorial para:
a) Sedimento urinário.
b) Cultura e bactérias.
c) Exame parasitológico.
d) Pesagem e substâncias.
e) Dosagens bioquímicas.
3- Técnica destinada à determinação da sensibilidade bacteriana in vitro frente a agentes antimicrobianos, também conhecidos por Teste de Sensibilidade a Antimicrobianos. O meio de cultura recomendado para a realização dos antibiogramas, pois favorece o crescimento de quase todos os tipos debactérias, é:
a) Agar manitol salgado.
b) Agar Mueller Hinton.
c) Agar-sangue.
d) Cled.
e) EMB.
4- O Agar Sangue Base é um meio de uso geral e pode ser utilizado sozinho ou com a adição de substâncias como sangue ou soro, para cultivo de microrganismos fastídios (exigentes) tais como: estreptococos, pneumococos e meningococos. Quanto ao preparo deve-se acrescentar ao meiobase para o melhor crescimento bacteriano.
a) 10% de sangue de carneiro desfibrinado.
b) 5% de sangue de carneiro desfibrinado.
c) 20% de sangue de coelho.
d) 25% de sangue de coelho.
e) 15% de sangue humano heparinizado.
5-O Meio Agar Chocolate é um meio não seletivo tradicionalmente utilizado para o isolamento de microrganismos. Este meio contém substâncias nutritivas que favorecem o crescimento da maioria dos microrganismos de interesse diagnóstico.O agar chocolate é geralmente usado como meio de plaqueamento primário de materiais provenientes de:
a) Ouvido.
b) Urina.
c) Fezes.
d) Pele.
e) Líquor.
Exercícios para prova:
1-Dois meios de cultura foram inoculados com quatro bactérias diferentes. Após a inoculação, foram obtidos os seguintes resultados: 
	Organismos
	Meio de cultura 1
	Meio de cultura 2
	Enterobacter cloacae
	colônias vermelhas
	ausência de crescimento
	Staphylococcus aureus
	ausência de crescimento
	crescimento 
	Staphylococcus saprophyticus
	ausência de crescimento
	crescimento 
	Salmonella Typhi 
	colônias incolores
	ausência de crescimento
Considerando as características das colônias e a presença ou ausência decrescimento bacteriano no experimento acima, écorretoclassificar os Meiosdecultura 1 e 2,respectivamente, como:
A)seletivo e diferencial; seletivo.
B)seletivo; seletivo e enriquecido. 
C)diferencial e seletivo; diferencial. 
D)seletivo; diferencial e enriquecido. 
2-Sobre a imagem é correto afirmar:
I- Os meios de cultura bacteriana tem que sempre ser seletivos.
II- Sobre a necessidade nutricional de cada bactéria é necessário semear as culturas em meios seletivos para uma melhor identificação e diagnóstico preciso.
III- Quando proporcionam nutrientes adequados ao crescimento de microrganismos o mesmo ocorre de maneira lenta.
Assinale a alternativa correta. 
a) Somente a afirmativa I é verdadeira. 
b) Somente a afirmativa II é verdadeira.
c) Somente a afirmativa III é verdadeira. 
d) Somente as afirmativas I e II são verdadeiras. 
e) As afirmativas I, II e III são verdadeiras 
3-Cientistas frequentemente cultivam bactérias ou outros microrganismos em placas de Petri. A placa de Petri é parcialmente preenchida com ágar nutriente, uma substância do tipo gel, que suporta o crescimento bacteriano. As bactérias são, então, inoculadas no ágar, usando-se uma alça ou um swab estéril. Se feito corretamente, as bactérias irão se desenvolver, permitindo que os cientistas realizem experimentos adicionais. Para que se obtenha um crescimento bacteriano adequado às necessidades, além do meio de cultura, deve-se observar a maneira da semeadura. Descreva e dê a finalidade de cada uma das maneiras desemeadura.
Atividade 1: Compreensão 
Antibiótico é nome genérico dado a uma substância que tem capacidade de interagir com micro-organismos unicelulares ou com seres pluricelulares que causam infecções no organismo. Os antibióticos interferem com os microorganismos, matando-os ou inibindo seu metabolismo e/ou sua reprodução, permitindo ao sistema imunológico combatê-los com maior eficácia. O termo antibiótico tem sido utilizado de modo mais restrito para indicar substâncias que atingem bactérias, embora possa ser utilizado em sentido mais amplo (contra vírus, por exemplo). Ele pode ser bactericida, quando tem efeito letal sobre a bactéria ou bacteriostático, se interrompe a sua reprodução ou inibe seu metabolismo mas também causa efeitos significativos em doenças causadas por vírus como a gripe. Hoje em dia, existe uma gama muito grande de antibióticos no mercado provenientes de dezenas de indústrias farmacêuticas. Muitos desses antibióticos possuem o mesmo mecanismo de ação, porém outros, possuem mecanismos de ação distintos. Desenvolva um quadro expondo as principais classes de antibióticos e seus respectivos mecanismos de ação.
	Classes
	Mecanismo de Ação
	
	
	
	
	
	
	
	
Atividade 2: Contextualização
“O ex-jogador Sócrates morreu às 4h30 neste domingo, no Hospital Albert Einstein, em São Paulo, em decorrência de infecção generalizada. Ídolo do Corinthians, Sócrates, de 57 anos, havia sido internado pela 3ª vez, desta vez em virtude de infecção intestinal. A infecção, porém, se generalizou, afetando outros órgãos.” (Fonte: Globo.com).
O texto acima afirma que o jogador Sócrates morreu de infecção generalizada devido a uma infecção intestinal. Suponhamos que o diagnóstico da bactéria dado pelo laboratório foi de Staphylococcus aureus, e desta forma seu médico receitou o uso dos seguintes antibióticos: Penicilina, Amoxicilina e Cefalosporina. Mesmo com o uso conjugado de três antibióticos, Sócrates veio a falecer. Analise a prescrição médica e argumente porque essa tríade de antibiótico não foram suficientes para a melhora do paciente. Por que os antibióticos não fizeram efeito?
Exercícios de fixação:
1- Os antibióticos são de extrema importância para o combate a muitas doenças causadas por bactérias. No entanto, o seu uso indiscriminado pode trazer graves problemas de saúde pública, a exemplo do surgimento das bactérias multirresistentes, como a KPC. Uma classe muito importante de antibióticos tem sua eficácia por agir no ribossomo da célula bacteriana, impedindo o funcionamento correto desse componente celular. Diante do exposto, é correto afirmar que essa classe de antibiótico é eficaz por que:
a) Impede a transcrição gênica.
b) Modifica o código genético.
c) Destrói a membrana plasmática.
d) Impede a síntese de proteínas.
e) Provoca mutações gênicas.
2- Alguns antibióticos, como a eritromicina e o cloranfenicol, são utilizados no tratamento de doenças infecciosas, pois têm a capacidade de bloquear a síntese de proteínas nas bactérias, sem interferir nas células afetadas ou contaminadas. Com base nessas informações, é correto concluir que esses antibióticos atuam nas bactérias:
a) A liga-se à subunidade 50S do ribossomo, interferindo na ligação de novos aminoácidos à cadeia peptídia em formação, devido em grande parte à inibição da peptidiltransferase pelo fármaco.
b) Impedindo a transcrição do DNA nuclear.
c) Impedindo a liberação e a tradução no hialoplasma.
d) Como agentes mutagênicos do DNA mitocondrial.
e) Impedindo que os ribossomos aderidos ao retículo endoplasmático atuem na montagem das proteínas.
3- A rifampicina é um antibiótico que inibe a atividade da enzimaresponsável pela transcrição em bactérias. Se uma célula for tratada com esse antibiótico, deverá apresentar inibição:
a) Exclusivamente da produção de DNA.
b) Exclusivamente da produção de proteínas.
c) Da produção de DNA e de proteínas.
d) Da produção de RNA e de proteínas.
e) Da produção de DNA, de RNA e de proteínas.
4- Existe um número muito grande de substâncias antibióticas. Essas substâncias diferem quanto à maneira pela qual interferem no metabolismo celular. Assim, a tetraciclina liga-se aos ribossomos e impede a ligação do RNA transportador; a mitomicina inibe a ação da polimerase do DNA e a estreptomicina causa erros na leitura dos códigos do RNA mensageiro. Essas afirmações permitem concluir que:
I. a tetraciclina impede a transcrição e leva a célula bacteriana à morte por falta de RNA mensageiro
II. a mitomicina, por inibir a duplicação do DNA, impede a multiplicação da célula bacteriana
III. a estreptomicina interfere na tradução e leva a célula bacteriana a produzir proteínas defeituosas Das afirmativas:
a) apenas I é correta
b) apenas I e II são corretas
c) apenas II e III são corretas
d) apenas I e III são corretas
e) I, II e III são corretas
1- Na embalagem de um antibiótico, encontra-se uma bula que, entre outras informações, explica a ação do remédio do seguinte modo: “O medicamento atua por inibição da síntese protéica bacteriana.” Essa afirmação permite concluir que o antibiótico
a) impede a fotossíntese realizada pelas bactérias causadoras da doença e, assim, elas não se alimentam e morrem.
b) altera as informações genéticas das bactérias causadoras da doença, o que impede manutenção e reprodução desses organismos.
c) dissolve as membranas das bactérias responsáveis pela doença, o que dificulta o transporte de nutrientes e provoca a morte delas.
d) elimina os vírus causadores da doença, pois não conseguem obter as proteínas que seriam produzidas pelas bactérias que parasitam.
e) interrompe a produção de proteína das bactérias causadoras da doença, o que impede sua multiplicação pelo bloqueio de funções vitais.
Exercícios para prova:
1- O tratamento de infecções bacterianas foi possível com a descoberta dos antibióticos, substâncias estas capazes de matar bactérias. Como exemplos de mecanismos de ação dos antibióticos, podemos citar:
Ação I: inibe a enzima responsável pelo desemparelhamento das fitas do DNA.
Ação II: inibe a ligação da RNA polimerase, DNA-dependente.
Ação III: ao ligar-se a subunidade ribossomal inibe a ligação do RNA transportador.
Quanto à interferência direta dessas ações nas células bacterianas, é correto afirmar:
a) Ação I inibe a duplicação do DNA, impedindo a multiplicação da célula.
b) Ação II inibe a tradução, interferindo na síntese de DNA bacteriano.
c) Ação III inibe a transcrição do RNA mensageiro.
d) Ações I e III inibem a síntese de ácidos nucleicos.
e) Ações II e III inibem a síntese de proteínas bacterianas
2- Os antibióticos podem ser classificados quanto à sua origem: sendo naturais, sintéticos ou semi-sintéticos; quanto ao espectro de ação: gram-positivos, gram-negativos ou ambas; e de acordo com o local da ação em células procariontes. Podem ser também bacteriostático, quando impedem o crescimento da bactéria, ou bactericida, quando matam as bactérias. De acordo com a classificação e mecanismo de ação dos antibióticos, assinale a alternativa incorreta
a) As tetraciclinas são agentes bacteriostáticos que impedem o crescimento de bactérias aeróbicas e anaeróbicas Gram + e Gram - por se ligarem a fração 30S e impedirem a síntese protéica. 
b) Todos os fármacos betalactâmicos são inibidores seletivos da síntese da parede celular bacteriana
c) A rifampicina inibe o crescimento bacteriano devido à sua forte ligação ao RNA dependente de polimerase do DNA das bactérias. Por conseguinte, inibe a síntese do RNA bacteriano
d) Os antibióticos macrolídeos ( eritromicina, claritromicina e azitromicina) são agentes bacteriostáticos que inibem a síntese protéica especialmente de bactérias Gram + por se ligarem a fração ribossômica 30S 
e) Vancomicina é um antibiótico de estrutura glicopeptídea que inibe a síntese da parede de microorganismos principalmente Gram +
 Questão discursiva:
O grande problema do uso de antibióticos são os efeitos colaterais que eles causam. Hoje, o uso dessas substâncias está mais seguro, sendo cada vez mais seletivos e causando cada vez menos efeitos nas células eucarióticas. Um fato que preocupa é o local de ação desses medicamentos nas células procarióticas, o que pode influenciar bastante nos efeitos colarerais em células eucarióticas.
 Com base no texto e na figura abaixo, argumente e justifique sobre quais os locais de ação dos antibióticos (mostrado na figura) seriam mais seguros para o uso e que agiriam apenas em células procariontes
Questões de Prova
1- Sobre o antibiograma é correto afirmar que: 
a) o meio de cultura mais adequado para streptococcus e Neisseria é o Agar sangue e Agar chocolate. 
b) O antibiograma deve sempre ser realizado de acordo com o POP e com antibióticos pré definidos para cada tipo de amostra biológica.
c) a suspensão para o preparo do inóculo deve sempre ser bastante concentrada a fim de se evitar a apresentação de uma falsa sensibilidade. 
d) o meio de cultura é escolhido de acordo com as características químicas de cada antimicrobiano.
e) para o tratamento de infecções do trato urinário não é necessária a realização do antibiograma. 
2- A interpretação do antibiograma representado abaixo nos permite concluir que, o antibiótico mais eficaz e o menos eficaz no combate à bactéria testada são respectivamente o:
a) 1 e 3.
b) 3 e 5.
c) 2 e 4.
d) 4 e 3.
e) 5 e 2.
Discursiva:
Antibiogramas são testes laboratoriais importantes para apoiar a escolha de um determinado antibiótico utilizado em um tratamento, ou para substituir por outro que se mostre efetivo contra o patógeno que, previamente isolado a partir do foco da infecção, é posto para crescer em meio sólido sobre o qual também são depositados discos de papel contendo, cada um, um diferente antibiótico. A figura apresenta o resultado de um antibiograma e os mecanismos de ação dos antibióticos presentes nos discos de papel utilizados (letras indicam a correspondência). 
 
A análise das informações dadas e discuta sobre a veracidade das mesmas em relação a técnica descrita acima.
 
I- Os halos de inibição observados em torno de alguns dos discos indicam a sensibilidade da bactéria ao antibiótico difundido para o meio de cultivo. 
II- Os três antibióticos mais efetivos contra o patógeno testado inibem direta ou indiretamente o mecanismo de tradução no ribossomo procarionte. 
III- O patógeno testado apresenta resistência ao antibiótico presente no disco A, o que pode ser devido à produção de uma enzima, capaz de inativar o antibiótico. 
 
Atividade 1: Compreensão
Um dos problemas da resistência a antibióticos consiste na disseminação de genes de resistência entre as bactérias.
Analise esta figura, em que estão indicados os mecanismos – I, II e III – de transmissão de genes entre bactérias:
A partir dessa análise e considerando outros conhecimentos sobre o assunto, IDENTIFIQUE esses três mecanismos.
Resposta:
Atividade 2: Contextualização
As superbactérias têm surgido a partir de diversas espécies ou grupos de micro-organismos, alguns dos quais podem ser encontrados normalmente em nosso corpo (na pele e nos intestinos, por exemplo). Entre as espécies mais associadas à resistência a antimicrobianos estão Staphylococcus aureus resistente à meticilina (MRSA), a Acinetobacter baumannii, Enterococcus faecium, Pseudomonas aeruginosa, Clostridium difficile, Escherichia coli e Klebsiella pneumoniae. A MRSA está, sem dúvida, entre as superbactérias mais disseminadas no mundo, tanto no ambiente hospitalar quanto fora dos hospitais. [...] Essa forma resistente da bactéria tem elevada capacidade de disseminação, sendo comum encontrar bactérias da mesma linhagem (muitas vezes, geneticamente idênticas)em hospitais separados por distâncias continentais, gerando verdadeiras pandemias hospitalares. A maioria das infecções que ocorrem em hospitais é causada por um pequeno número de linhagens internacionais epidêmicas de MRSA. No Brasil e em vários países, está amplamente disseminada a linhagem ST239. (FERREIRA; CRUZ; FIGUEIREDO, 2011, p. 24).
Os mecanismos de transferência horizontal de “superbactérias” para bactérias não
resistentes estão esquematizados na figura.
Analise as afirmativas abaixo e faça um pequeno texto discutindo sobre os mecanismos de resistência e as possíveis variabilidades genéticas evolutivas dessas bactérias.
1- A resistência bacteriana a antimicrobianos é uma condição genética que lhe confere uma vantagem em determinado ambiente.
2- O mecanismo indicado em C é caracterizado como transdução, podendo conferir um novo atributo genético a uma bactéria.
3- A grande mobilidade humana em nível global é um dos principais fatores que favorecem a disseminação das superbactérias, criando a ameaça de uma verdadeira pandemia.
4- O uso de antibióticos, tão necessário em certas situações de risco, paradoxalmente, contribui para a expansão do problema das superbactérias.
Resposta:
Exercícios de Fixação
1- Existem mecanismos de ação mediando a resistência bacteriana a drogas. Dentre eles, pode-se citar: 
 
1- Bactérias que produzem enzimas que inativam a droga. 
2- Bactérias que sintetizam alvos modificados para os quais as drogas são ineficazes. 
3- Bactérias que alteram sua permeabilidade. 
4- Bactérias que exportam drogas ativamente usando uma “bomba” de multiresistência a drogas. 
 
Na maioria das vezes, a resistência a drogas se deve: 
 
a) ao tipo de cepa. 
b) à mutação genética. 
c) ao processo de transdução. 
d) ao processo de transformação.
2- A resistência bacteriana ocorre quando a bactéria evolui para combater o mecanismo de ação do fármaco. Acredita-se que o desenvolvimento da resistência bacteriana a antibióticos foi acelerado pelo uso indiscriminado desses medicamentos nos seres humanos. Sobre esse tema podemos afirmar que: 
 
A) Bactéria resistente é aquela capaz de crescer em qualquer meio, na presença de uma concentração que a droga atinge no sangue durante o tratamento; 
B) Na resistência intrínseca, a bactéria está dentro do espectro de ação da droga; 
C) Resistência múltipla se diz para a bactéria resistente a duas drogas; 
D) Resistência cruzada, o mecanismo bioquímico de resistência a uma droga atinge também a outras; 
E) O modo de aquisição por resistência extra cromossômica se dá por mutação.
3- A resistência bacteriana a antibióticos tem sido cada vez mais observada no ambiente hospitalar: 
a) é um fenômeno natural e independe da intermediação humana 
b) representa um fenômeno biológico sem importância em saúde pública
 c) está relacionado com a resistência do hospedeiro aos antimicrobianos 
d) é um fenômeno natural, desejável e propicia a resistência do hospedeiro aos antimicrobianos
 e) NDA
 4- Marque a opção CORRETA, em relação à resistência bacteriana aos antibióticos: 
 
a) A conjugação é o principal mecanismo de aquisição de resistência entre as bactérias e resulta da transferência de material genético de uma célula bacteriana viável para outra, através de contato físico entre elas. 
b) Plasmídios são elementos genéticos adicionais, extra cromossômicos, constituídos de segmentos circulares de DNA de cadeia dupla, que codificam características biológicas essenciais da bactéria. 
c) A resistência adquirida, que determina modificações estruturais e funcionais na célula receptora, decorre principalmente de mutações espontâneas no momento da divisão do genoma celular. 
d) A transferência de genes de uma bactéria para outra se dá principalmente pelo mecanismo de transdução, processo que determina a recombinação de genes entre bactérias e é amplificado pela pressão seletiva de antibióticos. 
e) NDA.
5-Quanto à resistência bacteriana podemos afirmar: 
 
a) O antibiótico é um fator de seleção que elimina as bactérias que resistem à ação dos antibióticos e seleciona as bactérias que apresentam sensibilidade. 
b) O aumento da incidência de infecções microbianas resistentes a antibióticos, adquiridas nos hospitais, tem chamado à atenção das autoridades de saúde. 
c) Com o aumento da resistência bacteriana, nos últimos anos houve um aumento no número de antibióticos aprovados pelo FDA. 
d) O seqüenciamento do genoma revelou que um grande número de genes de resistência está presente em todas as bactérias. 
e) O desenvolvimento de técnicas imunológicas e microbiologicas contribuiu para a identificação bacteriana, através do seqüenciamento do DNA, o qual é altamente conservado e universal a todas as bactérias.
Questões de Prova
1- A resistência bacteriana aos antibióticos tem causado grande problema de saúde pública. Abaixo estão relacionadas algumas explicações para essa resistência. Analise-as.
I - “Os antibióticos atuam na seleção de bactérias resistentes já previamente existentes em uma população bacteriana”.
II - “Em algumas espécies de bactérias, os antibióticos transformam bactérias sensíveis em resistentes”.
III - “Alguns genes podem ser ativados com o uso de determinados antibióticos”.
IV - “Algumas bactérias possuem genes responsáveis por diferentes mecanismos que impedem a ação dos antimicrobianos”.
Considerando as principais teorias sobre resistência, as alternativas corretas são:
A) I, apenas.
B) II e III, apenas.
C) IV, apenas.
D) I e II, apenas
E) I, II, III e IV
2- As informações abaixo se referem a processos de reprodução bacteriana. Identifique-os e assinale a alternativa que apresenta a seqüência correta.
	Corresponde à transferência de genes de uma bactéria para outra por meio de bacteriófagos.
	Mecanismo de reprodução assexuada em que um indivíduo dá origem a dois outros, geneticamente idênticos entre si.
	Processo através do qual alguns tipos de bactérias conseguem adquirir trechos de moléculas de DNA dispersos no meio e incorporá-los ao seu próprio DNA.
	É a transferência direta de DNA de uma bactéria para outra, por meio de uma ponte citoplasmática que se estabelece temporariamente entre essas bactérias.
a) Transdução, bipartição, conjugação bacteriana, cissiparidade.
b) Transformação, bipartição, transdução, conjugação bacteriana.
c) Conjugação bacteriana, cissiparidade, transformação, transdução.
d) Transformação, transdução, conjugação bacteriana, cissiparidade.
e) Transdução, cissiparidade, transformação, conjugação bacteriana.
Questão Discursiva
A figura ilustra mecanismos moleculares de resistência bacteriana a antibióticos, à saber:
a) o recrutamento de uma enzima que destrói ou incapacita a droga;
b) o uso de uma bomba no envoltório celular que expulsa a droga antes que ela aja;
c) a substituição da proteína-alvo da droga por uma versão que a droga não reconhece.
A partir da análise das informações, explique a resistência bacteriana a antibióticos, relacionando-a à estratégia reprodutiva do grupo.