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avaliação I biologia molecular

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1O uso de bibliotecas de DNA ou cDNA permitem a manutenção e replicação do material 
genético em grandes coleções mantidas em colônias de bactérias, nas quais um fragmento 
específico de DNA ou um gene podem ser procurados. Sobre as bibliotecas de DNA e cDNA, 
avalie as asserções a seguir e a relação proposta entre elas: I- A bactéria E. coli é a principal 
célula hospedeira utilizada no processo de clonagem em vetores, inclusive na construção de 
bibliotecas de DNA e cDNA, em que cada bactéria irá internalizar apenas um vetor. 
PORQUE II- Assim que o vetor é inserido, em condições adequadas de diluição e meio de 
cultivo, em poucas horas corre a formação de diversos clones dos fragmentos inseridos, 
sendo cada um encontrado em uma colônia diferente de crescimento bacteriano. Assinale a 
alternativa CORRETA: 
A 
A asserção I é uma proposição falsa, e a II é uma proposição verdadeira. 
B 
As asserções I e II são proposições verdadeiras, e a II é uma justificativa da I. 
C 
As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não é uma justificativa da I. 
D 
As asserções I e II são proposições falsas. 
2O gráfico a seguir ilustra uma curva de amplificação da PCR em tempo real. De acordo com 
a interpretação do gráfico, classifique V para as sentenças verdadeiras e F para as falsas: ( ) A 
amostra A possui maior quantidade do gene avaliado, uma vez que possui menor Ct. ( ) A 
amostra C possui maior quantidade de amostra, pois quanto maior o Ct, maior a quantidade 
de material disponível para iniciar a amplificação do gene de interesse. ( ) A amostra B 
ultrapassou o Threshold após o ciclo 20, apresentando uma quantidade intermediária de 
amostra, quando comparadas às amostras A e C. Assinale a alternativa que apresenta a 
sequência CORRETA: 
A 
V - F - V. 
B 
F - F - V. 
C 
V - V - F. 
D 
V - F - F. 
3A técnica de eletroforese consiste na separação de moléculas de DNA, RNA ou proteínas 
em gel de agarose ou poliacrilamida. Essa separação se dá de acordo com o tamanho da 
molécula. Com base no processo de eletroforese em gel, analise as sentenças a seguir: I- Uma 
corrente elétrica é transmitida através do gel do polo negativo ao polo positivo. II- As 
moléculas de DNA são carregadas negativamente e são carregas por afinidade para o polo 
positivo. III- Moléculas menores tendem a migrar com maior dificuldade no gel. Já as 
moléculas maiores, tendem a migrar mais facilmente. Assinale a alternativa CORRETA: 
A 
Somente a sentença II está correta. 
B 
As sentenças I e II estão corretas. 
C 
Somente a sentença III está correta. 
D 
As sentenças I e III estão corretas. 
4O advento das técnicas de biologia molecular possibilitou o estudo genético de diversos 
organismos, incluindo os seres humanos. Esses estudos têm trazido ganhos significativos no 
entendimento de doenças, síndromes e mecanismos de ação de substâncias. De acordo com a 
importância das técnicas de clonagem do DNA e construção de bibliotecas genômicas, 
classifique V para as sentenças verdadeiras e F para as falsas: ( ) As enzimas de restrição são 
utilizadas na construção de bibliotecas de DNA, com o objetivo de fragmentar o DNA 
genômico, já que podem ser conhecidas como tesouras moleculares. ( ) Os vetores são 
essenciais na técnica de clonagem e são utilizados tanto na construção de bibliotecas de 
DNA, quanto de cDNA, uma vez que carregam os fragmentos de DNA ou o cDNA extraído. 
( ) As bibliotecas de cDNA são construídas a partir da extração do DNA de células ou 
tecidos, que posteriormente é submetido à clonagem do DNA. ( ) O mRNA é convertido em 
cDNA pela transcrição reversa, para então serem introduzidos em vetores e submetidos ao 
processo de clonagem para originar as bibliotecas de cDNA. Assinale a alternativa que 
apresenta a sequência CORRETA: 
A 
V - F - F - V. 
B 
F - F - V - F. 
C 
V - V - F - V. 
D 
V - F - V - V. 
5 
O qPCR (PCR em tempo real) utiliza corantes fluorescentes ou sondas específicas, que 
emitem fluorescência quando se encontram ligados ou intercalados à fita de DNA no meio de 
reação da PCR. Considerando esse fator, a fluorescência, é proporcional à quantidade de 
material disponível para iniciar a amplificação. Sobre os parâmetros para quantificação do 
qPCR, avalie as asserções a seguir e a relação proposta entre elas: 
I- O threshold, também conhecido como linha de corte, demonstra o momento em que a 
fluorescência apresentada está livre de ruídos, sendo essencialmente a representação da 
amplificação da amostra teste. 
PORQUE 
II- O equipamento é capaz de determinar em que momento a fluorescência detectada é 
proveniente apenas das amostras que estão sendo amplificadas e, assim, determinar a linha de 
corte. 
Assinale a alternativa CORRETA: 
A 
As asserções I e II são proposições verdadeiras, e a II é uma justificativa da I. 
B 
As asserções I e II são proposições falsas. 
C 
As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não é uma justificativa da I. 
D 
A asserção I é uma proposição falsa, e a II é uma proposição verdadeira. 
6A escolha do gel para a técnica de eletroforese deve-se dar através do tamanho da molécula 
a ser isolada e do objetivo do isolamento. Com base nas matrizes de agarose e poliacrilamida 
para a técnica de eletroforese em gel, analise as sentenças a seguir: I- A poliacrilamida pode 
separar fragmentos de DNA com até mesmo uma única base nitrogenada de diferença. II- A 
agarose, apresenta menor resolução, ou seja, cada banda presente no gel, representa um 
agrupamento de moléculas de tamanho semelhantes. III- No gel de poliacrilamida, uma 
menor faixa de tamanho das moléculas pode se movimentar, enquanto fragmentos maiores de 
DNA podem migrar facilmente no gel de agarose. Assinale a alternativa CORRETA: 
A 
Somente a sentença III está correta. 
B 
Somente a sentença II está correta. 
C 
Somente a sentença I está correta. 
D 
As sentenças I, II e III estão corretas. 
7O processo de transcrição reversa, é uma das técnicas mais utilizadas na área de pesquisa de 
expressão gênica. Essa técnica é conhecida como RT-PCR, ou transcrição reversa, seguida 
por PCR. Com base no RT-PCR, analise as sentenças a seguir: I- O RT-PCR avalia a 
expressão diferencial do mRNA, o qual será convertido em DNA complementar (cDNA). II- 
A enzima transcriptase reversa (RT) é responsável pela síntese de uma fita de DNA, 
utilizando como molde uma fita simples de RNA. III- A técnica de RT-PCR é realizada em 
40 ciclos, para formação de uma quantidade adequada de cDNA. Assinale a alternativa 
CORRETA: 
A 
Somente a sentença III está correta. 
B 
As sentenças I e III estão corretas. 
C 
Somente a sentença II está correta. 
D 
As sentenças I e II estão corretas. 
8O PCR produz uma série de cópias de um determinado fragmento de DNA ou cDNA de 
uma maneira bastante rápida e eficiente. No entanto, de acordo com o seu objetivo de 
pesquisa, a PCR qualitativa ou quantitativa se torna mais eficaz para fornecer os resultados 
esperados. De acordo com essas duas técnicas, classifique V para as sentenças verdadeiras e 
F para as falsas: ( ) A PCR qualitativa indica a presença de um fragmento específico de DNA 
ou cDNA em uma amostra, mas não indica quanto do gene está expresso na amostra. ( ) A 
qPCR é conhecida como PCR em tempo real (quantitativa) e fornece informações precisas 
relativas à quantidade de expressão de um gene. ( ) A PCR qualitativa necessita de um 
termociclador específico capaz de quantificar a amplificação dos fragmentos de DNA ao final 
de cada ciclo em tempo real. Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA: 
A 
F - V - F. 
B 
V - F - F. 
C 
V - V - F. 
D 
F - F - V. 
9A descoberta da estrutura do DNA, por James Watson, Francis Crick, Maurice Wilkins e 
Rosalind Franklin, em 1950, possibilitou o entendimento a respeito da replicação e 
transmissão da informação genética de uma célula à outra. Sobre o DNA, assinale a 
alternativa CORRETA: 
A 
O DNA é uma estrutura em dupla hélice, compostapela pentose, denominada desoxirribose, 
os nucleotídeos, adenina, timina, citocina e guanina, e fosfato. 
B 
O DNA é composto por cinco nucleotídeos, adenina, uracila, timina, guanina e citosina. 
C 
O DNA é uma estrutura em fita simples, composta pelos nucleotídeos adenina, timina, 
citosina e guanina. 
D 
O DNA é formado por duas fitas que não se complementam entre si. 
10Para construir uma biblioteca de DNA, utiliza-se técnicas de clivagem com enzimas de 
restrição e clonagem em vetor. Com base nas etapas para construção de uma biblioteca de 
DNA, ordene os itens a seguir: I- Fragmentos de DNA são inseridos em vetores idênticos e 
ligados através da DNA ligase. II- Clivado do DNA com uma enzima de restrição, formando 
centenas a milhares de fragmentos de DNA. III- Inserção do vetor em células hospedeiras, 
produzindo a clonagem dos diferentes fragmentos. IV- Extrair e isolar o DNA genômico de 
uma célula, tecido ou até mesmo de um organismo. Assinale a alternativa que apresenta a 
sequência CORRETA: 
A 
I - IV - III - II. 
B 
I - III - II - IV. 
C 
IV - II - III - I. 
D 
IV - II - I - III.

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