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03/05/2022 1 Biologia Molecular Prof. Dr. Andrei Siqueira Extração, PCR e Eletroforese Mutação 03/05/2022 2 DNA DNA 03/05/2022 3 Cromossomos Plasmídeos 03/05/2022 4 Plasmídeos • Extra cromossômicos; • Circulares, fita dupla; • Tamanho e número variáveis; • Replicação autônoma; • Vantagens seletivas. Plasmídeos • Plasmídeos F (Fertilidade) ou Fatores Sexuais; • Plasmídeos R ou Fatores R; • Plasmídeos de Virulência; • Plasmídeos Metabólicos. 03/05/2022 5 Extração de DNA Extração de DNA 03/05/2022 6 Extração de DNA Extração de DNA 03/05/2022 7 PCR • Reação em cadeia da polimerase; • Criada por Kary Mullis em 1993; • Amplificação de segmentos de DNA; • Taq Polimerase PCR 03/05/2022 8 PCR PCR • H20 • Tampão • Primers • MgCl2 • dDNTP • DNA molde 03/05/2022 9 PCR PCR 03/05/2022 10 PCR RT-PCR 03/05/2022 11 NESTED PCR MULTIPLEX PCR 03/05/2022 12 ELETROFORESE ELETROFORESE 03/05/2022 13 qPCR qPCR 03/05/2022 14 OBRIGADO!OBRIGADO!
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