Histologia 1Introdução MO, tec epitelial e glandulas

Esta é uma pré-visualização de arquivo. Entre para ver o arquivo original

*
*
CENTRO UNIVERSITÁRIO FRANCISCANO
INTRODUÇÃO À HISTOLOGIA
Profa. Camila Franco
*
*
Histologia
Histologia:
Hydton = tecido + Logos = estudos
	É a ciência que estuda os tecidos biológicos, desde a sua formação (origem), estrutura/composição (tipos de células) e funcionamento. 
	 célula: é unidade fundamental do corpo
	 tecidos: são associação de várias células semelhantes
	 órgãos: são a junção de vários tecidos, com uma função
	 sistemas: são a união de vários órgãos (sistema nervoso, linfático, esquelético, respiratório, tegumentar, circulatório, etc) 
	 organismo: união de todos os sistemas
*
*
Células: pequenas dimensões
	Microscopia:
Microscópio de luz ou Microscópio ótico: 
	A imagem é formada a partir de raios luminosos do feixe de luz que atravessou a amostra (transiluminação). Aplicação: células.
Tecidos/Órgãos: espessos – cortes histológicos delgados 
Tratamento da amostra
Micrótomo: 1 a 10 m
*
*
Tratamento da amostra:
	1) Fixação:
Função:
	Evitar digestão enzimática ou degradação bacteriana do tecido,
	Endurecer os fragmentos para preservar a estrutura e composição.
Métodos:
Físicos: congelamento (criomicrótomo)
Químicos: por imersão em soluções desnaturantes ou estabilizantes (fixadores) ou perfusão intravascular.
	Ex. formaldeído 4% ou glutaraldeído tamponado + tetróxido de ósmio
*
*
	2) Desidratação:
Remoção da água dos tecidos. Realizada por sucessivos banhos em soluções de concentração crescente de etanol (70% a 100%).
	3) Clareamento:
Permite obter transparência do tecido. Realizada com banho em xilol ou toluol.
	4) Inclusão:
Função:
Obtenção de cortes delgados. Compreende a infiltração de substância para obter uma consistência rígida da amostra.
	Ex. parafina a 56-60oC + estufa (bloco rígido) ou resinas plásticas.
*
*
	5) Micrótomo:
Ocorre o corte micrométrico (m). 
Os cortes são colocados a flutuar sobre água aquecida.
	6) Preparação das lâminas:
Lâmina, corte, coloração, lamínula.
		
		 Corantes básicos e corantes ácidos:
Azul de toluidina e Azul de metileno (básicos)
Hematoxilina (comportamento básico)
Orange G, Eosina, fucsina ácida
Componentes ácidos das células:
Ácidos nucléicos
Glicosaminoglicanas
Glicoproteínas
Mitocôndria
Grânulos de secreção
Proteínas citoplásmicas
colágeno
*
*
Visualização das lâminas histológicas:
Microscópio ótico:
	Composto por três sistemas de lentes: 
Condensador: concentra a luz de uma lâmpada e concentra o feixe sobre a amostra
Objetiva: recebe a luz que atravessou a amostra e projeta a imagem aumentada à ocular
Ocular: amplia novamente a imagem recebida e projeta na retina/tela/câmera fotográfica/detector eletrônico.
	
	**Retina: A apliação é calculada multiplicando o aumento da objetiva pelo aumento da ocular.
*
*
Microscópio ótico:
Resolução mínima de 0,2 m
Permite aumentos de até 1500 vezes.
*
*
Microscópio de contraste de fase e de contraste diferencial de interferência: Ambas para cortes não corados.
Microscopia de fluorescência: 
	Irradia a substância com luz de mercúrio sob alta pressão, em determinado comprimento de onda ( nm) e ocorre a emissão da luz a partir da amostra em um comprimento mais longo.
Microscopia eletrônica:
	Envolve a interação de elétrons com os 
componentes dos tecidos.
	Podem ser:
	- MET: transmissão
	- MEV: varredura
melanócito
*
*
MET:
Resolução: 1 a 3 nm, ampliação até 400 mil 
vezes, amostras cobertas com carbono.
Permite a análise de partículas e moléculas
Isoladas.
MEV:
metalização em ouro para tornar a amostra 
condutiva, o feixe de eleétrons não atravessa 
a amostra, ele varre a superfície de metal aplicada 
à superfície da amostra e é refletido pelos átomos 
de metal.
*
*
MET				 MEV
*
*
Problemas da interpretação de cortes histológicos:
	As distorções sobre tecidos são causados por retração produzida pelo uso do fixador, etanol ou calor utilizado com a parafina para inclusão. 
	
	A retração é mais branda quando empregam-se resinas.
	Podem aparecer espaços artificiais nas células ou entre células devido a retirada de moléculas pelas soluções de desidratação e clareamento e, ainda, aparecer outros componentes teciduais (artefatos).
ATENÇÃO E CUIDADO COM INTERPRETAÇÕES!
*Vídeo*
*
*
Centro Universitário Franciscano
Introdução ao estudo de células, núcleo celular e tecidos
Profa. Camila Franco
*
*
Células:
	Unidades funcionais e estruturais do ser vivo.
Células procariontes			Células eucariontes
	Diferenciação celular: especialização de funções
Células não-diferenciadas		Células diferenciadas
 Células-tronco			Células formadoras de tecidos
*
*
Componentes Celulares:
Citoplasma: É composto de citoesqueleto, organelas e depósitos.
Membrana plasmática: é o limite entre meios intra e extra-celular, permitindo as trocas por intermédio de integrinas. 
	Composta por bicamada lipídica (fosfolipídeos) intercalados por glicolipídeos, colesterol e glicoproteínas. 
*
*
Núcleo: 
	Centro de controle das atividades celulares
		Cromossomos: genoma (DNA) 
		Síntese e processamento de RNAt, m, r.
Composição: 
Envoltório nuclear
Cromatina
Nucléolo
Matriz nuclear
Nucleoplasma
*
*
 Mitose:
Ciclo Celular:
Interfase: fase de síntese de DNA (sem replicação), sendo dividida em fase G1, S e G2
É dividida em fases:
1) Prófase
2) Metáfase
3) Anáfase
4) Telófase
1		 2		 3 	 4	
*
*
Tecidos:
	Conjunto de células especializadas e de matriz extracelular.
	Alguns tecidos são formados por células que possuem a mesma estrutura; outros são formados por células que têm diferentes formas e funções, mas que juntas colaboram na realização de uma função geral única.
Formação tecidual: Ocorre a partir de três folhetos germinativos:
Endoderma
Ectoderma 
Mesoderma
*
*
Tipos de tecidos:
Epitelial: função de revestimento e secreção
Conjuntivo: reune e isola órgãos 
Muscular: permite contração, movimento, manutenção postural e produção de calor
Nervoso: permite proteção e sustentação
*
*
TECIDO EPITELIAL
*
*
Tecido epitelial:
	Composto de células poliédricas (muitas faces), justapostas, com pouca matriz extracelular entre células.
Características: 
ausência de espaço entre as células (aderência: por junções intercelulares: folhetos)
ausência de vascularização 
grande capacidade de renovação celular
Função: recobrimento superfície e cavidades corpóreas e, formação glandular.
*
*
Formato das células:
	Variável. De colunares à pavimentosas.
Núcleo: esférico até alongado ou elíptico
Suporte: tecido conjuntivo – para órgãos ocos (sistema digestivo, respiratório e urinário, o conjuntivo é chamado de lâmina própria ou basal).
	A porção epitelial voltada ao conjuntivo = porção basal
	Extremidade oposta = porção apical (superfície livre)
*
*
Lâmina basal: 
	Camada situada abaixo dos epitélios com 20-100 nm de espessura.
	Composição: colágeno IV, glicoproteínas laminina e entactina e proteoglicanas.
	Interação com tecido conjuntivo: por meio de fibrilas de colágeno VII. 
	Função: promoção da adesão entre células epiteliais e tecido conjuntivo, filtrar moléculas, influenciar na polaridade das células, regular a proliferação e diferenciação celular, servir como suporte para a migração celular, limitar e controlar trocas de macromoléculas entre células e tecido conjuntivo.	
*
*
*
*
Células epiteliais:
	Grande adesão e coesão: caderinas
		Interdigitações
	As membranas laterais apresentam junções intercelulares:
Junções de adesão:		
-Zônulas de adesão		
Hemidesmossomos
Desmossomos
Junções impermeáveis:
zônulas de oclusão
Junções de comunicação:
- Junções comunicantes ou gap
*
*
Tipos
de epitélio:
Epitélio de revestimento:
		Folhetos que revestem a superfície externa do corpo, cavidades internas, lúmen dos vasos sanguíneos e de órgãos ocos e tubos de diferentes calibres. 
Podem ser:
-simples: uma camada de células.
	Pode ser: pavimentoso, cúbico ou prismático/colunar/cilíndrico
-estratificado: duas ou mais camadas celulares
	Pode ser: pavimentoso/de transição, cúbico ou prismático
*
*
Simples
Estratificado
Pseudoestratificado
Pavimentoso		Cúbico		Colunar
Pavimentoso		Transição
*
*
Epitélio glandular:
		Células epiteliais que proliferam e invadem o conjuntivo, após uma diferenciação.
		Função: secreção, composta de substâncias transportadoras e produto da secreção (armazenamento: grânulos de secreção).
	Podem ser:
- Glândulas Uni ou Pluricelulares
Exócrinas: conectadas ao epitélio de origem (por ductos excretores), com porção secretora e excretora. Excretam para uma cavidade ou para a superfície do corpo.
Endócrinas: sem dutos (secreção vai para o sangue). Ex. hormônios de glând. Hipófise ou adrenais, (para)tireóide.
*
*
Glândulas:
Tubular simples 	ramificada	enrolada		Alveolar 	 ramificada
Tubular composta			Alveolar composta	 Tuboalveolar composta
O termo histologia vem do grego.
*
O tetróxido de ósmio permite observar contrastes entre lipídeos e proteínas e observar ultraestruturas.
Cortes por congelamento: método mais rápido, não inativa a maioria das enzimas, mantém proteínas em conformação natural. Específico para estudo de lipídeos (xilol dissolve).
*
Hematoxilina-eosina: azul (núcleo) e rosa (citoplasma e colágeno): mais comumente usada ex. vide lâmina (figura).
Ainda pode-se usar outros corantes como o contra-corante e impregnação por metais como prata e ouro (tecido nervoso).
*
Resolução: significa que so observa com nitidez objetos maiores que 0,2 micrômetros de tamanho.
*
 Leucócitos (felpudas), hemácias e Plaquetas				cabeça de formiga (foto by Camila)
Célula tronco
*
*
Procariontes = antes do núcleo e eucariontes = com núcleo, organelas (vide bioquímica)
*
Citoplasma: É o espaço entre organelas e depósitos, com consistência de sol-gel. Glicoproteínas foram o glicocálice na superfície externa da membrana que tem função de reconhecimento e união celular e de moléculas extracelulares. As proteínas formam canais para troca iônica de Na, K, Ca. 
Citoesqueleto: microfilamentos de actina e microtúbulos, responsável pela movimentação de organelas e da célula.
Organelas: mitocôndria, retículo endoplasmático, complexo de Golgi, lisossomos e peroxissomos)
Mitocôndria: acumulam-se no citoplasma e transformam energia de metabólitos em energia livre (ATP + calor). Possuem 2 membranas, interna com projeções (cristas mitocondriais), separando a matriz mitocondrial (com pequena quantia de RNAr,m,t e DNA com replicação independente do núcleo, tb produzem um pequenas proteínas) do espaço intermembranar.
Retículo endoplasmático: rede de vesículas irregulares, pode ser granuloso ou liso. Fica próximo ao núcleo, síntese protéica e de fosfolipídeos (RE granuloso, com ribossomos) e contem enzimas para síntese proteíca, sintetizam fosfolipídeos, é contínuo ao granuloso (RE liso, sem ribossomos)
Golgi: completa proteínas produzidas no RE e transporta essas proteínas em vesículas para a superfície da membrana celular realiza a degradação molecular.
Ribossomos: há 2 tipos de ribossomos (1 para bacterias e mitocondrias e o outro tipo em eucariontes), são constituídos de subunidades de diferentes tamanhos. Proteínas do citoplasma se associam com o RNAr no nucléolo e retornam ao citoplasma para produzir proteínas.
Lisossomos: digestão intracitoplasmática, com atividade máxima em pH 5,0.
Peroxissomos: oxidam substratos, capturam H+ e liberam O2.
Depósitos: reservas de nutrientes: ex. lipídeos, glicogêngio
Endo (vesícula com porções de membrana) e exocitose (vesícula que se funde a membrana e expulsa o conteúdo da célula), pinocitose (expulsao por vesícula aliada a lisossomos), fagocitose (macrófagos e neutrófilos).
Membrana: A bicamada é assimétrica devido a diferente composição lipídica.
*
Cromossomos é DNA+proteínas = cromatina
Núcleo não sintetiza proteínas, usa as sintetizadas no citoplasma.
Envoltório Nuclear: separa o conteúdo intranuclear do citoplasma, constituído de 2 membranas separadas por cisterna perinuclear (espaço). A membrana externa contém ribossomos e é contínua ao Regranuloso, e contém poros para trocas e transporte molecular. O envoltório é impermeável a ions e moleculas.
Cromatina: dois tipos: heterocromatina (eletron-densa, com DNA compactado, inativa) e eucromatina (DNA livre para transcrever genes, ativa, MO vê mais clara) é composta de duplos filamentos de DNA + proteína histona.
Nucléolos: produtores de ribossomos, constituidos por RNAr e proteínas, as células podem ter um ou dois nucléolos.
Matriz nuclear: estrutura fibrilar, esqueleto que apoia cromossomos (ambíguo sua existência)
Nucleoplasma: líquido com água, ions, aa, metabólitos e enzimas que preenche espaços no núcleo, cromatina e nucléolo.
*
G1: síntese de RNA e proteína dai passa a G0 (para células que não se renovam)
S: Síntese de DNA e duplicação de centrossomos e centríolos
G2: acúmulo de energia para realizar mitose e sintese de tubulina para formar microtúbulos
G2:
Prófase: condensação da cromatina, centríolos afastam-se um para cada polo da célula e aparecem microtúbulos entre eles iniciando a mitose. Durante a prófase o nucléolo e envoltório nuclear se desintegram.
Metáfase: cromossomos migram no plano equatorial da célula orientados pelos microtúbulos. Cada cromossomo com DNA duplicato, divide-se em duas cromátides que se desprendem dos microtúbulos pelo cinetocoro localizado próximo ao centrômero.
Anáfase: centrômeros e cromossomos-filhos migram aos polos da célula
Telófase: reconstrução dos envoltórios nucleares das células-filhas, os cromossomos se tornam menos condensados e reaparece a cromatina. Tb divide o citoplasma (citocinese)
*
Endoderma: sistema respiratório, fígado, pâncreas e epitélio de revestimento de glãndulas do sistema digestivo (exceto cavidades oral e anal)
Ectoderma: formará epiderme e anexos cutâneos (pêlos e glândulas), sistema nervoso e cavidades nasal, bucal e anal
Mesoderma: derme, músculo esquelético e liso, sistemas circulatório, esquelético, excretor e reprodutor.
Celoma cavidade com líquido revestida por mesoderma, no adulto formará a cavidade abdominal e torácica com tecido seroso.
Arquentero: intestino primitivo, será o intestino de adulto.
*
Revestimento (proteção, absorção iônica, molecular e percepção de estímulos) e secreção (glândulas)
*
Forma: vai de células colunares altas até pavimentosas achatadas e formas intermediárias. Núcleos: células epiteliais esféricas possuem núcleo esférico e as pavimentosas tem núcleos achatados.
Todos os epitélios estão apoiados sobre tecido conjuntivo. Qdo os epitélios revestem cavidades ocas, digestivo/respiratorio/urinario, o conjuntivo é chamado de lamina propria.
A porçao epitelial voltado ao conjuntivo é porção basal. E a oposta, voltada para a cavidade é porção apical e sua superfície é chamada superfície livre. Tb há superfície lateral (com outras células) e basolateral (com base de outras células). Entre as células epiteliais e tecido conjutivo temos a lamina basal.
Pavimentosas = achatadas
X superfície lateral (com célula adjacente)
Superfície basolateral
*
Fibras reticulares são associadas a lamina basal: lamina reticular
O termo membrana basal é usado para a camada que se situa abaixo dos epitélios. É faixa mais espessa enqto lamina basal mais densa (fina).
Caderinas são glicoproteínas. Junções intercelulares: são locais de adesão celular, vedantes e comunicação entre células.
Zonula de adesão: permite adesão entre células, composta por filamentos de actina
Zonula de oclusao oclui fluxo de materiais pelo espaço intercelular.
Desmossomos ou mácula de adesão:
tb tem em membrana musculo cardíaco.tem forma de disco. Na membrana interna do desmossomo há uma placa circular chamada placa de ancoragem , que servem para inserir filamentos de queratina do citoplasma celualr. São os desmossomos que promovem a adesão entre células via queratina, e contém caderinas auxiliam.
Hemidesmossomos são encontrados entre células epiteliais e lamina basal. Sua estrutura é metade de um desmossomo e serve para prender a célula epitelial a lamina basal. Contém integrinas (receptores de superfície celular para proteínas como laminina e colágeno IV).
Gap: existem em qq local da membrana lateral de células epiteliais e tb outros tecidos, exceto no musculo esquelético. Servem para intercambiar moléculas de até 1500 Da, e participam da contração cardíaca.
Microviolos (idades): servem para aumento da superfície celular e movimentaçao de partículas. ‘São projeções do citoplasma em forma de dedos, curtas ou longas. Permitem grande absorção ex. intestino delgado e rins (túbulos proximais), compostos por actina.
Microvilos mais glicocálice (espessa capa extracelular) formam a borda em escova.
Estereócitos: microvilos longos para movimento de moleculas, são móveis.
A superfície dos microvilos possuem cílios que são envolvidos por membrana plasmática e tem movimento, compostos por 2 microtúbulos centrais e 9 periféricos unidos entre si.
Epitélio de revestimento simples pavimentoso: células achatadas como ladrinhos e núcleos alongados, reveste lúmen de vasos sanguíneos e linfáticos, sendo chamado de endotélio. E tb cavidades pleural, pericardica e peritoneal, sendo chamado de mesotélio.
O cubico tem células cuboides e núcleo arrendondado. Está na superfície externa de ovário, formando parede de dutos excretores de glândulas.
O prismatico tem celulas alongadas e nucleos alongados, elípticos, reveste lumen intestinal e da vesícula biliar. Alguns podem ser ciliados como na tuba uterina para auxiliar o transporte de espermatozoides.
A partir daqui é para o estratificado:
O cúbico e prismatico são raros. O cubico em dutos de glandulas e o prismatico na conjuntiva do olho. O pavimentoso tem varias camadas e a forma das celulas depende do local. Proximas a lamina basal são cubicas ou prismaticas e migram para a superficie do epitelio tornando-se achatadas e alongadas. Revestem cavidades úmidas (boca, esofago, vagina) e é renovado devido ao atrito, sendo chamado de epitelio estratificado pavimentoso não queratinizado. Na superfície da pele é queratinizado (perdem organelas e o citoplasma é ocupado por queratina). A queratina protege perda de liquidos e penetraçáo poluentes.
O epitélio de transição reveste bexiga, ureter e porçáo inicial da uretra. A forma celular varia com a distençao e relaxamento do orgao.
O epitelio pseudoestratificado: diferentes alturas de observação dos núcleos, contem uma camada de células, parecendo varias. Reveste do nariz aos bronquios.
Sintese, armazenamento e eliminaçao de proteinas, lipideos ou carboidratos e proteinas (depende da glandula).
As unidades secretoras são envolvidas por celulas mioepiteliais (contem miosina e actina, capazes de contraçao)
Conforme os produtos são excretados, as glandulas são merócrinas (pancreas, secrecao é acumulada em granulos e liberada por exocitose), holocrinas (sebaceas, elimina a secreçao jutno com a celula) ou apócrinas (mamaria, secreçáo junto com porçoes de citoplasma).