SLIDES VIDEO AULA 8

Prévia do material em texto

BIOTECNOLOGIA
Profa. Ms. Geísa Paes
MARCADORES MOLECULARES
Profa. Ms. Geísa Paes
1. Introdução
2. Marcadores morfológicos 
3. Marcadores enzimáticos
MARCADORES MOLECULARES
Marcadores genéticos são quaisquer informações que 
possam caracterizar e diferenciar um indivíduo e, que 
sejam reproduzidas em seus descendentes.
Características morfológicas, fisiológicas ou 
moleculares podem ser usadas como marcadores 
genéticos
Permitem caracterizar e diferenciar espécies
MARCADORES MOLECULARES
✓Classificação dos marcadores genéticos:
Morfológicos Isoenzimáticos
DNA
Moleculares
MARCADORES MORFOLÓGICOS
✓ Baseados em características que podem ser 
visualizadas – fenótipo
✓Número limitado
✓ Falta de ligação 
✓ Influenciado pelo ambiente
MARCADORES ISOENZIMÁTICOS
✓ 1966 – Início do uso dos marcadores moleculares
✓ Isoenzimas = formas variantes de enzimas que 
catalizam a mesma reação na célula (similiar ou mesma 
função) 
✓Número limitado de locos que podem ser detectado
✓Baixo nível de polimorfismo por loco
✓Influenciado pelo ambiente
MARCADORES DE DNA
✓ São caracterizados pela variação nos nucleotídeos 
da sequência de DNA;
✓ São herdados geneticamente; 
✓ Não são influenciados pelo ambiente.
O que vai determinar a escolha de um 
ou outro marcador será o estudo das 
diferenças de seus princípios, a 
aplicação para a qual se destina e os 
recursos técnicos e financeiros 
disponíveis.
Como escolher? 
MARCADORES DE DNA
Como agrupar?
✓ Baseado no rendimento: de acordo com a quantidade de loci
genotipados por vez. 
• low trhoughtput genotyping (Genotipagem de baixo rendimento): Permite 
genotipar poucos loci por vez.
• high throughput genotyping (Genotipagem de alto rendimento): Genotipam
milhares de loci simultaneamente.
Esses marcadores diferenciam-se pela capacidade em discriminar alelos. Esta é uma 
característica bastante importante, de acordo com o estudo a ser realizado.
MARCADORES DE DNA
Como agrupar?
✓ Baseado no modo de ação gênica:
• Marcadores moleculares dominantes: possibilitam a identificação 
da presença ou ausência de um determinado alelo.
• Marcadores moleculares Codominantes: possibilitam diferenciar 
indivíduos homozigotos e heterozigotos, diferentemente dos 
marcadores dominantes.
MARCADORES DE DNA
Como agrupar?
✓ Baseado no método de detecção
• Hibridação = RFLP
• PCR (Polymerase Chain Reaction) = AFLP, RAPD, SCAR, SSR
• Sequenciamento = SNP
RFLP
Digestão de DNA Genômico e 
Separação em Gel
Transferência para Membrana de 
Nylon ou Nitrocelulose
RFLP
Hibridização em Nylon ou Nitrocelulose
Vantagens e Desvantagens de RFLP
• Reprodutível
• Marcadores codominantes
• Simples
• Trabalhoso
• Caro
• Uso de sondas radioativas
Profa. Ms. Geisa Paes _ geisapaes@gmail.com
UM FORTE ABRAÇO E ATÉ A PRÓXIMA AULA!!!