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Ordem Spirochaetales Gêneros -Treponema / Borrelia / Leptospira - Características • Coradas pela impregnação da prata; • Espiraladas, longas e flexíveis (0,1 μm diâmetro x 10-20 μm comprimento); Filamento axial; • Técnicas especiais de microscopia (campo escuro, coloração negativa, imunofluorescência). - Estrutura • Envoltório semelhante a bactérias Gram - negativas; • Filamento axial (endoflagelo) • Movimentação tipo saca-rolha. Localizado no periplasma (bainha); • Filamento constituído por feixes de fibrilas nas extremidades da célula e se dirigem à região central. - Cultivo • Bactérias com muita exigência nutricional; • Treponema pallidum não pode ser cultivado em meios artificiais; permanece viável em sangue (a 4 °C até 24 horas). Leptospira • L. interrogans • L. biflexa (apatogênica) - Descrição • Organismos espiralados • 0,1 um x 6 a 20um • Visualizados em campo escuro ou contraste. Gancho nas extremidades • Célula: Bainha externa e Endoflagelo - Crescimento • Aeróbios estritos • 29 – 30o.C • Tempo de geração de 12 horas • Meio Fletcher (soro de coelho) - Semi sólido - Resistência 1. Eliminadas • Ressecamento • Congelamento • Calor: 50o.C – 10 minutos • Sabão • Àcidos biliares • Ambiente ácido • Putrefação 2. Persiste: • Ambiente úmido • pH Neutro - Sorotipos Sorotipos: mais que 200 Sorogrupos: 19 - Ecologia • L. interrogans: -Túbulos renais dos mamíferos -Isolada de pássaros, anfíbios e répteis. • Roedores são portadores • Todo mamífero pode ser hospedeiro - Virulência • Penetração em tecidos macerados ou frágeis • Produção de citotoxina com efeito em tecidos vasculares - Isolamento e Identificação -Métodos diretos • Demonstração do agente (Campo escuro) • Órgãos • Urina • Sangue • Feto -Cultura • Meio de Fletcher • Identificação morfológica • Identificação sorológica *Sorologia Treponema - Espécies Patogênicas T. pallidum - sífilis T. pertenue - bouba T. carateum – pinta - Não Cultivável Provas diretas Diagnóstico sorológico - Campo Escuro teste de baixo custo e definitivo: - Sensibilidade - 74 a 86%; - Especificidade - 97% dependendo da experiência do avaliador - Provas Sorológicas (não treponemico) Falso positivas • transitórias: malária, gravidez, mononucleose infecciosa, viroses, tuberculose e outras • persistentes: (além de 6 meses): hanseníase virchowiana e doenças auto-imunes, como lúpus Falso negativas - sífilis 2a. (1% a 2%) decorrem do excesso de anticorpos (efeito prozona) - Provas Treponêmicas - Transmissão Via sexual (sífilis adquirida) Verticalmente (sífilis congênita) – transplacentária Contato com as lesões contagiantes (cancro duro e lesões secundárias) pelos órgãos genitais. – responsável por 95% dos casos de sífilis. via indireta (objetos contaminados, tatuagem) e por transfusão sangüínea. – mais raras • Sensibilidade aos Antibióticos Penicilina Benzatina Borrelia - Etiologia da DL Família: Spirochetaceae Ordem: Spirochaetales Gênero: Borrelia Grupo Borrelia burgdorferi “latu sensu” 9 espécies - 1 genoespécie não definida Bactéria espirala Flagelos periplasmáticos Microaerófila Borrelia burgdorferi - Epidemiologia Ocorrência Mundial Reservatório: 1. Animais silvestres vertebrados Vetor: • Carrapatos: • Ixodes dammini • Carrapatos de 3 hospedeiros 2. Animais domésticos: • Trazem os vetores para a proximidade com o Homem. • Alta soropositividade na população canina. - Doença no Homem • ECM – Lesão eritematosa, anular e centrífuga. • Febre • Mialgia • Artralgia • Dor de cabeça • Sintomas cardíacos • Neurológicos • Eritema migratório - Diagnóstico Laboratorial Hemocultura em meio de BSK modificado Microscopia de campo escuro RIFI ELISA indireto Western blotting PCR Dificuldades: - Reação sorológica cruzada com leptospira. - Difiuldade de crescimento em meios de cultivo. - Exame direto – sangue Vibrio - Características ▪Gram negativas ▪Bacilos móveis ▪Mesófilos ▪Fermentador da glicose/ oxidase positiva - Habitat ▪Ambientes aquáticos ▪Livres ou associados a organismos marinhos Vibrio cholerae • Bastonete levemente curvo • Único flagelo • Coloniza crustáceos e peixes • Degradador da quitina • 200 sorogrupos com base no antígeno O • O1 relacionados a pandemias - Virulência - Doença Diarreia profusa e vômito Morte por desidratação severa - Cultura • ágar-sangue e ágar MacConkey. Ágar seletivo especial para víbrios (ágar tiossulfato-citrato-sacarose-sais biliares [TCBS] ) • Meio de enriquecimento: Peptona alcalina (pH 8,6) Campylobacter - Características • Bacilos Gram-negativos curvos • Flagelados • Microaerófilo • Oxidase positivo • Não fermentador Campylobacter jejuni • C. jejuni • Subespécie doylei • Isolados do antro gástrico. Importância pouco estabelecida. • Subespécie jejuni • Agente de infecção intestinal - Coleta • Fezes • Swabs retais • Envio rápido ou em meio de Cary-Blair - Bacterioscopia Gram das fezes utilizando fucsina básica 0,1% por 2 minutos - Cultura • Microaerofilia: 5% O2/ 10% CO2/ 85% N2 • Filtração das fezes • Ágar Carvão Desoxicolato Cefoperazona, • meio Campy CVA (Cefoperazona, Vancomicina e Anfotericina) • Karmali (base de Columbia ágar, carvão ativado e suplemento de antibióticos) Helicobacter • Bastonete Gram negativo curvo • Pacientes com gastrite B - Diagnóstico • Histopatológico de biopsia gástrica • Atividade da enzima urease em biópsia
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