Introdução à Histologia Humana

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Introdução à Histologia Humana
Citologia - estudo da célula - auxílio
do microscópio eletrônico.
Histologia - estudo dos tecidos
(grupos de células que
desempenham uma função) -
microscópio de luz.
As lâminas histológicas
correspondem ao tecido preparado
para a análise e estudo no
microscópio.
A histologia além de estudar os
tecidos, avalia a matriz extracelular
(MEC).
*O tecido nervoso é aquele que não possui
MEC.
Organização do corpo humano
Tecidos do organismo
- Epitelial;
- Conjuntivo;
- Muscular;
- Nervoso;
Epitelial - células poliédricas
justapostas - pequena quantidade
de MEC - revestimento da superfície
ou de cavidades do corpo, também
tem função de secreção.
Conjuntivo - vários tipos de células
fixas e migratórias - MEC
abundante - apoio e proteção.
Muscular - células alongadas e
contráteis - quantidade moderada
de MEC - função de movimento.
Nervoso - longos prolongamentos -
nenhuma / pouca MEC - detecção
de estímulos e transmissão de
impulsos nervosos.
Microscópio de luz
Aparelho óptico (contém lentes) o
qual sob efeito da transiluminação
em preparações coradas, permite
que objetos diminuídos ou
estruturas imperceptíveis à vista
desarmada sejam ampliados.
A obtenção de amostras para
visualização no microscópio de luz
exige o processamento histológico.
Esse consiste em técnicas de
preparação dos tecidos para que
as características do tecido in vivo
(estrutura e composição) sejam ao
máximo preservadas para a
avaliação.
Fases do processamento
histológico (histotécnica)
1. Fixação
2. Desidratação
3. Diafanização
4. Infiltração
5. Inclusão
6. Microtomia
7. Coloração
8. Montagem
*Os ossos e dentes passam por desmineralização
- descalcificação para que possam passar pela
microtomia.
Coleta do material: in vivo ou
post-mortem (necropsia).
Fixação: preservar a arquitetura
tecidual - pode ser por métodos
químicos (formaldeído,
glutaraldeído ou bouin) ou físicos
(congelamento - método mais
rápido - patologistas de centro
cirúrgico).
O fixador vai fazer ligações entre os
componentes celulares tentando
manter a estrutura (peça endurece).
- manter a estrutura;
- evitar autólise - degeneração;
- eliminar bactérias, fungos e
vírus;
- promove ligações cruzadas e
a desnaturação proteica
(endurecimento);
Desidratação: banhos de álcool
(etanol) para a retirada de água do
tecido de forma gradativa (50%,
60%, 70%,…,100%);
Diafanização: processo que dá
transparência ao tecido e o
prepara para os banhos de
parafina. São utilizadas soluções
como o xilol e o toluol;
Infiltração: banhos de parafina nos
fragmentos teciduais;
Inclusão: confecção dos blocos de
parafina em moldes, onde os
fragmentos teciduais devem ser
colocados seguindo uma
orientação;
Microtomia: corte dos blocos no
micrótomo para obtenção de finas
fatias teciduais com espessura
variando entre 1 e 5µm.
Coloração: uso de corantes para
permitir a visualização das
estruturas teciduais.
Rotineiramente, utilizam-se dois
corantes: a hematoxilina e a eosina
(H-E). O primeiro é um corante
básico que reage com o núcleo das
células, corando-os de roxo. O
segundo corante é ácido e é
responsável pela coloração rósea
do citoplasma e da matriz
extracelular.
Montagem da lâmina: uso de
resinas naturais ou sintéticas para
a selagem da lamínula sobre o
corte.
Microscópio óptico (aula prática)
Parte óptica do microscópio óptico:
Objetivas: as lentes objetivas
podem ter um grau de ampliação
de até 100 vezes. Em geral, os
microscópios podem ter de 3 a 4
objetivas.
Oculares: é um sistema de lentes
que possui um aumento de até 10
vezes.
Diafragma - controla a quantidade
de luz que entra no condensador.
Condensador - concentra os feixes
de luz que incidem sobre a amostra
a ser analisada.
Fonte de luz: é a fonte que projeta
a iluminação.
Parte mecânica de um microscópio
óptico:
Canhão: parte utilizada como
suporte para as lentes.
Revolver: disco rotativo onde são
acopladas as lentes objetivas.
Platina: base onde é possível apoiar
a lâmina para visualização da
amostra.
Macrométrico e micrométrico:
partes do microscópio que
permitem focar a amostra ao
movimentar (verticalmente) a
platina. Macrométrico - foco
grosseiro / micrométrico - foco
refinado.
Braço: suporte para as demais
peças do microscópio e peça pela
qual se faz o transporte.
Base - Instrumento de apoio para
todo o microscópio.
Pinça - peça para manter
posicionada e fixada a lâmina
durante a visualização.
Charriot - permite a movimentação
da platina na horizontal - frente /
trás - esquerda / direita.