Prática - Núcleo interfásico e Divisão celular

Prévia do material em texto

AULA PRÁTICA – Núcleo interfásico e Divisão Celular 
Objetivos Gerais: 
1. Caracterização dos elementos do núcleo interfásico, bem como a demonstração de alguns dos 
fenótipos nucleares. Observar que o fenótipo nuclear pode ser indicativo de atividade sintética na 
célula e, consequentemente, a sua análise pode ser fator diagnóstico para determinadas doenças e 
variações morfofuncionais. 
 
2. Fornecer as ferramentas necessárias para que o aluno seja capaz de identificar as diferentes fases 
da mitose. 
 
 
PARTE 1 – Fenótipos nucleares 
 
Lâmina de Fígado corada pela HE (lâmina 3): O aluno observará esta lâmina em objetiva de imersão e 
caracterizará os principais componentes dos núcleos interfásicos dos hepatócitos. Deverá também observar 
que algumas células apresentam-se binucleadas. 
 
Lâmina de Língua corada pela HE (lâmina 13): O aluno deverá observar a posição, a quantidade e a forma 
dos núcleos nas células musculares estriadas esqueléticias 
 
Sangue humano corado pelo método Panótico(lâmina 8): O aluno deverá caracterizar as formas nucleares 
dos leucócitos granulócitos e agranulócitos. 
 
 
PARTE 2 – Nucléolos 
 
Lâmina de imprint de fígado de rato submetido ao método da AgNOR: O aluno observará que os nucléolos 
marcam-se em castanho escuro pela técnica e que o número e tamanho podem ser variáveis em um mesmo 
tipo celular. 
 
Pergunta-se: 
1. A que se deve o fato de um mesmo tipo celular apresentar respostas diferentes às marcações nucleolares 
pelo método da AgNOR? 
2. O tamanho e quantidade de nucléolos em uma célula está indiretamente associado a que evento 
citoplasmático? Por que? 
 
 
PARTE 3 – Ultra-estrutura do núcleo interfásico 
 
A partir das indicações do docente, você observará, no álbum de eletromicrografias os principais 
componentes do núcleo interfásico: o envoltório nuclear, a cromatina e o nucléolo. 
 
 
 
PARTE 4 – Mitose em células do meristema apical da raiz de cebola 
 
1. Técnica de esmagamento e coloração pela Orceína Lacto-acética: 
 
PROCEDIMENTOS: 
 
1. Três a quatro dias antes da aula prática, colocar bulbos de cebolas para o processo de enraizamento. 
Em primeiro lugar, retira-se os catáfilos secos da cebola e com uma lâmina de barbear, corta-se um 
pedaço da extremidade inferior (prato) retirando as possíveis raizes secas. Coloca-se a sebola sobre 
um copo cheio de água, de maneira que o prato fique mergulhado. 
2. Após este período, com uma pinça ou lâmina de barbear, corte da extremidade para cima, cerca de 0,5 
cm da raiz. 
3. Levar os fragmentos ao fixador de Carnoy (Etanol: Ácido acético, 3:1, V/V) por cerca de 20 minutos. 
4. Hidrólise ácida (em HCl a 1N: álcool 95%, em solução 1:1, V/V) por 10 minutos. 
5. Voltar ao fixador de Carnoy por mais 10 minutos. 
6. Colocar uma gota do corante Orceína Lacto-acética sobre a lâmina e depositar apenas um fragmento da 
raiz da cebola. 
7. Com estiletes e lâminas de barbear, fragmentar muito bem a raiz. Utilize apenas 0,3 cm da extremidade e 
despreze o restante. 
8. Colocar uma lamínula e deixe entre 5-10 minutos. 
9. Promover o esmagamento do material. 
10. Em seguida lutar a lamínula com esmalte incolor. 
11. Observar e esquematizar as fases da Mitose. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Nome:_____________________________________________________Turma:_________ 
Assunto da aula: _____________________________________________________________Data: _____________ 
 
 
 
 
Material: ___________________________ 
Coloração: _________________________ 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Aumento: _______________ 
 
 Material: ___________________________ 
 Coloração: _________________________ 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 Aumento: _______________ 
 
 
 
Material: ___________________________ 
Coloração: __________________________ 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Aumento: ___________ 
 
 
 
 Material: ___________________________ 
 Coloração:__________________________ 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 Aumento: ______________