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Práticas Funcionais - 1 Etapa Fotometria e Glicemia Fotometria Métod de analise química X física ↳ análise química → responsável por desenvolver métodos que permitem a identificação e quantificação de elementos e/ou compostos químicos que estão presentes em uma amostra Transformação da amostra — faz a reação, fez a leitura e não pode repetir porque a amostra foi modificada Exemplo: gravimetria e volumetria (destinado a medida de gases) ↳ análise física → existem dois métodos: o que mede corrente elétrica e a fotometria Sem modificação Em análises químicas é usado mais método físico Métod de analise qualitativa X análise quantitativa Análise qualitativa → quando você pretende identificar quais espécies estão presentes numa amostra, sendo elas atômicas ou moleculares, independente de sua quantidade. O resultado pode ser obtido pela mistura de outro componente à mistura. Exemplo: se é reagente ou não (qualquer teste rápido + ou -), beta HGC, Análise quantitativa → caso já saiba os componentes presentes na amostra e apenas deseja determinar a quantidade dessas espécies. Exemplo: concentração, título Podem ser classificado tanto como quali como quanti: teste pra sífilis Não obrigatoriamente é preciso fazer um teste quali antes do quanti — exemplo glicose Conceituar fotometria Nada mais é do que o ato de medir a luz. Método quantitativo (serve para medir a concentração) Mede a quantidade de luz absorvida Ela é capaz de mostrar, graficamente, o comportamento de uma luz, e possibilita medir o fluxo luminoso tanto da fonte de luz quanto da luminária, auxilia na hora de determinar o rendimento óptico da luminária e também mapeia a distribuição angular da intensidade luminosa A chance da luz passar por uma amostra mais concentrada é maior Absorbancia é diretamente proporcional a concentração da amostra A transmitância é inversamente proporcional a concentração Princípio da pectrofotometria (equipamento da fotometria) O conhecimento da absorção de luz pela matéria é a forma mais usual de determinar a concentração de compostos presentes em solução. Todo composto químico absorve, transmite ou reflete luz (radiação eletromagnética) em uma certa amplitude de comprimento de onda. Por meio da espectrofotometria é realizada a medição da intensidade da luz em comprimentos de onda, sendo que os componentes de uma solução podem ser identificados por seus espectros característicos ao ultravioleta, visível ou infravermelho. A técnica utiliza a propriedade das soluções de absorver ou transmitir a luz para quantificar reações. Na prática, a quantidade de luz absorvida ou transmitida é proporcional à concentração da substância em solução. Como uma impressão digital, saber exatamente a cor absorvida, nos permite identificar e quantificar materiais diferentes. Quanto mais concentrada for a solução, maior será a absorção de luz. Por outro lado, a cor da solução é determinada pela cor da luz transmitida. • energia luminosa que é absorvida por uma determinada espessura de um material. Ou seja, a capacidade de absorver luz. Glicemia Diferenciar em uma amtra de sangue a diferença entre soro e plasma O soro é obtido após a coleta, coagulação da amostra e posterior centrifugação, sendo que nenhum anticoagulante é utilizado. O objetivo é que haja a formação de coágulo e nesse processo os fatores de coagulação, plaquetas e fibrinogênio são consumidos. Então, de forma simplificado, o soro é o plasma sem fibrinogênio e fatores de coagulação No laboratório, é possível obter o plasma da amostra através da adição de um anticoagulante no tubo de coleta. Existem vários tipos de anticoagulante, como o EDTA, citrato de sódio, heparina etc. Por exemplo, testes da coagulação precisam ser realizados no plasma, ou seja, após a centrifugação da amostra, o sobrenadante precisa conter todas as proteínas e fatores da coagulação. Para isso, utiliza-se o citrato de sódio que bloqueia a cascata da coagulação, não deixando que esses componentes sejam utilizados, inibindo a formação do coágulo. "Mas se o plasma da amostra tem todos os fatores de coagulação, por que ele não coagula por só?” Bem, o papel principal do citrato de sódio é formar um quelato com cálcio, ou seja, ele irá se ligar aos íons cálcio da amostra e a cascata da coagulação será interrompida. Essa ligação é facilmente reversível, através da adição de novos íons cálcio na amostra. Justamente por causa dessa propriedade é que ele é o anticoagulante usado nos testes de coagulação. Nos testes de coagulação, o cálcio (do kit de diagnostico) é adicionado a amostra, para a formação de um coágulo. O tempo entre a adição do cálcio e a formação do coágulo é que será o resultado do teste Diferença — O soro não tem fibrinogênio, não tem proteína porque elas foram usadas para a formação do coágulo O plasma tem proteínas da coagulação (fibrinogênio) e anticoagulante Soro e plasma possuem albumina Citar o anticoagulante utilizado para coleta de sangue para realização de uma dagem glicemia. Juifique O fluoreto de sódio é o anticoagulante de escolha para os exames de dosagem de glicemia. Ele é capaz de prevenir que as hemácias e leucócitos metabolizem a glicose inibindo a via glicolítica anaeróbica (fermentação láctica) conseguindo medir corretamente — enzima henolase Tubo de ensaio cinza. Glicemia dosa no plasma Processos metabólicos que ocorrem no interior da hemácia: via das pentoses e via glicolitica Citar métod exient para a determinação da glicemia em um paciente Principais exames para diabetes • Exame de glicemia → realizado para medir os níveis de glicose no sangue. Através da analise de coleta, é possível identificar a diabetes por meio de níveis elevados de glicose (hiperglicemia). Geralmente o exame é recomendado para pessoas acima de 40 anos ou que possuem fatores de risco Normal — abaixo de 100mg/dl Pré diabetes — entre 100 mg/dl e 125 mg/dl Diabetes — mais de 125 mg/dl O paciente precisa fazer jejum de 8 horas antes de estimar a quantidade de glicose no sangue. Caso contrario, os exames podem apontar falsos resultados. • teste oral de tolerância à glicose → conhecido como exame da curva glicêmica, tem como objetivo avaliar o funcionamento do organismo exposto à várias concentrações de glicose. Em outras palavras, o exame calcula glicemia antes e depois do paciente beber algo açucarado. A coleta acontece em 3 etapas: a primeira realizada em jejum de 8 horas, a segunda após 1 hora após a bebida açucarada e a terceira 2 horas após a primeira medição. Tabela de valores após duas horas de ingestão: Normal — glicemia abaixo de 140mg/dl e 199mg/dl Pré diabetes — glicemia entre 140mg/dl e 199mg/dl Diabetes — glicemia igual ou superior a 200mg/dl • teste de hemoglobina glicada: é realizado a partir da coleta de sangue do paciente em jejum. Com ele, o médico consegue avaliar a quantidade de glicose no sangue dos últimos 3 meses Baixo risco — inferior a 5,7% Risco — entre 5,7 a 6,4 Diabetes — igual ou acima de 6,5 O exame também é usado para avaliar a melhora ou piora da diabetes, e quanto maior forem os níveis, maior o risco do paciente desenvolver outras complicações • frutosamina: mede os níveis de glicação da albumina. A albumina é uma proteína do sangue, e partir de sua avaliação é possível visualizar o controle glicêmico das ultimas 2 semanas. O teste é indicado quando o medico precisa saber a média de glicose em períodos menores ou quando a medição da hemoglobina glicada não é confiável. No caso da frutosamina, os valores variam de acordo com o laboratório de análises clínicas • glicemia pós-prandial: avalia os níveis de glicose no sangue após a ingestão de alimentos contendo carboidratos Citar valor de referência adotad para a glicemia em jejum e sem o jejum Na glicose de jejum entre 100 e 125mg/dl é chamada de glicemia de jejum alterada. A partir de 126mg/dl já tem-se o diagnósticode diabetes Na glicose sem jejum, valores acima de 140mg/dl remetem o diagnostico de intolerância à glicose e acima de 200mg/dl também temos o diagnostico de diabetes Citar as indicaçõ clínicas para a indicação de uma dagem glicêmica • sede • Aumento da vontade de urinar • Muita fome • Perda de peso inexplicada • Cansaço • Dor de cabeça • Enjoo • Sonolência • Formigamento nas mãos ou pés • Visão embaçado